GB 16884-1997 流行性脑脊髓膜炎诊断标准和处理原则

【GB16884—1997】

流行性脑脊髓膜炎诊断标准及处理原则

前言

流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)是由脑膜炎奈瑟氏菌(Neisseria

meningitidis，Nm)通过呼吸道传播所引起的化脓性脑膜炎，常在冬春

季节引起发病与流行，患者以儿童为多见，流行时成年人发病亦增多。

人受Nm感染后大多数表现为鼻咽部带菌状态，只有少数成为流脑患

者，其主要临床表现为突发性高热、头痛、呕吐、皮肤和粘膜出血点

或瘀斑及颈项强直等脑膜刺激征，脑脊液呈化脓性改变。此外，Nm

也可不侵犯脑脊髓膜，仅表现为败血症，病重者可呈暴发型发作。

为了贯彻执行《中华人民共和国传染病防治法》，认真做好流脑

流行病学监测与控制的工作，预防此病发病大幅度回升，控制其流行，

特制定本标准。

本标准的附录A和B为标准的附录；附录C、D、E和F皆为提示的

附录。

本标准由中华人民共和国卫生部提出。

本标准负责起草单位：中国预防医学科学院流行病学微生物学研

究所；参加起草单位：北京佑安医院和北京市卫生防疫站。

本标准主要起草人：胡绪敬、徐莲芝、吴贵坤。

本标准委托技术归口单位卫生部传染病防治监督管理办公室负

责解释。

1范围

本标准规定了流脑的诊断标准和处理原则。

本标准适用于各级、各类医疗保健、卫生防疫机构和人员对流脑

病例诊断、报告与处理。

2诊断原则

2.1应根据流行病学资料和临床表现及实验室检验结果做出临

床诊断。

2.2确诊需要培养Nm或检测Nm群特异多糖抗原或Nm的DNA

特异片段或检测病人急性期和恢复期血清中抗Nm特异抗体。

3诊断标准

3.1流行病学史

在冬春季节和流行地区内，儿童患病者最为多见。有些患者在发

病前7天有明显密切接触史。

3.2临床表现

3.2.1突然寒战、高热、恶心、呕吐、流涕、鼻塞、咽痛、全身

疼痛、头痛加重。

3.2.2面色苍白、四肢发凉、皮肤发花并有散在的小出血点、唇

周及指端青紫、唇周单纯疱疹。

3.2.3烦躁不安、谵妄、昏迷或惊厥。

3.2.4皮肤、粘膜瘀点典型或融合成瘀斑，血压明显下降、脉搏

细速、脉压差缩小。

3.2.5颈项强直、角弓反张、克氏征和布氏征阳性。

3.2.6瞳孔大小不等、边缘不整、对光反应迟钝、眼球常凝视。

3.2.7呼吸快慢及深浅不均或呼吸暂停。

3.2.8幼儿发病多不典型，常见高热、呕吐、嗜睡外，还多见极

度不安与惊厥、拒乳、尖叫、腹泻、咳嗽、双目凝视、颈项强直和布

氏征阳性，其他脑膜刺激征可能缺项。前囟未闭者多见隆起，呕吐频

繁而失水者也可出现囟门下陷。

3.3实验室诊断

3.3.1血象：白细胞数显著增高，最高可达40×109/L，中性粒细

胞在80％～90％以上。

3.3.2疑为流脑者应做腰椎穿刺检查，脑脊液(CSF)压力常增高

达1.96kPa以上；典型病例CSF的外观混浊如米汤样甚或脓样；白细

胞数增多，可达每升数亿，以多形核细胞为主；蛋白质显著增高，可

达1～5g/L；糖量常低于2.22mmol/L，氯化物也稍降低。CSF涂片可

在中性粒细胞内找到革兰氏阴性双球菌。

3.3.3从病人CSF或急性期血液分离到Nm，见附录A(标准的附

录)。

3.3.4从病人急性期血清或尿或CSF中检测到Nm群特异性多糖

抗原，见附录C(标准的附录)。

3.3.5检测病人恢复期血清抗体效价较急性期呈4倍或4倍以上

升高，见附录B(标准的附录)。

3.3.6以PCR检测到病人急性期血清或CSF中Nm的DNA特异片

段，见附录D(提示的附录)。

3.4病例分类

3.4.1疑似病例：3.1加3.2.1或3.2.2或3.2.3之一项。

3.4.2临床确诊病例：疑似病例加3.2.4或3.2.5或3.2.6或3.2.7

之一项。

3.4.3确诊病例：疑似病例或临床确诊病例加3.3.3或3.3.4或3.3.5

或3.3.6之一项。

4处理原则

4.1对病人早期处理，见附录E(提示的附录)。

4.1.1发现疫情及时向卫生防疫部门报告。

4.1.2就地隔离，抢救治疗，降低病死率。

4.1.3给予抗菌药物，及时控制感染。

4.1.4早期发现并及时纠正休克与弥漫性血管内凝血(DIC)。

4.1.5若早期发现颅内压增高症状，及时应用脱水疗法防治脑疝

和呼吸衰竭。

4.2对易感人群的处理，见附录F(提示的附录)。

4.2.1与患者密切接触的人群出现上呼吸道感染样病人，应按轻

症流脑患者处理。

4.2.2根据流行病学监测结果，制定A群脑膜炎双球菌多糖菌苗

预防注射的计划，在流行前期完成接种任务，免疫对象接种率应达到

90％以上。

4.2.3除了完成上述菌苗常规免疫任务以外，还应备有应急接种

用的A群脑膜炎双球菌多糖菌苗，用于控制流脑暴发流行。

4.2.4在未免疫地区出现A群Nm引起流脑暴发流行时，除了对

15岁以下儿童，还应酌情对与病人密切接触的成人应急接种上述菌

苗。

4.2.5目前在我国，若出现非A群Nm引起流脑局部暴发，应及时

对病人全家以及与其毗连的邻居实施抗菌药物预防。

附录A

(标准的附录)

