T/CAICC 01-2021 生乳中吡虫啉的快速检测 胶体金免疫层析法

范围:本方法规定了生乳中吡虫啉的胶体金免疫层析快速检测方法。 本方法适用于生乳中吡虫啉的快速测定; 主要技术内容:3原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的吡虫啉经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和试纸条中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中吡虫啉进行定性判定。4试剂与材料4.1试剂除另有说明外，所有试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T 6682中二级水的要求。4.1.1甲醇（CH3OH）。4.1.2参考物质：吡虫啉参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥98%。表1吡虫啉参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量吡虫啉Imidacloprid138261-41-3C9H10ClN5O2255.7注：或等同可溯源物质。4.2溶液配制4.2.1吡虫啉标准储备液（100 μg/mL）：准确称取吡虫啉参考物质（4.1.2）1 mg，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100 μg/mL的吡虫啉标准储备液。4℃避光保存，有效期6个月。4.2.2吡虫啉标准工作液（1 μg/mL）：精密移取吡虫啉标准储备液（100 μg/mL）（4.2.1）0.1 mL，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1 μg/mL的吡虫啉标准工作液。临用新配。4.3材料吡虫啉胶体金免疫层析试纸条，适用基质为生乳。需在阴凉、干燥、避光条件下保存。4.3.1金标微孔（含胶体金标记的特异性抗体）。4.3.2试纸条。5仪器与设备5.1电子天平：感量为0.01 g。5.2移液器：10 μL~200 μL、100 μL~1000 μL。5.3迷你金属浴。6分析步骤6.1试样制备取适量有代表性样品充分混匀。6.2试样提取以生乳为基质的样品可直接上样检测或根据产品说明书稀释后检测。6.3测定步骤吸取200 μL样品待测液于金标微孔（4.3.1）中，抽吸5~10次使混合均匀，35℃温育5 min，将检测试纸条（4.3.2）样品端垂直向下插入金标微孔中，35℃温育5 min，取出试纸条，对结果进