T/SDAA 0054-2021 动物性食品中 12 种β-受体激动剂类药 物检测技术规范 酶联免疫吸附法

主要技术内容:动物性食品中 12 种β-受体激动剂类药物检测技术规范 酶联免疫吸附法 1 范围本文件规定了酶联免疫吸附法（ELISA）检测动物性食品中12种β-受体激动剂类药物残留量的 技术规范。 本文件适用于猪肉、牛肉、羊肉中克伦特罗、沙丁胺醇、氯丙那林、特布他林、妥布特罗、溴 布特罗、马喷特罗、西布特罗、马布特罗、班布特罗、西马特罗和非诺特罗等 12 种β-受体激动剂 类药物总残留量的测定。 本文件方法的最低检测限：猪肉、牛肉、羊肉中 12 种β-受体激动剂类药物总残留量的最低检 测限均为 1μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 33411 酶联免疫分析试剂盒通则 3 原理采用间接竞争 ELISA 方法，在微孔条上包被克伦特罗抗原，试样中残留的β-受体激动剂类药物 与酶标板上的克伦特罗抗原竞争克仑特罗抗体，加酶标记的抗体后，显色剂显色，终止液终止反应。 用酶标仪在 450 nm 处测定吸光度,吸光值与 12 种β-受体激动剂类药物残留总量成负相关，与标准 曲线比较即可得出 12 种β-受体激动剂类药物残留量。T/SDAA 0054－2021 4 试剂或材料 以下所用的试剂，除非另有规定外，仅使用分析纯试剂 4.1 水，GB/T 6682，三级。 4.2 氢氧化钠（NaOH） 4.3 三氯乙酸（C2HCl3O2） 4.4 氢氧化钠溶液：C(NaOH)= 1 mol/L，称取氢氧化钠（4.2）40.0 g，加水溶解定容至 1000 mL。 4.5 三氯乙酸溶液：C(C2HCl3O2)=10 g/L，称取三氯乙酸（4.3）10.0 g，加 1000 mL 水溶解，摇匀。 4.6 β-受体激动剂检测试剂盒 2℃～8℃保存。 4.6.1 包被有克仑特罗抗原的 96 孔板 规格为 12 条×8 孔。 4.6.2 克仑特罗抗体工作液 4.6.3 酶标记物工作液 4.6.4 20 倍浓缩洗涤液 4.6.5 底物液 A 液 4.6.6 底物液 B 液 4.6.7 终止液 4.6.8 克仑特罗系列标准溶液 6 个浓度梯度，浓度分别为 0μg