DB42/T 140-2017 桑蚕一代杂交种检验规程

ICS65.020.30

B44

备案号：

DB42

湖北省地方标准

DB42/T140—2017

代替DB42/T140-2002

桑蚕一代杂交种检验规程

ThetestingrulesforF1hybrideggsofsilkworm

（报批稿）

2017-05-16发布2017-09-01实施

湖北省质量技术监督局发布

DB42/T140—2017

目次

前言...............................................................................III

1范围..............................................................................1

2规范性引用文件....................................................................1

3定义..............................................................................1

4检验..............................................................................2

4.1蚕种繁育检验..................................................................2

4.2母蛾微粒子病检疫..............................................................4

4.3成品质量检验..................................................................6

附录A（规范性附录）蚕种繁育检验单..................................................8

附录B（规范性附录）桑蚕一代杂交种母蛾微粒子病检验抽样装盒规定（散卵种）............9

附录C（规范性附录）桑蚕一代杂交种送检母蛾清单和母蛾微粒子病检疫单.................10

附录D（规范性附录）桑蚕一代杂交种母蛾微粒子病检疫合格标准（散卵种）...............11

附录E（规范性附录）桑蚕一代杂交种母蛾检验报告（代检验证书）.......................12

附录F（规范性附录）蚕种成品质量检验报表...........................................13

附录G（规范性附录）蚕种成品质量检验合格证书.......................................14

附录H（资料性附录）染色液的配制方法...............................................15

I

DB42/T140—2017

II

DB42/T140—2017

前言

本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编写。

本标准代替DB42/T140-2002《家蚕一代杂交种检验规程》。

本标准与DB42/T140-2002相比，除编辑性修改外，主要变化如下：

——修改了标准名称（将标准名称《家蚕一代杂交种检验规程》修订为《桑蚕一代杂交种检验规程》）；

——增加了规范性引用文件（见第2章）；

——修改了部分定义条文的表述（2002年版2.1、2.2、2.3、2.5、2.6、2.7，本版3.1、3.2、3.3、3.5、

3.6、3.7）；

——增加了蚕种繁育环境检验（2002年版3.1.1，本版4.1.1.1）；

——删除了蚕种繁育检验中的卵质调查（2002年版3.1.4）；

——增加了母蛾盒的送样、母蛾盒的验收（2002年版3.2，本版4.2.4、4.2.5）；

——增加了成品卵微粒子病检疫和数据修约（本版4.3.5、4.3.6）；

——修改了微粒子孢子的鉴别法（2002年版3.2.5，本版4.2.9）；

——在附录C中增加了桑蚕一代杂交种送检母蛾清单（本版附录C中表C.1）；

——增加了附录H。

本标准由湖北省农业科学院提出。

本标准由湖北省农业科学院归口管理。

本标准起草单位：湖北省农业科学院经济作物研究所、湖北省果茶办公室。

本标准主要起草人：吴凡、李德臣、陈登松、郝瑜、关永东、胡刚、肖胜武、熊超、范锦、

余银山。

本标准历次发布版本情况为：

——DB42/T140-1997；

——DB42/T140-2002。

III

DB42/T140—2017

桑蚕一代杂交种检验规程

1范围

本标准规定了桑蚕一代杂交种检验的技术要求。

本标准适用于湖北省内生产的桑蚕一代杂交种检验。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定

NY/T327桑蚕一代杂交种检验规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

良卵率goodeggpercentage

在调查的样本中，良卵粒数占蚕卵总粒数的百分比。

3.2

简化催青simpleincubation

在丙2～戊2、戊3～己5胚胎发育阶段，分别用不同的温度、湿度、光线保护使蚕卵孵化的方法。

3.3

实用孵化率practicalhatchability

在调查的样本中，连续最大二日孵化的蚕卵粒数占总良卵粒数的百分比。

3.4

品种纯度purityofvariety

调查样本中，符合品种性状的个体数占调查总个体数的百分比。

3.5

杂交率percentageofhybridizedsilkworm

在调查的样本中，符合品种性状的一代杂交种的个体数占调查总数的百分比。

