GB/T 20772-2008 动物肌肉中461种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS67.050

X04OB

中华人民共和国国家标准

GB/T20772—2008

代替GB/T20772—2006

动物肌肉中461种农药及相关化学品

残留量的测定液相色谱■串联质谱法

Determinationof461pesticidesandrelatedchemicalsresidues

inanimalmuscles—LC-MS-MSmethod

2008-12-31发布2009-05-01实施

发布

GB/T20772—2008

目次

前言ni

i范围1

2规范性引用文件1

3原理1

4试剂和材料1

5仪器2

6试样制备与保存2

7测定步骤2

8结果计算5

9精密度5

附录A（资料性附录）461种农药及相关化学品中英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和

混合标准溶液浓度表6

附录B（资料性附录）461种农药及相关化学品监测离子对、碰撞气能量、源内碎裂电压和

保留时间20

附录C（资料性附录）461种农药及相关化学品多反应监测（MRM）色谱图35

附录D（资料性附录）461种农药及相关化学品精密度数据表59

附录E（资料性附录）461种农药及相关化学品英文中文名称对照索引（按英文字母顺序）73

T

GB/T20772—2008

-1.Z-—1—

刖弓

本标准代替GB/T20772—2006《动物肌肉中380种农药及相关化学品残留量测定方法液相色

谱-串联质谱法》。

本标准与GB/T20772—2006相比，主要变化如下：

——可测定的农药由380种增加到461种；

——增加了负组的测试条件。

本标准的附录A、附录E、附录C、附录D、附录E为资料性附录。

本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口，

本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、山东农业大学。

本标准主要起草人:庞国芳、曹彦忠、范春林、贾光群、郑锋、王雯雯、连玉晶、张进杰、李学民、刘永明、

石玉秋。

本标准于2006年首次发布。

ni

GB/T20772—2008

动物肌肉中461种农药及相关化学品

残留量的测液相色谱■串联质谱法

1范围

本标准规定了猪肉、牛肉、羊肉、兔肉、鸡肉中461种农药及相关化学品（参见附录A和附录E）残

留量液相色谱-串联质谱测定方法。

本标准适用于猪肉、牛肉、羊肉、兔肉、鸡肉中461种农药及相关化学品的定性鉴别，396种农药及

相关化学品残留量的定量测。

本标准定量测定的396种农药及相关化学品的方法检出限为0.04卩g/kg〜4.82mg/kg（参见附录A）。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6379.1测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第1部分:总则与定义（GB/T6379.1-

