DB23/T 3168-2022 盐碱土壤嗜盐细菌与古菌资源分离与快速分类技术规程

ICS65.020.20

CCSB05

DB23

黑龙江省地方标准

DB23/T3168—2022

盐碱土壤嗜盐细菌与古菌资源分离与快速分

类技术规程

2022-05-09发布2022-06-08实施

黑龙江省市场监督管理局发布

DB23/T3168—2022

前言

本文件依据GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由黑龙江省农业农村厅提出。

本文件起草单位：黑龙江省农业科学院土壤肥料与环境资源研究所。

本文件主要起草人：王爽、孙磊、金品娇、李伟群、陈雪丽、万书明、刘凯、李一丹、孙秀君。

I

DB23/T3168—2022

盐碱土壤嗜盐细菌与古菌资源分离与快速分类技术规程

1范围

本文件规定了盐碱土壤嗜盐细菌与古菌资源分离与快速分类技术的术语和定义、原理、一般要求、

分离方法和分类方法。

本文件适用于盐碱土壤中嗜盐细菌和嗜盐古菌的分离与快速分类。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求

GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法

NY/T1114-2006微生物肥料实验用培养基技术条件

NT/T1377土壤pH的测定

NT/T1121.16土壤检测第16部分：土壤水溶性盐总量的测定

NY/T2066-2011微生物肥料生产菌株的鉴别聚合酶链式反应（PCR）法

NY/T2321-2013微生物肥料产品检验规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

嗜盐微生物（Halophiles）

在盐环境中生长旺盛的一类喜盐的微生物，包括原核生物（细菌和古菌）和真核生物。根据它们对

氯化钠的需求，可分为轻度（最适盐浓度0.2mol/L～0.5mol/L）、中度（最适盐浓度0.5mol/L～2.5

mol/L）和极端嗜盐菌（最适盐浓度2.5mol/L～5.2mol/L）。

3.2

嗜盐细菌（Halophilicbacteria）

分类学上属于细菌域（Bacteriadomain），在0.2mol/L～2.5mol/L盐浓度范围内有最佳生长的

一类嗜盐微生物，主要为轻度和中度嗜盐细菌。

3.3

嗜盐古菌（Halophilicarchaeon）

分类学上属于古菌域（Archaeadomain），在含2.5mol/L～5.2mol/L盐浓度范围生长最好的一类

极端嗜盐微生物。

3.4

1

DB23/T3168—2022

分类（classification）

选择特定的引物，采用聚合酶链式反应（PCR）法快速扩增嗜盐细菌和嗜盐古菌分离株的16SrRNA

基因，在进一步测序的基础上进行16SrRNA基因序列的系统发育学分析来判定所属细菌或古菌的类别。

4原理

16SrRNA序列的系统发育学进化距离与表型特征及化学分类数据有非常好的相关性，但传统的微生

物分类学方法比较繁琐费时，而PCR快速扩增嗜盐细菌和嗜盐古菌的16SrRNA基因相对简单快捷。本方

法采用细菌和古菌的特