WS/T 231-2002 用于纸片扩散法抗生素敏感试验的脱水 Mueller-Hinton 琼脂的检验规程

c50

ws

中华人民共和国卫生行业标准

WS/T231-2002

用于纸片扩散法抗生素敏感试验的脱水

Muelle1

ProtocolsfortheevaluationofdehydratedMueller-Hinton

agarinthediskdiffusionprocedurefor

antimicrobialsusceptibilitytesting

2002-04-20发布2002申07-01实施

中华人民共和国卫生部发布

WS/T231-2002

前日一占

本标准是在卫生部颁发的《全国临床检验操作规程》〈第二版）的基础上，参考NCCLS标准，结合中

国国情及卫生系统的实际情况和要求而制定。

本标准从2002年7月1日起实施。

本标准由卫生部医政司提出。

本标准的附录A是标准的附录，附录B、附录C都是提示的附录。

本标准由北京大学人民医院负责起草。

本标准主要起草人z张正、杨娟、赵晓涛。

本标准由卫生部委托卫生部临床检验中心负责解释。

中华人民共和国卫生行业标准

用于纸片扩散法抗生素敏感试验的脱水

WS/T231-2002

Mueller-Hinton琼脂的检验规程

Protocolsfortheevaluationofdehydrated岛1uellerHinton

agarinthediskdiffusionprocedurefor

antimicrobialsusceptibilitytesting

1范围

本规程规定了评价Mueller-Hinton琼脂（M-H琼腊〉产品报号的要求，包括制造商评价（M-H琼

脂）产品批号的规则及评价新的参考培基的规则。

本规程仅适用于评价纸片扩散法抗生素敏感试验用M-H琼脂的检验，而不能保证M-H琼脂在其

他试验中的质量，例如琼脂稀释或抗生素梯度试验。

2材料

2.1质控标准菌株

用ATCC的冻干标准菌株制备质控菌株，根据ATCC的规定复苏菌种。所需的菌种有：金黄色葡萄

球菌ATCC25923，大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853，粪肠球菌ATCC33186

（或Aτcc29212），金黄色葡萄球菌ATCC43300和大肠埃希菌ATCC352180

2.2菌株TSA墙基培养

将质控菌种的复苏液接种于两或三个含5%羊血的大豆严酷蛋白消化琼脂（TSA）平板上，置35℃环

境中孵育18h~24h。

2.3肉汤增菌

孵育结束后检查纯度并收获平板上的全部生长物。在．含有15%甘油的大豆－酷蛋白消化肉汤

(TSE）中悬浮。Cl5%TSB的制备z将脱水肉汤培养基30g榕于大约500mL去离子水中，并添加

150mL的甘油，定容至1L，棍匀，121℃15min高压灭菌）。

2.4标准菌株复苏

接种平板的前一天，将所需的质控菌种每种各融化一瓶，接种至含5%羊血的TSA平极上，在35℃

环境中孵育18h~24h。孵育后，如果检查纯度满意，这些菌株就可以用于接种待测M-H培养基，按

WS/T125-1999《纸片法抗菌药物敏感试验标准》操作。

2.5质控菌种的更新

定期用ATCC的新鲜冻干标准菌株更新贮存菌种。

3试验方法及流程

3.1严格按照我国已有标准（WS/T125）中规定的步骤和时间进行纸片扩散法抗生素敏感试验。

3,2按照下面的时间表进行试验。

3.2.1第一天

中华人民共和国卫生部2002-04-20批准2002-07-01实施

1

WS/T2312002

3

,

2.1.1培养基制备z将

3

8

.0g的脱水Mu

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3

,

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2

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，

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。

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W

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T

1

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