流脑病原学诊断方法

A1病原体(脑膜炎奈瑟氏菌Neissriameningitidis)分离

从疑似流脑患者采集CSF或急性期血液分离Nm。

A1.1标本的采集

A1.1.1CSF：无菌操作，吸出CSF2mL，立即放到无菌试管内

离心(2000～3000r/min，30min)，用灭菌过的毛细管吸取沉淀物直接

接种到10％羊血巧克力色琼脂上(CSF上清液部分供检测Nm特异抗

原，亦可将其置于－20℃待测)，5％二氧化碳环境37℃培养24～72h，

每日检查细菌生长的情况，及时分离纯培养物供鉴定。

A1.1.2血液：采取病人急性期静脉血液6mL，无菌操作往盛有

30mL增菌用的葡萄糖肉汤三角瓶内注入4mL血液(余下的2mL血液

同上离心后吸出血清，供检测Nm特异抗原和抗体，亦可将其置于一

20℃待测)，同上述条件培养24～72h，每日进行分离培养。

A1.2接种和菌种鉴定

A1.2.1细菌形态：Nm应为革兰氏阴性，呈卵圆形或肾形，

0.8μm×0.6μm大小。常成对排列，临近两边扁平凹陷。

A1.2.2菌落：Nm接种于巧克力色琼脂平皿上，5％二氧化碳，

37℃培养24h后，其菌落直径约1mm，表面突起、光滑、湿润、圆整、

略带灰白色、半透明、不溶血、无色素。培养时间延长，菌落增大、

变成黄色、不透明，并可出现颗粒状中心和放射性周边。

A1.2.3生长及抗原特性：绝大多数Nm菌株分解葡萄糖和麦芽

糖，产酸不产气。不分解蔗糖、果糖和乳糖。过氧化酶和氧化酶阳性。

Nm新分离菌株具有下列主要抗原：血清群特异性荚膜多糖，主

要外膜蛋白－OMP(包括血清型特异的2/3类OMP，亚型特异的1类

OMP以及4与5类OMP)，铁调节蛋白，脂寡糖(LOS)，H.8脂蛋白，

还有菌毛抗原等，根据群特异性荚膜多糖的结构与组成成分，Nm可

分为13个血清群(A、B、C、D、29E、H、I、K、L、W135、X、Y、

Z)，其中90％以上的病例是由A、B和C群Nm引起的。根据2/3类OMP

可将B群与C群Nm分成20个血清型，但差不多半数菌株目前尚不能

分型。在可分型菌株中，以15、2和4型，P1.2、P1.1、P1.12、P1.15

及P1.16亚型多见；对于A群Nm现有4与21两个血清型，以P1.7与

P1.9亚型多见。Nm还可以分成13个LOS免疫型，其中A群以L10和

L11型多见，B群中以L3，7，9复合型多见。Nm群特异性荚膜多糖、

型和亚型的OMP及LOS等抗原成分对流脑发病与流行及其菌苗的研

究均具有重要价值。

附录B

(标准的附录)

流脑血清学诊断方法

B1玻片凝集试验

B1.1目的

应用玻片凝集试验对Nm病原菌株或带菌者菌株进行血清学分

群。

B1.2材料

B1.2.1待检的Nm菌株纯培养物。

