T/ZJZYC 003-2021 铁皮石斛种苗生产技术规程

范围:本文件规定了铁皮石斛种苗的术语和定义、种苗生产、质量要求、包装、标志、运输与贮存、田间管理等要求。 本文件适用于铁皮石斛种苗生产; 主要技术内容:4种苗生产留种原植物应符合《中国高等植物图谱》收载的兰科植物铁皮石斛(又名黑节草Dendrobium officinale Kimura et Migo )的植物特征，经过鉴定确认或品种审定。选用适合当地栽培环境的优质、高产、抗病、抗逆性好的种源。留种地应具有良好的物理隔离措施或方圆1000m内无其它种类石斛。留种株应该选择品种特性纯正、生长健壮的植株。4.2 实生苗培育4.2.1 制种盛花期，取同一株系内生活力最强的花药和柱头，进行授粉。母本在授粉后立即摘除唇瓣，及时挂牌标志。授粉后，蒴果开始转黄时，采收饱满、成熟的果实。4.2.2 蒴果播种将采收的蒴果经无菌水清洗后置于超净工作台，75%乙醇浸泡1 min后，无菌水冲洗表面3次～5次。然后用浓度为1.0%～1.5%的NaClO浸泡20 min，并不停摇晃，用无菌水冲洗5次～6次，使无异味，无菌滤纸吸干水后，用无菌剪刀在蒴果顶部剪一缺口，轻轻抖动，将蒴果内的种子均匀撒在种子萌发培养基上MS+椰子汁100 ml/L～200 ml/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L，pH 5.6～5.8。4.2.3 继代培养待幼苗长到1 mm～3 mm时，转接到继代培养基MS+6-BA0.5 mg/L～1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L，pH 5.6～5.8，进行继代培养。4.2.4 生根培养待幼苗长至1.0 cm～1.5 cm高时，转接到生根培养基1/2 MS+香蕉100 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂 8 g/L，pH 5.6～5.8，进行生根培养。4.3 无性系培育4.3.1 外植体消毒切取带芽的长1.0 cm～2.0 cm的茎段，无菌水清洗后置于超净工作台，用75%乙醇浸泡1 min，无菌水冲洗表面3次～5次，然后用浓度为1.0%～1.5%的NaClO浸泡，加1～2滴Tween-20，并不断摇动，8 min～10 min后用无菌水冲洗5次～8次，用无菌滤纸吸干水分。4.3.2 不定芽诱导和增殖切取带芽的长0.5 cm～1.0 cm的茎段，接种到不定芽诱导培养基MS+椰汁150 ml/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L，pH 5.6。待长出不定芽后，接种到