2004,ISO5725-1：1994,IDT）

GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复

性与再现性的基本方法（GB/T6379.2—2004,ISO5725-2：1994,IDT）

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682—2008,ISO3696：1987,MOD）

GB/T9695.19肉与肉制品取样方法

3原理

用环己烷-乙酸乙酯均质提取试样，凝胶渗透色谱净化，液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。

4试剂和材料

水为GB/T6682规定的一级水。

4.1乙睛：色谱纯。

4.2甲苯：色谱纯。

4.3环己烷：色谱纯。

4.4乙酸乙酯：色谱纯。

4.5甲醇:色谱纯。

4.6异辛烷：色谱纯。

4.7微孔过滤膜（尼龙）：13mmXO.45（umo

4.8微孔过滤膜（尼龙）：13mmX0.2Mmo

4.90.1%甲酸溶液（体积分数）。

4.105mmol/L乙酸钱溶液。

4.11无水硫酸钠：分析纯。用前在650°C灼烧4h,贮于干燥器中，冷却后备用。

4.12环己烷+乙酸乙酯混合溶剂（1+1,体积比）。

4.13乙睛+水（3+2,体积比）。

1

GB/T20772—2008

4.14农药及相关化学品标准物质：纯度》95%。

4.15农药及相关化学品标准溶液

4.15.1标准储备溶液

分别称取5mg〜10mg（精确至0.1mg）农药及相关化学品各标准物分别于10mL容量瓶中，根据

标准物的溶解性选甲醇、甲苯、丙酮、乙睛或异辛烷等溶剂溶解并定容至刻度（溶剂选择参见附录A）。

标准储备溶液避光0C〜4C保存，可使用一年。

4.15.2混合标准溶液（混合标准溶液A、B、C、D、E、F和G）

按照农药及相关化学品的性质及保留吋间，将461种农药及相关化学品分成A、B、C、D、E、F、G七

个组，并根据每种农药及相关化学品在仪器上的响应灵敏度，确定其在混合标准溶液中的浓度。本标准

对461种农药及相关化学品的分组及其混合标准溶液浓度参见附录Ao

依据每种农药及相关化学品的分组、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度，移取一定量的单个

农药及相关化学甜标准储备溶液于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。混合标准溶液避光0C〜

4C保存，可使用一个月。

4.15.3基质混合标准工作溶液

基质混合标准工作溶液是用空白样品提取液配成不同浓度的基质混合标准工作溶液A、B、C、D、

E、F和G组，用于做标准工作曲线。

基质混合标准工作溶液应现用现配。

5仪器

5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）O

5.2凝胶渗透色谱仪。

5.3分析天平：感量0.1mg,0.01go

5.4旋转蒸发器.

5.5均质器：最大转速为24000r/mino

5.6离心机:最大转速为4200r/min。

5.7氮气吹干仪。

5.8鸡心瓶：100mLo

5.9移液器：1mL,5mLo

5.10样品瓶：2mL,带聚四氟乙烯旋盖。

6试样制备与保存

6.1试样的制备

按GB/T9695.19抽取的样品用绞肉机绞碎，充分混匀，用四分法缩分至不少于500g,作为试样，

装入清洁容器内，密封后，标明标记。

6.2试样的保存

将试样于一18C冷冻保存。

7测定步骤

7.1提取

称取10g试样，精确至0.01g,放入盛有20g无水硫酸钠（4.11）的50mL离心管中，加入35mL

环己烷+乙酸乙酯混合溶剂（4.12）。用均质器（5.5）在15000r/min均质提取1.5min,再用离心机

（5.6）在3000r/min离心3mino上清液通过装有无水硫酸钠的筒形漏斗，收集于100mL鸡心瓶中

（5.8）,残渣用35mL环己烷+乙酸乙酯混合溶剂重复提取一次,经离心过滤后，合并两次提取液，将提

2

GB/T20772—2008

取液于40°C水浴用旋转蒸发器（5.4）旋转蒸发至约5mL,待净化。若以脂肪计，将提取液收集于已称

重的鸡心瓶中，用旋转蒸发器在40C水浴蒸发至5niL,然后在50C用氮气浓缩仪吹干残存的溶剂，鸡

心瓶称重后，记下脂肪质量，待净化。

7.2凝胶渗透色谱净化

7.2.1条件

a）净化柱：400mmX25mm,内装BIO-BeadsS-X3填料或相当者；

b）检测波长：254nm；

c）流动相：乙酸乙酯+环己烷（1+1,体积比）；

d）流速：5mL/min；

e）进样量：5mL；

f）开始收集吋间：22min；

g）结束收集吋间：40mino

7.2.2净化

将浓缩的提取液或脂肪（7.1）用乙酸乙酯+环己烷混合溶剂溶解转移至10mL容量瓶中，用5mL

环己烷+乙酸乙酯混合溶剂分两次洗涤鸡心瓶，并转移至上述10mL容量瓶中，再用环己烷+乙酸乙

酯混合溶剂定容至刻度，摇匀。经0.45“n滤膜（4.7）过滤入10mL试管中，供凝胶渗透色谱仪净化，

收集22min〜40min的憎分于100mL鸡心瓶中，并在40"C水浴旋转蒸发至0.5mL。用氮气吹干，再

用1.0mL乙睛+水（3+2）溶解残渣，经0.2滤膜（4.8）过滤后，供液相色谱-串联质谱进行检测。

同时取不含农药及相关化学品的肌肉样品，按7.1和7.2步骤制备空白样品提取液,用于配制基质

混合标准工作溶液。

7.3液相色谱-串联质谱测

7.3.1条件

7.3.1.1A、B、C、D、E、F组农药及相关化学品液相色谱-串联质谱测定条件

a）色谱柱:ZORBAXSB-C1X,3.5“n,100mmX2.1mm（内径）或相当者；

b）流动相及梯度洗脱条件见表1;

