DB37/T 2140-2012 预混合饲料中维生素B1、B2、B6和烟酰胺的同步测定 高效液相色谱法

ICS65.120

B46

DB37

山东省地方标准

DB37/T2140—2012

预混合饲料中维生素B1、B2、B6和烟酰胺

的同步测定高效液相色谱法

DeterminationofvitaminB1、B2、B6andniacinamideinfeed

Highperformanceliquidchromatography

2012-05-14发布2012-07-01实施

山东省质量技术监督局发布

DB37/T2140—2012

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会提出并归口。

本标准起草单位：山东省饲料质量检验所。

本标准主要起草人：强莉、李桂华、刘雪芹、李俊玲、战余铭、张玮、王现杰。

I

DB37/T2140—2012

预混合饲料中维生素B1、B2、B6和烟酰胺的同步测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了用高效液相色谱仪同步测定预混合饲料中维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺的

方法。

本标准适用于维生素预混合饲料和复合预混合饲料中维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺的测

定。

本方法最低定量限维生素B1、维生素B6、烟酰胺为40mg/kg，维生素B2为10mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T20195动物饲料试样的制备

3原理

试料中的维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺用盐酸溶液提取、过膜后，在高效液相色谱反相

柱上分离，紫外检测器280nm处测定，外标法定量。

4试剂

除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂，水符合GB/T6682一级水的规定。试剂包括：

a)乙腈：色谱纯；

b)三氟乙酸：色谱纯；

c)冰乙酸：优级纯；

d)盐酸；

e)氢氧化钠；

f)盐酸溶液：c(HCl)=0.5mol/L。量取45mL的盐酸注入1000mL的水中；

g)盐酸溶液：c(HCl)=0.1mol/L。量取9mL的盐酸注入1000mL的水中；

h)氢氧化钠溶液：c(NaOH)=2mol/L。称取8g氢氧化钠,溶于100mL水中；

i)0.1﹪三氟乙酸溶液：准确吸取三氟乙酸1.00mL于1000mL容量瓶，用水定容，摇匀；

j)流动相：乙腈和0.1﹪三氟乙酸溶液；

k)维生素B1、维生素B2、维生素B6和烟酰胺标准品：纯度大于98﹪；

l)标准贮备溶液，操作步骤如下：

1

DB37/T2140—2012

1)维生素B1标准贮备溶液：准确称取维生素B1标准品0.0200g于100mL棕色容量瓶中，

加0.1mol/L盐酸溶液溶解，超声15min，待全部溶解后，用0.1mol/L盐酸溶液定容

至刻度，此溶液浓度为200µg/mL。避光操作。置2℃～8℃冰箱保存，保质期3个月；

2)维生素B2标准贮备溶液：准确称取维生素B2标准品0.0200g于100mL棕色容量瓶中，

加5mL2mol/L氢氧化钠溶液溶解，超声使其全部溶解后，加约60mL水，再加2.5mL

冰乙酸，用水定容至刻度，此溶液浓度为200µg/mL,置2℃～8℃冰箱保存，保质期3

个月；

3)维生素B6标准贮备溶液：准确称取维生素B6标准品0.0200g于100mL棕色容量瓶中，加

水溶解，超声15min，待全部溶解后，用水定容至刻度，此溶液浓度为