DB15/T 2728-2022 牛轮状病毒腹泻诊断技术规范

DB15/T 2728-2022 The diagnosis of cow rotavirus diarrhea standard operating procedure

内蒙古自治区地方标准 简体中文 现行 页数:13页 | 格式:PDF

基本信息

标准号
DB15/T 2728-2022
标准类型
内蒙古自治区地方标准
标准状态
现行
中国标准分类号(CCS)
国际标准分类号(ICS)
发布日期
2022-07-29
实施日期
2022-08-29
发布单位/组织
内蒙古自治区市场监督管理局
归口单位
-
适用范围
-

发布历史

研制信息

起草单位:
起草人:
出版信息:
页数:13页 | 字数:- | 开本: -

内容描述

ICS65.020.30

CCSB41

15

内蒙古自治区地方标准

DB15/T2728—2022

牛轮状病毒腹泻诊断技术规范

Technicalspecificationfordiagnosisofbovinerotavirusdiarrhea

2022-07-29发布2022-08-29实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T2728—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会(SAM/TC19)归口。

本文件起草单位:内蒙古农业大学、北京生泰尔科技股份有限公司、内蒙古自治区动物疫病预防控

制中心、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、金宇保灵生物药品有限公司。

本文件主要起草人:徐晓静、王建龙、谢梦圆、马立峰、郭宇、王秀敏、常继涛、陈坚、马培倩、

周伟光、黄海碧。

I

DB15/T2728—2022

牛轮状病毒腹泻诊断技术规范

1范围

本文件规定了牛轮状病毒腹泻的临床诊断和实验室诊断技术方法、操作程序和判定标准。

本文件适用于牛轮状病毒腹泻的诊断、监测和检疫等。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,

仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本

文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

BRV:牛轮状病毒(Bovineratovirus)

CPE:致细胞病变效应(CytopathicEffect)

DMEM:达尔伯克改良依格尔培养基(DuLbecco’sModifiedEagleMedium)

FBS:胎牛血清(FetalBovineSerum)

MA104细胞:恒河猴肾细胞(Rhesuskidneycell)

PBS:磷酸盐缓冲盐水(PhosphateBufferSaline)

PCR:聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)

TCID50:半数组织培养物感染量(MedianTissueCultureInfectiveDose)

5生物安全措施

样品处理的生物安全措施符合GB19489的规定。

样品采集的生物安全措施符合GB/T27401的规定。

6病原

牛轮状病毒属于呼肠孤病毒科,轮状病毒属,病毒颗粒无囊膜,近似球形,直径约70nm~75nm,

具有外、中、内三层衣壳,每层均为20面体对称。基因组为线状双股RNA。

1

DB15/T2728—2022

7临床诊断

流行病学

7.1.1易感动物

不同年龄和品种牛均可感染BRV,3周龄内牛最易感,多发生于1周龄内的犊牛。

7.1.2传染源

病牛和带毒牛是本病自然流行的传染源,隐性感染牛和痊愈牛可持续排毒。

7.1.3传播途径

消化道是主要的传播途径。

7.1.4流行特点

有明显季节性,多发生在晚秋、冬季和早春。

临床症状

犊牛感染后在12h~24h出现严重腹泻,发病突然,病初表现为精神不振、厌食、呕吐和腹泻,体

温正常或略高,排黄白色液状粪便,有时排出带有黏液的稀便。病程长者脱水明显,严重者常有死亡。

成年牛多呈隐性感染,并在一定时间持续向外界排毒。

病理变化

牛轮状病毒感染病理变化主要表现在消化道,肠腔内充满凝乳块和乳汁,小肠肠壁变薄、半透明,

肠内容物呈液状、灰黄或灰黑色。

结果判定

符合6.1、6.2、6.3,可判定为牛轮状病毒腹泻疑似病例。

8实验室诊断

主要仪器设备

电镜、低温高速离心机、倒置显微镜、T25细胞培养瓶、CO2细胞培养箱、96孔细胞培养板、PCR仪、

PCR管、电泳仪、凝胶成像仪、酶标仪。

主要试剂

PBS、2%磷钨酸、DMEM培养基、细胞培养液、细胞维持液、胰酶、MA104细胞、PCRTaq酶、DNAMarker、

TAE电泳缓冲液。主要试剂配制见附录A。

样品采集与处理

8.3.1粪便样品

将棉拭子伸入肛门内刮取新鲜粪便,也可无菌采集地上刚排出的新鲜粪便。分别放入装有3mLPBS

的采样管中,编号并记录相关信息。

2

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