表1流动相及梯度洗脱条件

步骤总时间/min流速/(卩L/min)流动相A（0.1%甲酸水）/%流动相B（乙脂）/%

00.0040()99.01.0

13.0040()70.030.0

26.0040()60.040.0

39.0040()60.040.0

415.0040()40.060.0

519.0040()1.099.0

623.0040()1.099.0

723.0140()99.01.0

c）柱温：40C；

d）进样量：10卩L；

e）离子源:ESI；

f）扫描方式：正离子扫描;

g）检测方式：多反应监测;

h）电喷雾电压：4000V；

3

GB/T20772—2008

i）雾化气压力：O.28MPa；

j）干燥气温度：35O°C；

k）干燥气流速：1OL/min；

l）监测离子对、碰撞气能量和源内碎裂电压参见附录B。

7.3.1.2G组农药及相关化学品液相色谱-串联质谱测定条件

a）色谱柱:ZORBAXSB-Cia,3.5“n,100mmX2.1mm（内径）或相当者;

b）流动相及梯度洗脱条件见表2；

表2流动相及梯度洗脱条件

步骤总时间/min流速/(pL/min)流动相A（5mmol/L乙酸鞍水）/%流动相B（乙脂）/%

00.0040()99.01.0

13.0040()70.030.0

26.0040()60.040.0

39.0040()60.040.0

415.0040()40.060.0

519.0040()1.099.0

623.0040()1.099.0

723.0140()99.01.0

c）柱温：40C；

d）进样量：10卩L；

e）离子源:ESI；

f）扫描方式：负离子扫描；

g）检测方式：多反应监测；

h）离子喷雾电压：4000V；

i）雾化气压力：0.28MPa；

j）干燥气温度：35OC；

k）干燥气流速：10L/min；

l）监测离子对、碰撞气能量和源内碎裂电压参见附录Bo

7.3.2定性测

在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留吋间与标准样品相一致，并且在扣除

背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一

致（相对丰度＞50%,允许±20%偏差；相对丰度＞20%〜50%,允许±25%偏差；相对丰度＞10%〜

20%,允许±30%偏差；相对丰度＜10%,允许±50%偏差），则可判断样品中存在这种农药或相关化

学品。

7.3.3定量测

本标准中液相色谱-串联质谱采用外标-校准曲线法定量测。为减少基质对定量测定的影响，

量用标准溶液应采用基质混合标准工作溶液绘制标准曲线。并且保证所测样品中农药及相关化学品的

响应值均在仪器的线性范围内。461种农药及相关化学品多反应监测（MRM）色谱图参见附录C。

7.4平行试验

按以上步骤对同一试样进行平行试验测。

7.5空白试验

除不称取试样外，均按上述步骤进行。

4

GB/T20772—2008

8结果计算

结果按式（1）计算:

式中：

X,——试样（或脂肪）中被测组分残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

C——从标准曲线上得到的被测组分溶液浓度，单位为微克每毫升（Mg/mL）；

V——样品溶液定容体积，单位为毫升（mL）；

m——样品溶液所代表试样（或脂肪）的质量，单位为克（g）。

计算结果应扣除空白值。

9精密度

本标准精密度数据是按照GB/T6379.1和GB/T6379.2的规定确定的，获得重复性和再现性的

值是以95%的可信度来计算。本标准方法的精密度数据参见附录D。

5

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附录A

(资料性附录)

461种农药及相关化学品中英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表

461种农药及相关化学品中英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓度表见

表A.10

表A.1461种农药及相关化学品中英文名称、方法检出限、分组、

溶剂选择和混合标准溶液浓度表

检出限/混合标准溶液

序号中文名称英文名称溶剂

(“g/kg)浓度/(mg/L)

A组

1苯胺灵propham55.00甲苯11.00

2异内威isoprocarb1.15甲醇0.23

33,4,5-混杀威3,45-trimethacarb0.17甲醇0.03

4环莠隆cycluron0.10甲醇0.02

5甲蔡威carbaryl5.16甲醇1.03

6毒草胺"propachlor1.10甲醇0.03

7毗咪睦rabenzazole0.67甲醇0.13

8西草净simetryn0.07甲醇0.01

9绿谷隆monolinuron1.78甲醇0.36

10速灭磷mevinphos0.78甲苯0.16

11叠氮津aziprotryne0.69甲醇0.14

12密草通secbumeton0.04甲醇0.01

13喀菌磺胺cyprodinil0.37甲醇0.07

14播土隆buturon4.48甲醇0.90

15双酰草胺carbetamide1.82甲醇0.36

16抗酚威pirimicarb0.08甲醇0.02

17异噁草松clomazone0.21甲醇0.04

18氤草津cyanazine0.08甲醇0.02

19扑草净prometryne0.08甲醇0.02

20甲基对氧磷paraoxonmethyl0.38甲醇0.08

21嗟虫咻thiacloprid0.19甲醇0.04

22毗虫咻imidacloprid11.00甲醇2.20

23磺嚏隆ethidimuron0.75甲醇0.15

24丁嗪草酮isomethiozin0.53甲醇0.11

25燕麦敌diallate44.60甲醇&92

26乙草胺acetochlor23.70甲醇4.74

6

GB/T20772—2008

表A.1(续)

