GB/T 38477-2020 基因表达的测定 蛋白印迹法

ICS07.080

A21GB

中华人民共和国国家标准

GB/T38477-2020

基因表达的测定蛋白印迹法

Determinationofgeneexpression-Westernblot

2020-11-19发布2020-11-19实施

国家市场监督管理总局申＃

国家标准化管理委员会保叩

GB/T38477-2020

前言

本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。

本标准由中国标准化研究院提出并归口。

本标准起草单位，j可北医科大学、中国标准化研究院、河北省食品检验研究院、中国科学院遗传与发

育生物学研究所农业资源研究中心、中国医科大学、河北师范大学。

本标准主要起草人＝吕品、马爱进、张岩、赵伟东、曹鹏秀、赵美墨、王宁。

I

GB/T38477-2020

基因表达的测定蛋白印迹法

1范围

本标准规定了用蛋白印迹（Westernblot）法测定基因表达的方法原理、试剂或材料、仪器设备、测

定步骤和结果分析。

本标准适用于动植物组织或体外培养细胞目的基因表达测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语、定义和缩略语

3.1术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1.1

基因表达geneexpression

将储存在DNA分子中的遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子的过程。

3.2缩略语

下列缩略语适用于本文件a

BSA：牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin)

ECL：增强型化学发光（EnhancedChemiluminescence)

sos，十二；院基硫酸销（SodiumDodecylSulfate)

SOS，十二炕基硫酸销－聚丙烯酷胶凝胶电泳（SodiumDodecylSulfate-PolyacrylamideGel

Electrophoresis)

TBS,Tris缓冲盐溶液（TrisBufferedSaline)

TBST：吐温20/Tris缓冲盐溶液（Tween20/TrisBufferedSaline)

4原理

SOS分离的蛋白质转移到转印膜上后，先用抗目的蛋白质的一抗与转印膜上的蛋白质反

应，然后利用带标记的二抗与一抗反应，最后根据二抗标记物的特性，检测微量蛋白质。

1

GB/T38477-2020

5试剂或材料

5.1总则

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

5.2*

GB/T6682，三级。

5.31皿ol/LTris-盐酸溶法

称取12.1gTris加入80mL水溶解，用盐酸调至所需pH，加水定容至100mL,

5.42mol/L氯化铀溶液

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