GB/T 46249-2025 化学品 快速雄激素干扰活性报告试验

ICS13300

CCSA.80

中华人民共和国国家标准

GB/T46249—2025

化学品快速雄激素干扰活性报告试验

Chemicals—RaidandroendisrutionactivitreorterRADARassa

pgpyp()y

2025-10-05发布2026-02-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T46249—2025

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语定义和缩略语

3、………………………1

试验原理

4…………………2

受试物信息

5………………2

参比物

6……………………3

仪器设备

7…………………3

方法概述

8…………………3

试验准备

9…………………5

试验过程

10…………………7

试验的有效性

11……………8

数据与报告

12………………9

试验报告

13………………11

附录规范性试验条件

A()………………13

附录资料性最佳成像设置条件的确定校准

B()………14

附录资料性收集胚胎驯化和批量收集

C():…………18

附录资料性日本青鳉胚胎孵化所需的培养基化学特性

D()…………19

附录资料性鉴别正常与异常游离胚胎的拍摄方法

E()………………20

附录资料性胚胎定位

F()………………21

附录资料性试验数据的统计分析方法

G()……………22

参考文献

……………………24

Ⅰ

GB/T46249—2025

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC251)。

本文件起草单位上海交通大学北京师范大学科之华检验检测福建有限公司江苏省产品质量

:、、()、

监督检验研究院生态环境部南京环境科学研究所生态环境部华南环境科学研究所生态环境部固体

、、、

废物与化学品管理技术中心南京财经大学中国科学院广州能源研究所中检科健天津检验检测有

、、、()

限责任公司江苏雅信昆成检测科技有限公司

、。

本文件主要起草人于云江刘济宁彭颖王蕾刘洪英顾爱国刘晓建范德玲向明灯杨倩

:、、、、、、、、、、

周丽丽丁洁刘建梅张璐丁丰黄建梅周彤杨畅王雪芬杨光超王柳红李国晨张文轩文武

、、、、、、、、、、、、、、

方齐乐李良忠刘新会刘春艳

、、、。

Ⅲ

GB/T46249—2025

引言

本文件利用携带spg1gfp遗传构建体的转基因品系日本青鳉Oryziaslatipes的

-(,Japanesemedaka)

胚胎在多孔板上测定受试物是否具有雄激素干扰活性简称试验

,,RADAR(RapidAndrogenDisruption

ActivityReporterassay)。

由于日本青鳉雌激素受体和雄激素受体与人的相关受体表现出构象保守性因此本文

(ER)(AR),

件采用携带spg1gfp基因遗传构建体的转基因品系日本青鳉Oryziaslatipes作为受试生物该遗

-(),

传构建体包含与绿色荧光蛋白的报告基因偶联的spiggin1基因的启动子Spiggin基因是一

(GFP)。

种糖蛋白黏液状胶质蛋白的编码基因该糖蛋白产自于性成熟的雄性三棘刺鱼Gasterosteusaculea-

(),(

tus肾脏本文件中使用的spg1gfp转基因品系是在驱动编码序列表达的起始密码子的上游

)。-GFP

携带的三棘刺鱼spiggin1基因启动子日本青鳉和三棘刺鱼中的spiggin1基因都具有组

4.159kb。

织特异性spg1gfp转基因品系完全复制了spiggin1的特性因此仅限在肾脏中肾中特异性

,-,GFP()

表达

。

本文件的目的在于鉴定受试物在雄激素轴上是否具有潜在活性而不是为了获得用于风险评估的

,

毒性数据例如无观察效应浓度或效应浓度本文件可用于指导经济合作与发展组织关于内

()。(OECD)

分泌干扰物试验框架的第层级见参考文献第号试验指南中试验结果在类群间的解

3,[33],OECD150

释和外推

。

本文件只能采用spg1gfp转基因品系日本青鳉如需使用基于spiggin1启动子驱动表达

-,GFP

或报告基因的其他转基因品系则需要进行完整的方法验证以调整相关有效性标准统计分析和荧光

,,、

阈值

。

本试验的终点为诱导单个胚胎发出荧光与对照组相比当胚胎暴露于受试物后会激活或抑制遗

。,

传构建体的转录时胚胎会表达更多或更少的从而表现出相应更强或更弱的荧光另一种条件

,GFP,。

为在有或无α甲基α二氢睾酮作为激动剂的情况下对受试物进行试验由

,17--5-(17MT,3μg/L,AR)。

于胚胎阶段产生的雄激素水平较低因此可在暴露溶液中添加用于检测对可利用性有影

,17MT,17MT

响的受试物或对表现出拮抗作用的受试物浓度筛选试验确定联合暴露的合适浓

,AR。17MT17MT

度为和所选浓度对促雄激素和抗雄激素的参考受试物有最高的敏感度

3μg/L5μg/L,(3μg/L)。

Ⅳ

GB/T46249—2025

化学品快速雄激素干扰活性报告试验

1范围

本文件描述了化学品快速雄激素干扰活性报告的试验方法

。

本文件适用于试验和评价受试物的雄激素干扰活性用于测定受试物在含有s1-转基因品系

,pggfp

日本青鳉Orziaslaties胚胎中的荧光强度也适用于不挥发或低挥发性能被精确测定的所有受

(yp);、

试物

。

本文件不适用于易挥发的受试物

。

注若用于测试混合物不明复杂物质或多组分物质则对其成分进行表征例如其成分的化学特性定量

:、(UVCB),,,、

情况和物质特性

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

化学品快速生物降解性呼吸计量法试验

GB/T21801

化学品快速生物降解性改进的试验

GB/T21802MITI(Ⅰ)

化学品快速生物降解性消减试验

GB/T21803DOC

化学品快速生物降解性密闭瓶法试验

GB/T21831

化学品快速生物降解性二氧化碳产生试验

GB/T21856

化学品快速生物降解性改进的筛选试验

GB/T21857OECD

化学品快速生物降解性通则

GB/T27850

3术语定义和缩略语

、

31术语和定义

.

下列术语和定义适用于本文件

。

311

..

游离胚胎eleutheroembryo

胚胎孵化后但能独立进食提供的外源性食物之前的胚胎发育的阶段

,。

注在本试验中定义为日本青鳉胚胎从发育阶段第期孵化阶段第期捕获猎物所需的结构已形成包括

:39()~42(,

上颌的牙齿耳石和所有鳍的形状

、)。

312

..

加标模式spikedmode

在添加激动剂的情况下进行的快速雄激素干扰活性试验

AR。

313

..

未加标模式unspikedmode

未添加激动剂的情况下进行的快速雄激素干扰活性试验

AR。

1