DB51/T 613-2014 柑桔黄龙病检验鉴定方法

ICS65.060.35

B31

DB51

四川省地方标准

DB51/T613—2014

代替DB51/T613-2006

柑桔黄龙病检验鉴定方法

2014-11-11发布2014-12-01实施

四川省质量技术监督局发布

DB51/T613—2014

目次

前言...............................................................................II

1范围..............................................................................1

2规范性引用文件....................................................................1

3原理..............................................................................1

4仪器及用具........................................................................1

5试剂和材料........................................................................1

6方法..............................................................................2

7结果判定..........................................................................4

8灭活处理..........................................................................4

附录A（资料性附录）柑桔黄龙病的基本信息............................................5

附录B（资料性附录）柑桔木虱的基本信息..............................................6

I

DB51/T613—2014

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则进行编写。

本标准附录A、附录B为资料性附录。

本标准代替DB51/T613-2006，与原标准相比，发生的主要技术变化：

——新增柑桔黄龙病PCR检测引物序列；

——新增样品取样方法和取样数量；

——PCR反应体系优化；

——PCR反应程序优化。

本标准由四川省农业厅提出并归口。

本标准由四川省质量技术监督局批准发布。

本标准起草单位：四川省农业厅植物检疫站。

本标准主要起草人：万佳、宁红、刘可、吴志平、郭迪金、李小松、邓亚岷、黄玲、熊玉兰。

本标准历次发布情况：第一次，DB51/T613—2006。

II

DB51/T613—2014

柑桔黄龙病检验鉴定方法

1范围

本标准规定了柑桔黄龙病的田间及实验室检验、鉴定技术要求。

本标准适用于对芸香科植物感染柑桔黄龙病植株以及柑桔黄龙病菌传播媒介的检验、检测和鉴定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

3原理

柑桔黄龙病的田间症状复杂多样，该病菌属难培养菌，目前尚无法进行人工培养，因此，在鉴定时

除了进行田间识别外，主要采取病原菌DNA体外扩增的方式进行检测。用根据柑桔黄龙病菌核糖体基因

序列设计的一对特异性引物与模板DNA（即待检样品中病原菌DNA）进行聚合酶链式反应（PCR），引物

与模板DNA结合后，在DNA多聚酶的作用下，使样品所带的微量柑桔黄龙病菌DNA分子多次成倍扩增，最

终通过凝胶电泳分离检测出382bp的柑桔黄龙病特异性DNA谱带，根据该谱带的有无确定样品是否带有

柑桔黄龙病菌。

4仪器及用具

高速台式离心机、PCR扩增仪、PCR反应管、水平电泳仪、凝胶