HJ 755-2015 水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定 纸片快速法

J

中华人民共和国国家环境保护标准

HJ755-2015

水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定

纸片快速法

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2015-10-22发布2015-12-01实施

到三嗲琶f呆主卢者15发布

HJ755-2015

中华人民共和国环境保护部

公告

2015年第62号

为贯彻4中华人民共和国环榄保护法1，保护坪挠，保陀人体健肢，规范环挠监测工作，现批准4水

质问特拉津的测定气相色谱法》等八项标准为国家环榄保护标准，井1，发布.

标准名称、编号如下

一、4水质阿特拉部的测定气相色谱法1(HJ754-2015)

二、4水质总大肠商群和粪大肠商群的测定纸片快速法1(HJ755-2015),

三、4水质丁基黄原酸的测定紫外分)'(;光度法1(HJ75仕-201日，

四、4点质锚的测定火焰原子版收分光光度法>>(HJ757-2015)

五、4水质卤代乙酸类化合物的i!li定气相色谱法1(HJ758-2015),

六、《环域空气挥发性有机物的i!l1定罐采样/气相色讲-质谱法1(TIJ759-2015),

七、4固体废物挥发性有机物的测定顶空-气相包谱法1(HJ76(}--2015),

J\、4固体废物有机质的测定灼烧减盘法)(HJ761-2015).

以上标准自2015年12月1日起实施，由中国环提出版社出版，标准内容时在邮统保护部网站

(bz.m)查询.

特此公告.

环境保护部

2015年10月22<1

HJ755-2015

目;欠

1:甜言。>v

I适用范围!

Z术画和定义...........,…............................................................................................1

3方法原理.:......................................................1

4试剂和材料..........................................................................................................................................1

5仪器和设备2

6样品2

7分析步骤...................................3

B结果计算与表示5

9精密度和准确Jj!'.............................................................................................................................................5

10质量保证和质盐控制6

11废物处理6

附录A(资料性附录〉结操判定参寺阁片......................、.......................7

附录B(资料性附录〉是大可能数(MPN)衰。8

iii

HJ755-2015

目。

为贯彻《中华人民共和国环组保护法'和《中华人民共和国水污染防泊法>>，保护环挠，保障人体

健肢，规范水中总大肠菌群和粪大肠菌群的测定方法，制定本标准.

本标准规定了地表革和废水中且犬肠菌群和粪大肠菌群测定的纸片快速法.

本标准为首次发布.

本标准附录A和附录B为资料性附录.

本标准由环镜保护部科技标准司组织制订.

本标准主要起草单位常州市环境监测中心、环境保护部环境标准研究所.

本标准验证单位上海市环塌监测中心、江苏省环街陆测中IL.'、浙江省环挠监测中心.苏州市环挠

监测中心站、南京市环镜监测中'L.'站和泰州市环镜监测中心站.

本标准环绕保护郎2015年四月22日批准.

本标准自2015年12月1日起实施.

本标准由环境保护部解释.

IV

HJ755-2015

水质总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法

1适用范围

本标准规定丁测定堆中总大肠耐群和粪火肠商群的纸J-l快速法.

本标准适用于地裂症、脏水巾且大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定.

本方法的检出限为20MPNι.

2术语和定义

下列术语和定义适用于本标准.

2.1

总大肠菌群totalcoliforms

37'C培养.24h内能发醉乳糖产股产气的11，]氧及舵性厌机的革兰氏阴性充当抱杆商.

2.2

粪大肠菌群fecarcoliforms

44.5"C培养，目h内能发醉乳糖产酸产气的韬氧及般性反氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌.

2.3

量大可能数mo:stprobablenumber,MPN

微生物检验常用发酵法，又称稀释法，是一种利用统计学原理应ííJ检测微生物浓度的方法.官根据

不同稀释度一定体积样品中被检微生物存在与否的频率，查表求得样品中微生物的浓度，与直接报告菌

落数的平板计数法不同，它最终报告的是样品中最有可能存在的目标微生物浓度，这个以最大可能存在

的浓度，就被称为位大可能数(mostprobablenumber.MPNλ

3方法原理

按MPN法，将一定班的水样以无前操作的方式接种到吸附有适量指示剂〈泯甲盼紫和2，3，5-氧化

三苯基囚氮嗤即1TC)以及乳糖得营养成分的无菌滤纸上，在特定的温度(J7'C班44.5'C)培养24h.

