T/CQAAS 007-2023 花椒麻味物质含量的测定-液相色谱质谱法

主要技术内容:3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1花椒制品花椒经粉碎、萃取、冷冻等工艺生产的产品。主要包括花椒粉、花椒油、保鲜花椒、花椒油树脂等以花椒为原料加工的产品。3.2花椒酰胺花椒呈麻味的主要成分，含有羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素和羟基-ε-山椒素等多种酰胺类成分。4原理花椒麻味物质主要包括羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素和羟基-ε-山椒素等多种酰胺类组分，试样中的花椒酰胺类组分经甲醇提取后，通过C18液相色谱柱的分离，采用 SHIMADZU LC-MS8050 系统对色谱分离得到的物质进行识别和确认，利用270nm处紫外检测峰面积外标法对花椒麻味物质进行测定。色选机基本要求5试剂材料与仪器设备5.1试剂材料5.1.1甲醇：色谱纯。5.1.2乙腈：色谱纯。5.1.3冰醋酸：分析纯。5.1.4水：纯净水。5.1.5羟基--α-山椒素标准品：纯度大于95%。5.1.6微孔滤膜：孔径0.2um有机相滤膜。5.2仪器设备5.2.1液相色谱-三重四级杆质谱联用仪：LCMS8050日本SHIMADZU公司。5.2.2色谱柱：Shim-pack GISTC18 柱（2.1×50mm,2μm）5.2.3超声波清洗机：SB-4200 DTD 型宁波新芝生物科技有限公司。5.2.4分析天平：感量0.0001g。5.2.5高速粉碎机：转速≥10000rpm。5.2.6高速离心机：≥4500rpm。6仪器参考条件6.1色谱条件采用 SHIMADZU Shim-pack GIST C18（2.1 ×50mm, 2μm）色谱柱，流动相甲醇（A）-0.2%醋酸（B）二元高压梯度洗脱，SPD-M20A 检测器，检测波长为 254nm，流速为0.4mL/min，柱温为 40℃。6.2质谱条件采用 SHIMADZU LC-MS8050 系统对色谱分离得到的物质进行识别和确认。所有数据采集和处理步骤均采用 Labsolution 工作站进行。7实验步骤7.1标准溶液的配制准确称取羟基-α-山椒素10mg（精确至0.01mg），用甲醇溶解并转移至10mL棕色容量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得每1mL 含1mg 羟基-α-山椒素的对照品储备溶液；准确吸取上述储备溶液1mL置10mL容量瓶中，用甲醇定容至