DB34/T 3293-2018 农田杂草反枝苋对草甘膦抗性检测技术规程

ICS65.020

B04

DB34

安徽省地方标准

DB34/T3293—2018

农田杂草反枝苋对草甘膦抗性检测

技术规程

Codeofpracticefordetectionofglyphosate-resistantredrootpigweed(Amaranthus

retroflexusL.)incropland

文稿版次选择

2018-12-29发布2019-01-29实施

安徽省市场监督管理局发布

DB34/T3293—2018

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由安徽省农业科学院棉花研究所提出。

本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：安徽省农业科学院棉花研究所、中国农业科学院棉花研究所、岳西县农业技术综

合服务中心、六安市植物检疫植物保护站、来安县农业技术推广中心、太湖县种植业管理局、宣城市种

植业管理局、黄山市农业科学研究所、安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所。

本标准主要起草人：李淑英、路献勇、马艳、马小艳、阚画春、程福如、陈敏、刘小玲、郑曙峰、

程森林、王维、徐道青、石扬娟、祁静星、胡俊斌、胡锋、吴明奎、胡本进。

I

DB34/T3293—2018

农田杂草反枝苋对草甘膦抗性检测技术规程

1范围

本标准规定了农田杂草反枝苋（AmaranthusretroflexusL.）对除草剂草甘膦抗性检测试剂与溶

液、仪器和设备、生物试材、试验步骤、数据统计与分析与抗药性水平的评价。

本标准适用于反枝苋对除草剂草甘膦抗性的检测。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

胚根长度Lengthofradicel

从与种子连接处到胚根顶端。

2.2

胚轴长度Lengthofhypocotyl

从与种子连接处到胚轴顶端。

3试剂与溶液

3.1草甘膦原药。

3.2莽草酸（ShikimicAcid；3,4,5-三羟基-1-环己烯-1-羧酸；99％纯度）。

3.310％TritonX-100（聚乙二醇辛基苯基醚）。

3.40.1％TritonX-100。

3.50.3％高锰酸钾（KMnO4）。

3.60.25mol/L盐酸。

3.71mol/L氢氧化钠。

3.80.1mol/L甘氨酸（C2H5NO2）。

3.90.1％高碘酸（HIO4·2H2O）。

4仪器和设备

4.1培养皿（内径9cm）。

4.2盆钵。

4.3移液器（20µL、100µL、200µL、1000µL和5000µL）。

4.4可控定量喷雾设备。

1

DB34/T3293—2018

4.5紫外可见光分光光度计。

4.6离心管（1.5mL，2mL，10mL）。

4.7超高速离心机。

4.8光照培养箱。

4.9人工气候箱：可设定温度为白天30℃黑夜25℃、相对湿度（RH）60±10％、光照周期12h:12

h（L:D）。

5生物试材

5.1试验土壤

采集有机质含量≤3g/kg、pH6.0～6.5或6.5～7.0壤土粉碎风干后备用，试验前在120℃干燥

箱内烘6h（灭活土壤内杂草种子）。

5.2杂草种子

采集各试验样点成熟的反枝苋种子。种子的田间采集区域不小于100m×50m，每隔20km取样1

次，然后将每个地区或县域内所取样本混合。同时在没有施用过草甘膦地区采集反枝苋种子，作为敏感

对照。

杂草种子4℃低温冰箱中保存。

6试验步骤

6.1杂草种子处理

首先将供试反枝苋种子用质量分数为0.3％的高锰酸钾溶液浸泡消毒10min，用无菌水清洗3

次。然后在9cm培养皿内放2层滤纸，每皿放入50粒反枝苋种子，置于光照培养箱内催芽，培养

周期和温度设为白天30℃12h、黑夜25℃12h，当种子露白时待用。

6.2反枝苋幼苗处理

试验土壤定量装至盆钵的4/5处。采用盆钵底部渗灌方式，使土壤完全湿润。将预处理的供试反

枝苋种子均匀撒播于土壤表面，覆土0.5～1.0cm左右，播种后移入人工气候箱常规培养。以盆钵底

部渗灌方式补水。杂草出苗后进行间苗，当反枝苋长至3～4叶期时定苗，每钵保留长势一致的10棵

幼苗。