DB22/T 3087-2019 猪流行性腹泻病毒经典与变异毒株鉴别qPCR法

ICS11.220

B41

DB22

吉林省地方标准

DB22/T3087—2019

猪流行性腹泻病毒经典与变异毒株鉴别

qPCR法

Identificationofclassicalandvariantstrainsofporcineepidemicdiarrheavirus

Real-timePCRmethod

2019-12-25发布2020-02-01实施

吉林省市场监督管理厅发布

DB22/T3087—2019

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。

本标准起草单位：吉林农业大学。

本标准主要起草人：张双、王开、郭衍冰、裴志花、黄海龙、朱俊辉、李响、胡桂学。

I

DB22/T3087—2019

猪流行性腹泻病毒经典与变异毒株鉴别qPCR方法

1范围

本标准规定了猪流行性腹泻病毒经典与变异毒株qPCR法技术的要求。

本标准适用于猪流行性腹泻病毒经典毒株与变异毒株的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T27401实验室质量控制规范动物检疫

GB/T36871猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒多重RT-PCR检测方法

3缩略语

下列缩略语适用于本文件。

qPCR:实时荧光定量PCR(Real-timepolymerasechainreaction)

RNA：核糖核酸(ribonucleicacid)

cDNA:互补脱氧核糖核酸(complementarydeoxyribonucleicacid)

Rnase：核糖核酸酶(ribonuclease)

Ct值：每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。

4原理

在普通聚合酶链反应的基础上，加入一条特异性的荧光探针。该探针为一寡核苷酸，两端分别标记

一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，PCR

扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告基团