GB/T 33309-2016 化妆品中维生素B6(吡哆素、盐酸吡哆素、吡哆素脂肪酸酯及吡哆醛5-磷酸酯)的测定 高效液相色谱法

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中华人民共和国国彖标准

GB/T33309—2016

化妆品中维生素B6(毗哆素、盐酸毗哆素、

毗哆素脂肪酸酯及毗哆醛5■磷酸酯

的测定高效液相色谱法

DeterminationofvitaminB6(pyridoxine,pyridoxinehydrochloride,

pyridoxinefattyacidestersandpyridoxal5-phosphateincosmetics—

Highperformanceliquidchromatography

2016-12-13发布2017-07-01实施

GB/T33309—2016

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刖吕

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由中国轻工业联合会提出。

本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。

本标准起草单位：山东省产品质量监督检验研究院、聊城大学、山东省食品药品检验研究院、上海市

日用化学T业研究所。

本标准主要起草人：霍艳敏、王骏、张娟、张卉、周莉莉、段文增、邹惠玲、王艳丽、薛霞、宿书芳、

刘艳明、崔玉花、刘桂亮、张艳侠、沈敏’

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GB/T33309—2016

化妆品中维生素B6（毗哆素、盐酸毗哆素、

毗哆素脂肪酸酯及毗哆醛5■磷酸酯）

的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了化妆品中维生素氏（毗哆素、盐酸毗哆素、毗哆素脂肪酸酯及II比哆醛5-磷酸酯）的高

效液相色谱测定方法’

本标准适用于膏霜、乳液、液体类等化妆品中毗哆素、盐酸毗哆素、毗哆素脂肪酸酯及毗哆醛5-磷

酸酯的测定。

本标准方法检出限为：毗哆醛1.0mg/kg、卩比哆素0.3mg/kg,定量限为：毗哆醛2.5mg/kg、毗哆素

1.2mg/kgo

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

本标准通过酶解、皂化反应将样品中的维生素B（S均转化为毗哆素或毗哆醛的形式，利用高效液相

色谱配荧光检测器进行分离及分析，保留时间定性，外标法定量测定维生素B（S的含量。

4试剂和材料

除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1甲醇：色谱纯。

4.2七氟丁酸：色谱纯。

4.3碱性磷酸酶：酶活力不小于10U/mgo

4.4磷酸:优级纯。

4.5氨水：优级纯，含量为25%〜28%。

4.6磷酸二氢鞍：优级纯。

4.7磷酸氢二钠（Na2H（）4-2H2O）o

4.8乙醇。

4.9盐酸。

4.10氢氧化钾水溶液:称取固体氢氧化钾250g,加入200mL水溶解。

4.1130%磷酸水溶液（体积分数）：准确量取30mL磷酸（4.4）和70mL水，混匀后备用。

4.1230%氨水溶液（体积分数）：准确量取30mL氨水（4.5）和70mL水，混匀后备用。

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GB/T33309—2016

4.13盐酸溶液(5.0mol/L,0.1mol/L):量取40mL.0.8mL盐酸(4.9)分别放入两个100mL容量瓶

中，用水定容,分别得5.0mol/L.0.1mol/L盐酸溶液。

4.14氢氧化钠溶液(5.0mol/L,0.1mol/L)：称取20g、0.4g氢氧化钠用水溶解,分別放入两个100mL容

量瓶中，用水定容,分别得5.0mol/L.0.1mol/L氢氧化钠溶液。

4.15离子对试剂缓冲溶液[0.02mol/L磷酸二氢钱缓冲溶液(含0.001mol/L七氟丁酸)]:称取2.30g磷

酸二氢镀，加入约980mL水溶解，用30%磷酸(4.11)或30%氨水(4.12)调节pH值至4.5,加入170卩L

七氟丁酸(4.2),用水定容至1L备用。

4.16磷酸氢二钠溶液(0.1mol/L):称取17.8g磷酸氢二钠(4.7),用水溶解,定容至1000mL,用氢氧

化钠溶液(4.14)调节pH值至9.8,备用。

4.17碱性磷酸酶溶液(1.0g/L)：称取50mg碱性磷酸酶，用水定容至50mL。临用前配制。

4.18标准样品：毗哆素和毗哆醛，纯度不小于99.0%。维生素B(j(Plt哆素、盐酸毗哆素、毗哆素脂肪酸

酯和毗哆醛5-磷酸酯)的CAS号、分子式、相对分子质量、化学结构式参见附录Ao

4.19维生素BN毗哆素、毗哆醛)标准贮备液(1mg/mL