GB/T 3543.5-1995 农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定

中华人民共和国国家标准

GB/'r3543.5-1995

农作物种子检验规程

真实性和品种纯度鉴定代替GB3543--83

Rulesforagriculturalseedtesting

-Verificationofgenuinenessandcultivar

1主题内容与适用范围

本标准规定了测定种子真实性和品种纯度的方法。

本标准适用于农作物种子质量的检测。

2引用标准

GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样

GB/T3543.4农作物种子检验规程发芽试验

3术语

3.1种子真实性genuinenessofseed

供检品种与文件记录(如标签等)是否相符。

3.2品种纯度varietalpurity

品种在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数占供检本作物样品种子数的百分率表示。

3-3变异株off-type

一个或多个性状(特征特性)与原品种育成者所描述的性状明显不同的植株。

3-4育种家种子breederseed

育种家育成的遗传性状稳定的品种或亲本种子的最初一批种子，用于进一步繁殖原种种子。

3.5原种basicseed

用育种家种子繁殖的第一代至第三代，或按原种生产技术规程生产的达到原种质量标准的种子，用

于进一步繁殖良种种子。

16良种。ertifiedseed

用常规种原种繁殖的第一代至第三代和杂交种达到良种质量标准的种子，用于大田生产。

4试剂

苯酚、愈创木酚、过氧化氢、氢氧化钾、氢氧化钠、氯化氢。

5仪器和设备

其仪器设备也随方法的差异而不同。

a.在实验室中测定

国家技术监督局1995一08一18批准1996一06一01实施

GB/T3543.5一1995

配备适宜的仪器(如体视显微镜、扩大镜、解剖镜)与试剂，以供种子形态、生理及细胞学的检查、化

.1测定及种子发芽之用。

b.在温室和培养室中测定

配备能调节环境条件的设备(如生长箱)，以利诱导鉴别性状的发育

。.在田间小区里鉴定

需具有能使鉴定性状正常发育的气候、土壤及栽培条件，并对防治病虫害有相对的保护措施。

6测定程序

6.1送验样品的重量

品种纯度测定的送验样品的最小重量应符合表1的规定。

表1品种纯度测定的送验样品重量

种类限于实验室测定田间小区及实验室测定

婉豆属、菜豆属、蚕豆属、玉米属、大豆属及种

10002000

子大小类似的其他属

水稻属、大麦属、燕麦属、小麦属、黑麦属及种

5001000

子大小类似的其他属

甜菜属及种子大小类似的其他属250500

所有其他属100250

6.2种子鉴定

6.2.1形态鉴定法

随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，每个重复不超过100粒种子。

根据种子的形态特征，必要时可借助扩大镜等进行逐粒观察，必须备有标准样品或鉴定图片和有关

资料.

