DB3301/T 1082-2018 堇叶紫金牛组赔繁育技术规程

ICS65.020.20

B05

DB3301

浙江省杭州市地方标准

DB3301/T1082—2018

堇叶紫金牛组培繁育技术规程

2018-06-20发布2018-07-20实施

杭州市质量技术监督局发布

DB3301/T1082—2018

前  言

本标准按照GB/T1.1－2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规定起草。

本标准由杭州市林业水利局提出并归口。

本标准主要起草单位：杭州市园林绿化股份有限公司、杭州市林木种苗管理中心。

本标准主要起草人：杨浩、孙英坤、胡亚芬、高凯、陈林敬、魏建芬、樊靖、姚涛、邱影、崔晓燕、

王霁、李红霞。

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DB3301/T1082—2018

堇叶紫金牛组培繁育技术规程

1范围

本标准规定了堇叶紫金牛（Ardisiaviolacea）组培快繁过程中的外植体制备、组织培养、炼苗、

上盆、容器苗管理、苗木出圃、档案管理等内容。

本标准适用于杭州市范围内堇叶紫金牛的组培繁育。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T2306－2013花卉种苗组培快繁技术规程

DB33/T179林业育苗技术规程

3母株选择

选择长势旺盛、叶背暗紫色、叶脉清晰、无病虫害的植株作为组培繁殖母株，置于温室内培养。

4外植体制备

4.1外植体采集

选择健壮选择健壮、无病虫害、带休眠腋芽的新发茎段为外植体材料。外植体采集后宜当日进行消

毒处理，或保存于4℃冰箱，保存时间不宜超过2d。

4.2外植体消毒

4.2.1表面消毒

沿叶柄基部切除外植体材料的叶片，用小毛刷蘸取少量洗洁精轻轻刷洗茎段表面，反复刷洗叶腋附

近，用自来水冲洗干净；将外植体茎段切段，用0.1%的苯扎溴铵于磁力搅拌器上进行消毒处理,转速不

宜超过200转/min；处理时间与茎段幼嫩程度选择5min～12min；倒掉消毒液，在流水下冲洗30min～

60min。

4.2.2深度消毒

将表面消毒后的外植体材料置于无菌操作台上，用无菌水冲洗外植体茎段1次；使用75%乙醇溶液摇

晃消毒处理，处理时间根据茎段幼嫩程度选择15s～90s；倒掉乙醇溶液，用1%次氯酸钠溶液摇晃消毒处

理，处理时间与茎段幼嫩程度成反比，宜选择3s～10min；倒掉消毒液，用无菌水反复冲洗4～5次，每

次5min。

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5组培扩繁

5.1培养基制备

5.1.1培养基制备方法

参照NY/T2306－2013花卉种苗组培快繁技术规程。

5.1.2培养基配方

参照附录A。

5.2初代培养

5.2.1将外植体茎段切成长度约2cm的小段，并带有1个休眠腋芽。

5.2.2用无菌刀片切除小段下端（芽向上）褐化部分，迅速接种到初代培养基上。

5.2.3培养条件：温度25±2℃、光照时间10h/d、光照强度1500Lx～2000Lx，相对湿度60%～65%。

5.3增殖培养

5.3.1将新发的侧芽嫩茎切下，接种到增殖培养基上。

5.3.2培养条件：温度25±2℃，光照时间12h/d，光照强度2000Lx～2500Lx，相对湿度为60%～65%。

5.3.3培养约40d后分化产生大量侧芽和不定芽丛。

5.4壮苗培养

5.4.1将不定芽丛轻轻拨散成单个不定芽，将伸长的侧芽嫩茎切下，接种到壮苗培养基。

5.4.2培养条件为温度25±2℃、光照时间12h/d、光照强度2000Lx～2500Lx、相对湿度60%～65%。

5.4.3壮苗培养约20d后，再生小苗达到叶片数量6枚以上、高度5cm以上、茎粗2m