DB37/T 4052-2020 小反刍兽疫恒温扩增检测技术规范

ICS11.220

B41

DB37

山东省地方标准

DB37/T4052—2020

小反刍兽疫恒温扩增检测技术规范

TechnicalspecificationforisothermalamplificationofPestedespetitsruminants

2020-07-09发布2020-08-09实施

山东省市场监督管理局发布

DB37/T4052—2020

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。

本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：山东师范大学、山东省农业科学院、中国动物卫生与流行病学中心、杭州众测生

物科技有限公司、桂林市临桂区动物疫病预防控制中心。

本标准主要起草人：陈蕾、孙文博、吴晓东、陈艳如、廖炳次、蒋文明、李华、刘腾腾、杨慧婷、

单世娟、陈秋红、孙晓洁、杨桂文。

I

DB37/T4052—2020

小反刍兽疫恒温扩增检测技术规范

1范围

本标准规定了小反刍兽疫（PPR）的恒温核酸扩增检测技术的要求。

本标准适用于小反刍兽疫的快速检测、诊断、检疫、监测和流行病学调查。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489—2008实验室生物安全通用要求

NY/T541—2016兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

3原理

核酸恒温扩增技术是依赖解旋酶解开双链DNA，再依赖单链DNA结合蛋白与模板单链结合，使模板单

链处于单链状态并保护它的完整性。引物与模板杂交，然后在DNA聚合酶的催化下扩增。

4试剂或材料

除非另有规定，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。

4.1水：符合GB/T6682中规定的一级水。

4.21×PBS溶液（pH值7.4）配制见附录A.1。

4.3核酸提取试剂：

a)Trizol；

b)氯仿；

c)75%乙醇；

d)异丙醇。

4.4恒温扩增试剂盒。

4.5不含RNA酶的水：DEPC处理过的不含RNA酶的水。

4.6恒温扩增检测引物：恒温扩增检测引物表B.1。

4.7无水乙醇。

4.8微量移液器配套的带滤芯吸头。

4.9离心管：1.5mL。

5材料及设备

1

DB37/T4052—2020

主要仪器设备：

a)微量移液器：10μL、20μL、100μL、1000μL；

b)高速台式离心机：离心力≥8000g；

c)生物安全柜；

d)冰箱；

e)涡旋振荡器；

f)研磨管；

g)荧光定量PCR仪；

h)天平：感量为0.001g。

6样品

6.1基本要求

应符合GB19489—2008和NY/T541—2016中关于实验室生物安全和兽医诊断样品采集、保存与运输

的要求。