GB/T 36852-2018 亚洲梨火疫病菌检疫鉴定方法

ICS65.020.01

B16

国

中华人民共和国国家标准

GB/T36852-2018

亚洲梨火疫病菌检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofErli切iapyrifoliae

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局峪非

中国国家标准化管理委员会0(..'I(J

GB/T36852-2018

目u昌

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布结构不承担识别这些专利的责任。

本标准向全同植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC271）提归井归IIo

本标准起草单位：中同检验检疫科学研究院、南京农业大学、中华人民共和同上海出入境检验检疫

局、湖江大学、中华人民共和同烟台出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：赵文军、回茜、胡白石、田地丽、易建平、楼兵干、李红叶、葛泉卿。

I

GB/T36852-2018

附录C

（规范性附录）

实时荧光PCR检测

C.1引物及探针序列

Ep-hrpwF,5'-CGCTAACCCGACTGTGCT斗’

Ep-hrpwR:5’-TGAAGGTTTGCCCTTTGC-3'

Ep-hrpwP:5'CFAM)-ATGACACCATCATCGTAAAGGCGG-CTAMRA)3’

C.2实时荧光PCR反应体系及程序

20/tL反应体系：2×PremixExTaq10µL，引物(10µmol/L）各1µL，探告l·OOµmol/L)0.5µL，模

板1µL，补充超纯水至20µLo

实时荧光PCR反应程序：第一个循环为95°C5min；随后40个循环，95℃10日，60℃30S0

注：不同仪锵可根据仪器要求将反应参数作适当调整。

C.3结果判定

在阳性对照Ct值ζ34，阴性对照和空向对照的Ct值二三40前提下：

一一如果检测样品的Ct值《35时，则判定为阳性；

一一如果检测样品的Ct值注40时，则判定为阴性；

如果35<Ct值＜40时，则应重新测试，如果重新测试的Ct值注40时，则判定为阴性，如果重

新测试的Ct值＜40时，则判定为阳性。

9

GB/T36852-2018

参考文献

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