GB/T 15398-1994 饲料有效赖氨酸测定方法

中华人民共和国国家标准

饲料有效赖氨酸测定方法GB/'r15398一94

Determinationofavailablelysineinfeedstuffs

本标准参照采用国际标准ISO5510-1984K饲料有效赖氨酸测定方法》。

1主题内容与适用范围

本标准规定了饲料中有效赖氨酸的测定方法。

本标准适用于含有动物或植物性蛋白质的配合(混合)饲料及单一饲料。

2引用标准

GB6432饲料粗蛋白测定方法

3术语

有效赖氨酸是指在规定的测定条件下测得的总赖氨酸和非有效赖氨酸之差。

4原理

蛋白质中有效赖氨酸的。一氨基可与2.4一二硝基氟苯反应，酸解后生成二硝基苯赖氨酸，而其他非

有效部分则生成赖氨酸因此将不经二硝基氟苯处理的样品和经由二硝基氟苯处理的样品分别水解，用

离子交换色谱法测定各自的赖氨酸含量，即可由其差值得出样品中有效赖氨酸的含量。

5试剂和溶液

本标准所用试剂均为分析纯，水为去离子水。

5.1乙醚(HG3-1002)0

5.2碳酸氢钠(GB640)溶液:80g/L,

5.32.4二硝基氟苯(DNFB)乙醇溶液:

将一定量的DNFB溶于95%乙醇，其体积比为。.15:12，该溶液用前现配

5.4盐酸(GB622)溶液:6.0mol/I。

5.5盐酸(GB622)溶液:6.5mol/Lo

5.6稀释用柠檬酸钠缓冲液:pH约2.2,

将「列试剂依次溶于适量水:

20g水合柠檬酸(HG3-1108)

8g氢氧化钠(GB629)

16ml浓盐酸((;B622)

0.1ml辛酸

20ml，硫二甘醇

加水稀释至1000nli

国家技术监督局1994门2一30批准1995一07一01实施

cs/T15398一94

5.了层析用柠檬酸钠缓冲液:

pH值及配制方法依不同型号的氨基酸测定仪有所区别，请参见仪器说明书配制。

5.8茹二二酮试剂

按仪器说明书配制。

5.9赖氨酸标准液:50nmol/mL或其他浓度。

先配制2.5pmol/ml赖氨酸标准贮备液:称取45.6mg赖氨酸单盐酸盐溶于。.1moll_的盐酸

中，稀释至100ml，混匀。

用该标准贮备液或商品2.5pmol/mL的标准氨基酸混合液，以pH2.2柠檬酸钠缓冲液为溶剂配

制50.()nmol/ml标准液。也可根据仪器说明书配制成其他最佳使用浓度。

6仪器、设备

6门实验室用样品粉碎机:能快速一致地粉碎样品并能避免样品过热和尽可能少与外界接触。

6.2样品筛:孔径0.25mm(60目)。

6.3分析天平:感量0.0001go

6.4油浴:温度可稳定于120^-130℃之间。