GB/T 14700-2002 饲料中维生素B1的测定

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B46石黔

中华人民共和国国家标准

GB/T14700一2002

代替GB/T14700-1993

饲料中维生素B:的测定

DeterminationofvitaminB1infeeds

2002一10一31发布2003一04一01实施

中华人民共和国发布

国家质量监督检验检疫总局

GB/T14700--2002

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本标准修订了GB/T14700-1993《饲料中维生素B的测定》，修订后的方法具有适用范围广、检测

限低、高效、快捷、准确的特点。本标准参考了美国“化学分析协会”第六十七期发表的复《合预混合饲料

中抗坏血酸、烟酞胺、毗哆醇、硫胺素及核黄素的液相色谱分析方法》和美国公职分析化学家协会(1990

版)((食物和维生素制品中的硫胺素荧光测定法》而制定。

本标准与GB/T14700-1993的主要技术差异:本标准规定了两种方法，方法I为荧光分光光度

法，保留GB/T14700-1993的全部内容;在范围中补充了复合预混合饲料;将重复性允许差“相对相

差”改为“相对偏差”;方法2为高效液相色谱法.确定了试样的提取条件、色谱条件及重复性要求，并确

定了该法适用于维生素B,含量大于20mg瓜g的复合预混合饲料及维生素预混合饲料。

本标准规定了荧光分光光度法为仲裁法。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。

本标准起草单位国家饲料质量监督检验中心(北京)

本标准主要起草人:李兰、陈必芳、索德成。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T14700-1993

GB/T14700-2002

饲料中维生素B1的测定

范围

本标准规定了用荧光分光光度仪和高效液相色谱仪测定饲料中维生素B,(硫胺素)含量的两种

方法。

本标准规定的方法1适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、复合预混合饲料、维生素预混合饲料中

的维生素B，的测定。萃取液的溶液范围为。02pg/mL-0.2pg/mL(在有吸附硫胺素或影响硫色素荧

光干扰物质存在的情况，本方法不适用)

本标准规定的方法2适用于维生素B,含量大于20mg/kg的复合预混合饲料、维生素预混合饲料

的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的

修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是

否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样方法

3方法1荧光分光光度法(仲裁法)

3.1原理

试样中的维生素B,(即硫胺素C,3HON,SCL)经稀酸消化、酶分解、吸附剂的吸附分离提纯后，在

碱性条件下被铁氰化钾氧化生成荧光色素—硫色素，用正丁醇萃取。硫色素在正丁醇中的荧光强度与

试样中维生素B的含量成正比，依此进行定量测定。

3.2试剂和溶液

除非另有说明，所用试剂均为分析纯的试剂，水为蒸馏水，符合GB/T6682中3级用水或相当纯度

的水。

3.2.1盐酸溶液

c(HCI)=0.1mot/L.

3.2.2硫酸溶液

c(1/2H2S0,)=0.05mol/I。

3.2.3乙酸钠溶液

c(CH3000Na)=2.0mol/L:取164g无水乙酸钠或272g结晶乙酸钠(CH3000Na·3H,O)溶于

水，稀释至1000mL,

3.2.4淀粉酶悬浮液

100g/L:用乙酸钠溶液((3-2-3)悬浮10g淀粉酶制剂(活性1:250,Takadiastase，或相当活性的其

他磷酸醋酶)，稀释至100mL，使用当日制备。

3.2.5氮化钾溶液

GB/T14700-2002

250g/I。

3.2.6酸性点化钾溶液

将8.5ml,浓盐酸加人至氯化钾溶液((3-2-5)中，并稀释至1000ml

3-2.7氢氧化钠溶液

150g/Lo

3.2.8铁抓化钾溶液

10g/L,

3.2.9碱性铁橄化钾溶液

4.00mL的铁氰化钾溶液((3.2.8)与氢氧化钠溶液(3.2.7)混合使之成100MI，此液4h内使用。

3.2.10冰乙酸溶液

30mL/L(V,-V2)

3.2.11人造沸石

60目~8。目，使用前应活化，方法如下:将适量人造石置于大烧杯中，加人10倍容积的热乙酸溶液

(3.2.10)，用玻璃棒均匀搅动10min，使沸石在乙酸溶液中悬浮，待沸石沉降后，弃去上层乙酸液，重复

上述操作两次。换用5倍其容积的热氯化钾溶液(3.2.5)搅动清洗两次，每