B1.2.2Nm诊断血清：多价I(包含A、B、C、D群)，多价Ⅱ〔包

含1889(Y)、1890(H)、1892(29E)］，多价Ⅲ［包含319(W135)、1916(X)、

1486(I)、1811(K)群］及各群单价血清，共计14种。

B1.2.3洁净载玻片。

B1.2.4生理盐水。

B1.3试验方法

B1.3.1先将诊断血清按说明书稀释成所需的浓度，滴一滴在洁

净的玻片上。

B1.3.2用白金耳刮取菌苔少许，在玻片上沾取少量血清，在一

旁研磨均匀，再与血清混匀。

B1.3.3轻轻摇动玻片数次，在1～2min内出现明显凝集者，即

为阳性。

B1.3.4检查从病人分离的疑似Nm时，先试A群血清，若不与其

发生凝集，则试用B或C群血清，仍不凝集时，则试用多价Ⅱ或多价

Ⅲ血清。若发生凝集，再用单价血清定群。从病人分离的疑似Nm对

现有诊断血清皆不凝集者则送研究单位进一步鉴定。

B1.3.5在玻片上与各群诊断血清、盐水或正常兔血清皆发生凝

集者，即定为自凝菌。

B2酶联免疫吸附试验(ELISA)

B2.1目的应用ELISA间接法测病人急性期和恢复期血清中的

抗体水平。此方法也可以应用于健康者血清抗体的测定。

B2.2材料

B2.2.1酶联免疫吸附试验检测仪。

B2.2.2聚苯乙烯板(40孔或96孔)。

B2.2.3加样器(单头或4头或8头，定量为0～200μL)。

B2.2.4羊抗人IgG辣根过氧化酶结合物。

B2.2.5试验质控血清(抗体阳性和阴性的人血清)。

B2.2.6菌体抗原(A、B和C群Nm标准菌株)或A群Nm多糖菌苗。

B2.2.7包被液(0.05mol/L碳酸盐缓冲液)：

碳酸氢钠(NaHCO3)2.9g

碳酸钠(NaCO)1.6g

23

叠氮钠(NaN3)0.2g

加蒸馏水至1000mL，pH9.6，置4℃可备用两周。

B2.2.8洗涤液(0.5mol/L氯化钠)：

氯化钠(NaCl)29.3g

吐温－20(Tween－20)0.5mL

加蒸馏水至1000mL，临用前配制。

B2.2.9稀释液：

氯化钠(NaCl)8.0g

磷酸二氢钾(KHPO)0.2g

24

磷酸氢二钠(NaHPO·12HO)2.9g

242

氯化钾(KCl)0.2g

吐温－20(Tween－20)0.5mL

加蒸馏水至1000mL，pH7.4，置4℃备用。

B2.2.10底物缓冲液：

(1)0.2mo1/L磷酸氢二钠

磷酸氢二钠(NaHPO·12HO)35.8g

242

蒸馏水500mL

(2)0.1mol/L柠檬酸

柠檬酸〔CH(OH)(COOH)·HO］10.5g

3432

蒸馏水500mL

(1)液和(2)液分别置4℃备用。

临用前按下述配方配制底物溶液，pH为5.0：

(1)液2.57mL

(2)液2.43mL

邻苯二胺