检出限/混合标准溶液

序号中文名称英文名称溶剂

(”g/kg)浓度/(mg/L)

27烯腱虫胺"nitenpyram&56甲醇1.71

28盖草津methoprotryne0.12甲醇0.02

29二甲酚草胺dimethenamid2.15甲醇0.43

30特草灵"terrbucarb1.05甲醇0.21

31戊菌哇penconazole1.00甲醇0.20

32睛菌睦myclobutanil0.50甲醇0.10

33咪哇乙烟酸"imazethapyr0.56甲醇0.11

34多效吐paclobutrazol0.29甲醇0.06

35倍硫磷亚砚fenthionsulfoxide0.16甲醇0.03

36三哇醇triadimenol5.28甲醇1.06

37仲丁灵butralin0.95甲醇0.19

38螺噁茂胺spiroxamine0.12甲醇0.01

39甲基立枯磷tolclofosmethyl33.28甲醇6.66

40甜菜胺desmedipham2.()1甲醇0.40

41杀扑磷methidathion5.33甲醇1.07

42烯丙菊酯allethrin30.20甲醇6.04

43二嗪磷diazinon0.36甲苯0.07

44敌瘟磷edifenphos0.38甲醇0.08

45丙草胺pretilachlor0.17甲醇0.03

46氣硅哇flusilazole0.29甲醇0.06

47丙森锌"iprovalicarb1.16甲醇0.23

48麦锈灵benodanil1.74甲醇0.35

49氟酰胺flutolanil0.57甲醇0.11

50氨磺磷famphur1.80甲醇0.36

51苯霜灵benalyxyl0.62甲醇0.12

52节氯三哇醇diclobutrazole0.23甲醇0.05

53乙环吐etaconazole0.89甲醇0.18

54氯苯喘呢醇fenarimol0.30甲醇0.06

55臥酸二环己基酯“phthalicacid,dicyclobexylester1.00甲醇0.20

56胺菊酯tetramethirn0.91甲醇0.18

57解草酯"cloquintocetmexyl0.94甲醇0.19

58联苯三醴醇bitertanol16.70甲醇3.34

59甲基毒死卿chlorprifosmethyl&00甲醇1.6()

60毗喃草酮tepraloxydim6.10甲醇1.22

7

GB/T20772—2008

表A.1（续）

检出限/混合标准溶液

序号中文名称英文名称溶剂

(”g/kg)浓度/(mg/L)

61益棉磷azinphosethyl54.46甲醇10.89

62杀铃服triflumuron1.96甲醇0.39

63异噁氟草isoxaflutole1.95甲醇0.39

64莎稗磷"anilofcs2.86甲醇0.07

65唾禾灵"quizalofop-ethyl0.34甲醇0.07

66精氟毗甲禾灵haloxyfop-methyl1.32甲醇0.26

67毗氟禾草灵“fluazifopbutyl0.13甲醇0.03

68乙基漠硫磷bromophos-ethyl283.85甲醇56.77

69地散磷“bensulide13.68甲醇3.42

70瞇苯磺隆triasulfuron0.80甲醇0.16

71漠苯烯磷bromfenvinfos1.51甲醇0.30

72曙菌酯azoxystrobin0.23甲醇0.05

73毗菌磷pyrazophos0.81甲醇0.16

74前虫威indoxacarb3.77甲醇0.75

B组

75棉隆”dazomet63.50甲醇12.70

76烟碱"nicotine1.10甲醇0.22

77非草隆fenuron0.52甲醇0.10

78灭蝇胺"cyromazine2&96甲醇0.72

79鼠立克crimidine0.78甲醇0.16

80乙酰甲胺磷“acephate6.67甲醇1.33

81禾草敌molinate1.05甲醇0.21

82多菌灵carbendazim0.23甲醇0.05

6-chloro-4-hydroxy-3-phenyl-

836-氯-4-羟基-3-苯基哒嗪0.83甲醇0.17

pyridazin

84残杀威propoxur12.20甲醇2.44

85异1•坐隆isouron0.20甲醇0.04

86绿麦隆chlorotoluron0.31甲醇0.06

87久效威thiofanox7&50甲醇15.70

88氯草灵"