当细菌生长繁殖时，产限使pH也降低，浪甲盼紫指示剂由紫鱼变黄色，同时，产气过程相应的脱氢酶

在适宜的pH范固内，催化底物脱氢还原1TC形成红色的不榕性三苯甲1M(1TF)，即叮在产酸后的黄

色背Jil下显示出红色斑点(或红晕)，通过上述指示剂的颜色变化就可对是否户'股产气作出判断，从而

确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在，而通过资MPN表就可得山相应总大肠l<ï群或禁大肠菌碎的

浓度也.

4试剂和材料

除非另有说明，分析时均使用符合国家标附的分析纯化学试剂.

4.11\ï111水质且大肠菌群和提大阪菌群测试纸片10ml水样E纸片、1ml水样fo(纸片

按以下方法进行质量鉴定，达到要求后方可使用.

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(1)外层组销包装袋应密封完好，内包装聚丙烯塑胶袋无破损.

(2)纸片外观应整洁无毛边，无损坏，主均匀谈黄绿色，加击离于水或蒸馆;在后呈紫色，无论加水

与否，应无杂色斑点，无明显变形，表面平整。

纸片不加7]<纸片加本

(3)纸片加入相J.ili:*样.充分浸润、吸收后，将肉包装聚丙烯塑胶袋倒置，袋口应无水滴悬挂.

(4)纸片以去商于水就蒸馆1水充分润湿后，其pH{，且应在7.0~7.4范围内.

(5)纸片和I内包装聚丙烯塑胶袋应无前，加入相应水班的无菌水，3TC:tI"C培养24h后.纸片应

无微生物生怪，其紫色保持不变，且无红斑出现.

(6)技7.4.2中的方法进行总大肠简群和粪大肠菌群阴性、阳性标准前l株检验，其特性应符合要求-

4.2元前水

用新市l晶的去离于水或蒸f田水，按无菌操作要求，121"C高压蒸汽灭菌20min.备用-

4.3硫代硫酸纳溶液2ρ(Na2S20j)=0.10g1ml.

称取硫代硫酸纳10g，浴于适ftU在馆北〈或去商于水〉中，稀释至100ml.现配-

4.4乙二肢囚乙酸二铀(EDTA-Na2)溶液p(CIOHI4N20gNa2'2H20)=0.15glml.

称取EDTA-Na215g.洛于适量蒸馆水〈或去离于水〉中，稀释至100时，此滔液保质册为30d.

5仪器和设备

5.1'1亘温培养箱37"C:tI"C.

5.2恒温培养箱44.s"C:t0.5'C.

5.3高压蒸汽灭flj嚣121"C、101.3kPa.

5.4冰箱0~4"C.

5.5移液管1ml士0.01ml、10ml士0.1mL.

5.6试管，，15mmxlS0mm.

5.7来样瓶250ml.

洼'移液肾、试臂、罪样阳非政硝器皿且来样器具试验前要按无菌操作罢草包扎，121'C两!El在汽王菌20min，

棋子，备用.

6样品

6.1样品采集

与其他项目一向来样时，先单独采集微生物样品，采样瓶不得用水样洗涤，按无商操作的要求采集

水样约200ml于灭菌的来样瓶中.

2

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采集江、河、湖、库等地表水样时，可握住瓶于下部直接将带器来样瓶插入水中，距水面10--15cm

处，瓶口朝#.流方向，拔孩嚣，使J水梓灌入瓶内然后盖上瓶塞，将来样瓶从水中取tJl.如果没有水流，

可握住瓶子水平前推.果好水样后，迅速扎上无回包装~.

从龙头装置采集样品时，不要选用漏串的龙头，来水前将龙头打开至最大，放水3--5min然后

将龙头关闭，用火焰灼烧约3min火酶.;1足龙头，再放水1rnin.以充分除去水管中的滞留杂质.采

样时控制水流速度，小心接入lIli内.

采集地表水、废水样品及一定深度的革样时，可使用灭菌过的专用来样装置采样.

在同一采样点进行分后来样时，应自上而下进行，以免不同居汰的搅拢.

6.2样品保存

采样后2h内检测，否则，需lO"C以下冲藏并不得超过6b.实验室接样后，不能立即开展检测的，

应将样品政入。-4"C怵箱并2h内测定.

6.3干扰和消除

如果来挠的是古有余氧取经过加氯处理的7J(样，搭在采样瓶火i有前加入伯代酣t阪响部液(4.3)