DB15/T 2072-2021 动物垫料中大肠埃希氏菌O157：H7/NM检测

ICS07.100.01

CCSB41

15

内蒙古自治区地方标准

DB15/T2072—2021

动物垫料中大肠埃希氏菌O157：H7/NM检测

DetectionofEscherichiacoliO157:H7/NMinanimalbedding

2021-01-25发布2021-02-25实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T2072—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由中华人民共和国呼和浩特海关提出并归口。

本文件起草单位：中华人民共和国呼和浩特海关、二连浩特市疾病预防控制中心、内蒙古自治区农

牧业科学院。

本文件主要起草人：赵治国、崔强、郭文丽、延涵、王海艳、陈林军、敖威华、韩祎陟、靳木子、

罗晓平、李军燕。

I

DB15/T2072—2021

动物垫料中大肠埃希氏菌O157：H7/NM检测

1范围

本文件规定了动物垫料中大肠埃希氏菌O157：H7/NM的定性检测方法、设备和材料、培养基和试剂。

本文件适用于动物垫料中大肠埃希氏菌O157：H7/NM定性检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T33682基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴别微生物方法通则

SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则

SN/T1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

动物垫料animalbedding

用于吸收动物排泄物，使动物保持舒适生活环境的铺垫物。

注：包括动物笼内非直接与动物机体接触的铺垫物。

4设备和材料

4.1设备和材料

4.2恒温培养箱：36℃±1℃。

4.3均质器。

4.4振荡器。

4.5电子天平：感量0.1g，0.0001g。

4.6全自动微生物生化鉴定系统。

4.7全自动微生物生化鉴定系统。

4.8酶联免疫分析仪。

4.9二级生物安全柜。

4.10pH计。

4.11生物显微镜。

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DB15/T2072—2021

4.12微量移液器。

4.13无菌锥形瓶：容量500mL，250mL。

4.14无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。

4.15无菌培养皿：15mm×90mm。

4.16无菌棉签。

4.17无菌镊子。

4.18无菌剪刀。

4.19无菌勺。

4.20无菌玻片。

4.21无菌接种环。

5培养基和试剂

5.1实验用水符合GB/T6682的要求。

5.2改良EC肉汤（mEC+n）：见附录A中A.2。

5.3改良山梨醇麦康凯琼脂（CT-SMAC）：见附录A中A.3。

5.4三糖铁琼脂（TSI）：见附录A中A.4。

5.5营养琼脂：见附录A中A.5。

5.6半固体琼脂：见附录A中A.6。

5.7月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-MUG（MUG-LST）：见附录A中A.7。

5.8氧化酶：见附录A中A.8。

5.9革兰氏染液：见附录A中A.9。

5.10大肠埃希氏菌O157显色培养基。

5.11大肠埃希氏菌O157和H7诊断血清。

5.12生化鉴定试剂盒。

5.13革兰氏阴性菌生化鉴定卡。

5.14飞行质谱仪靶板。

5.15大肠埃希氏菌O157:H7/NMATCC35150或等效标准菌株。

5.16EHEC肠道出血性大肠埃希氏菌ATCC35130或等效菌株。

5.17大肠埃希氏菌株ATCC25922或等效标准菌株。

6检验程序

大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验流程序见图1。

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DB15/T2072—2021

样品制备

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检样25g或25cm样液+225mLmEC+n肉汤

36℃±1℃，18h～24h

CT-SMAC平板和大肠埃希氏菌O157显色培养基平板

36℃±1℃，18h～24h

挑取可疑菌落5~10个接种TSI，氧化酶阴性，革兰氏阴性杆菌

MUG-LST

阴性阴性

非E.coilO157血清学实验

生化实验或辅助鉴定

结果报告

图1大肠埃希氏菌O157：H7/NM检验流程