水稻种子根据谷粒形状、长宽比、大小、秤壳和释尖色、秤毛长短、稀密、柱头夹持率等;大麦种子根

据籽粒形状、外俘基部皱褶、籽粒颜色、腹沟基刺、腹沟展开程度、外俘侧背脉纹齿状物及脉色、外俘基部

俘壳皱褶凹陷、小穗轴茸毛多少、鳞被(浆片)形状及茸毛稀密等;大豆种子可根据种子大小、形状、颜色、

光泽、光滑度、蜡粉多少及种脐形状颜色等;葱类可根据种子大小、形状、颜色、表面构造及脐部特征等。

6.2.2快速测定法

随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，每个重复不超过100粒种子。

a.苯酚染色法

小麦、大麦、燕麦:将种子浸入清水中经18.24h，用滤纸吸干表面水分，放入垫有已经1%苯酚溶

液湿润滤纸的培养皿内(腹沟朝下)。在室温下，小麦保持4h,燕麦2h，大麦24h后即可鉴定染色深浅

小麦观察颖果染色情况，大麦、燕麦评价种子内外释染色情况。通常颜色分为五级即浅色、淡褐色、褐色、

深褐色和黑色。将与基本颜色不同的种子取出作为异品种。

水稻:将种子浸入清水中经6h，倒去清水，注入1%(m/V)苯酚溶液，室温下浸12h取出用清水洗

涤，放在滤纸上经24h,观察谷粒或米粒染色程度。谷粒染色分为不染色、淡茶褐色、茶褐色、黑褐色和

黑色五级;米粒染色分不染色、淡茶褐色、褐色或紫色三级。

b.大豆种皮愈创木酚染色法

将每粒大豆种子的种皮剥下，分别放入小试管内，然后注人1mL蒸馏水，在30C下浸提1h，再在

每支试管中加入10滴0.5%愈创木酚溶液,10min后，每支试管加入1滴0.1%过氧化氢溶液。1min

后，计数试管内种皮浸出液呈现红棕色的种子数与浸出液呈无色的种子数。

c.高粱种子氢氧化钾一漂白粉测定法

BGr/'35435一1995

配制I:5(m/V)氢氧化钾和新鲜普通漂白粉(5.2500漂白粉)的混合液即〔1g氢氧化钾(KOH)加

入5.0mI漂自液〕.通常准备100ml溶液，贮于冰箱中备用。将种子放入培养皿内，加入氢氧化钾一漂

自液(测定前应片卜室温段!I寸间)以淹没种子为度。棕色种皮浸泡10min,浸泡中定时轻轻摇晃使溶

液与种子良好接触，然后把种子倒在纱网上，用自来水慢慢冲洗，冲洗后把种子放在纸上让其气干，待种

f-卜燥后，记录黑色种子数与浅色种子数。

d.燕麦种护荧光测定法

应用波长360入紫外光照射，在暗室内鉴定。将种子排列在黑纸上，置于距紫外光下10^15cm处，

照射数秒至数分钟后即可根据内外俘有无荧光发出进行鉴定

e.燕麦种f}A化氢测定法

将燕麦种子放入旱已配好的氛化氢溶液1〔份38%(V/V)盐酸(HCI)和4份水〕的玻璃器皿中浸泡

611,然后取出放在滤纸上让其气干1卜。根据棕褐色(荧光种子)或黄色(非荧光种子)来鉴别种子。

f.小麦种f的氢氧化钠测定法

当小麦种子红白皮不易区分(尤其是经杀菌剂处理的种子)时，可用氢氧化钠测定法加以区别。数取

400粒或更多的种r，先用95%(V/V)甲醇浸泡15min，然后让种子干燥30min，在室温下将种子浸泡

在5M/LNaOH溶液中5min,然后将种子移至培养皿内，不可加盖，让其在室温下干燥，根据种子浅色

和深色加以计数。

6.2-3小麦、大麦醇溶蛋白的酸性聚丙烯酞胺电泳法见附录A(参考件)。

6.3幼苗鉴别

随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，每重复为100粒种子。在培养室或温室中，可

以用100粒，几次重复。

幼苗鉴定可以通过两个主要途径一种途径是提供给植株以加速发育的条件(类似于田间小区鉴

定，只是所需时间较短)，当幼苗达到适宜评价的发育阶段时，对全部或部分幼苗进行鉴定;另一种途径

是让植株生长在特殊的逆境条件下，测定不同品种对逆境的不同反应来鉴别不同品种。

禾谷类:禾谷类作物的芽鞘、中胚轴有紫色与绿色两大类，它们是受遗传基因控制的。将种子播在砂

中(玉米、高粱种子间隔1.0cmX4.5cm,燕麦、小麦种子间隔2.0cmX4.0cm，播种深度1.0cm)，在

25C恒温I-培养,24h光照。玉米、高粱每天加水，小麦、燕麦每隔4d施加缺磷的Hoagland1号培养

液，在幼苗发育到适宜阶段时，高粱、玉米14d，小麦7d,燕麦10^-14d，鉴定芽鞘的颜色。

注:缺磷的Hoagland]号培养液配方在1I蒸馏水中加入4mLIM/L硝酸钙溶液CCa(NO,),),2mLlMIL硫酸

镁溶液(MgSO)和6mL1M/L硝酸钾溶液(KNO,).

大豆:把种子播于砂中(种子间隔2.5cmX2.5cm，播种深度2.5cm)，在25℃下培养，24h光照，

每隔4d施加Hoaglandl号培养液，至幼苗各种特征表现明显时，根据幼苗下胚轴颜色(生长

10^14d),茸毛颜色((21d)、茸毛在胚轴上着生的角度((21d)、小叶形状(21d)等进行鉴定。

注:Hongland1号培养液配方:在1L蒸馏水中加入1mL1M/L礴酸二氢钾溶液(KH2PO,),5mLlM/L硝酸钾溶

液(KNO,),5mLlMIL硝酸钙溶液(Ca(NO,))和2mL