1

DB42/T140—2017

3.6

母蛾微粒子病率pebrinerateoffemalemoth

指带微粒子孢子的母蛾数占制种批/段母蛾总数的百分比。

3.7

蚕卵微粒子病率rateofpebrinecontaminatedeggs

蚕卵微粒子病率（简称病卵率）是指带微粒子孢子的蚕卵数占调查样本蚕卵总数的百分比。

4检验

4.1蚕种繁育检验

4.1.1预知检验

预知检验包括蚕种繁育环境检验，迟眠、弱小、病态蚕镜检，不结茧蚕、病死蚕检查，苗蛾、病态

蛾镜检。

4.1.1.1蚕种繁育环境检验

在蚕种繁育生产开始前15d，以原蚕饲育户或饲育小组为镜检批，对蚕种繁育饲养的相关用具及周

边环境进行抽检。每个原蚕区饲育户或饲育小组饲养量抽样数量不少于30个，所涉及到的每个点抽样重

复3次。将所抽得的样本置于乳钵中，加入适量2%KOH液碾碎后制样镜检。

4.1.1.2迟眠、弱小、病态蚕镜检

以饲育区或原蚕饲育户为镜检批，按1龄3龄全抽，4龄5龄510头蚕/箔的标准抽样；将样本置

29℃30℃、相对湿度80%90%的环境中，经2d3d后，将小蚕整体，大蚕取中肠放入乳钵中，加入

适量2%KOH液碾碎后制样镜检。

4.1.1.3不结茧蚕、病死蚕检查

以饲育区或原蚕饲育户为检验批，检验全部不结茧蚕、病死蚕；用镊子撕开蚕体观察丝腺，若有乳

白色脓疱状斑块为微粒子病；若丝腺病变不明显，可加入适量2%KOH液磨碎镜检。

4.1.1.4苗蛾、病态蛾镜检

以饲育区或原蚕饲育户为检验批，抽30只苗蛾、病态蛾；将样本置乳钵中，加适量2%KOH液碾磨

后制样镜检。

4.1.2品种纯度调查

在5龄第3d，按饲育批，抽5%饲育区或原蚕户调查幼虫的体色、体形、斑纹，选出不符合品种固

有性状的个体，计算其纯度。

品种纯度计算公式：

符合品种性状的蚕头数

品种纯度（%）100................................................(1)

调查总头数

2

DB42/T140—2017

4.1.3种茧调查

种茧调查包括种茧调查时期、收茧量调查、公斤茧粒数调查、死笼率调查、茧层率调查、种茧调查

规则。

4.1.3.1种茧调查时期

春季在盛上蔟后7足天，夏、秋季在盛上蔟后6足天进行种茧调查。

4.1.3.2收茧量调查

除薄皮茧、烂茧外，其余种茧称量计重。

4.1.3.3公斤茧粒数调查

蚁量＜20g的饲育批，逐箔随机抽样共500g点数，计算公斤茧粒数；蚁量≥20g的饲育批，逐箔随

机抽样共1000g点数，计算公斤茧粒数。

公斤茧粒数计算公式：

样茧粒数

公斤茧粒数（粒）1000......................................................(2)

样茧重量（g）

4.1.3.4死笼率调查

蚁量＜100g的饲育批，逐箔随机抽样共1000粒茧；蚁量≥100g的饲育批，逐箔随机抽样共2000粒

茧。原蚕户种茧＜20kg的抽200粒茧，原蚕户种茧≥20kg的抽400粒茧，然后逐粒剖茧调查；凡茧内病

死蚕蛹、半脱皮蚕蛹等均作死笼茧；僵蚕、僵蛹、蝇蛆蛹、虫害蛹及受伤出血蛹等不作死笼茧。

死笼率计算公式：

死笼粒数

死笼率（%）100............................................................(3)

调查茧总粒数

4.1.3.5茧层率调查

剥去茧衣，每批随机抽样雌雄茧各50粒，剖茧称取全茧量、茧层量。

茧层率计算公式：

雌雄茧各50粒合计茧层量

茧层率（%）100.................................................(4)

雌雄茧各50粒合计全茧量

4.1.3.6种茧调查规则

若有不合格项目，最多可再重复抽样两次，成绩以二次平均计算。

4.1.4判定规则

养蚕前环境检验有微粒子孢子的需严格消毒，经复检合格后方可饲养原蚕；其它预知检查项发现有

微粒子孢子的整区（户）淘汰；品种纯度≥95%，淘汰不符合该品种性状的个体；品种纯度＜95%属原

种质量问题整批（户）淘汰；蚕种繁育质量检验其中一项未达标为不合格，该饲育批（区）淘汰。

4.1.5制表

将各项检验项目数据汇总分析，填写《蚕种繁育检验单》见附录A，随母蛾送样时报检验单位。

3

DB42/T140—2017

4.2母蛾微粒子病检疫

母蛾微粒子病检疫采取集团磨蛾法检验。

4.2.1母蛾抽样

母蛾检疫批按制种批划分，同一制种批下可按制种日、户分段；抽样袋蛾时随机抽取制种母蛾样本，

苗末蛾必须全袋。按附录B抽样装盒规定的数量抽取母蛾装入蛾盒（袋）。蛾盒（袋）上标明生产单位

名称、品种名称、批次、段号、蛾盒号。

4.2.2母蛾装盒

按批（段）及毛种张数，对照《桑蚕一代杂交种母蛾微粒子病检验抽样装盒规定》（见附录B）比

例装盒；抽样要有随机性和代表性，不得剔选和遗漏，每盒以30蛾作为一个检验单位装盒袋蛾。

4.2.3母蛾干燥处理

母蛾盒分批收集，顺序排放，平摊箔内，集中放于通风干燥室内，待5日母蛾自然死亡后进行烘蛾，

即浸种可检鲜蛾；烘蛾温度不得超过70℃，以蛾头胸干硬，胸腹部稍软为宜；干燥的母蛾以10盒（袋）

扎一小捆，100盒（袋）扎一大捆，集中放入铁皮箱内，加入石灰包、樟脑丸等以防发热、霉烂及虫、

鼠害等。

4.2.4母蛾盒的送样

即时浸酸种袋蛾后即送样。冷藏浸酸种及越年种在母蛾干燥处理后送样。在干燥处理后15d内必须

将母蛾送到检验单位进行检验。送样过程中防止蚕蛾散落，避免受潮、污染、损坏或丢失；送样单位应

随样品附送检清单，标明生产单位、制种期别、品种、批（段）号、毛种数量、送样（蛾盒）数量等，

并填写《桑蚕一代杂交种送检母蛾清单》见附录C。

4.2.5母蛾盒的验收

凡蛾盒填写不清，批（段）号、盒号错乱，或发霉、腐烂、虫蛀、鼠咬、焦烘或其他影响检验正确

判断的，检验单位应拒收，该批样本不予检验。

4.2.6母蛾检疫方法

采用集团磨蛾法。

4.2.7检疫程序

抽样编号→拆盒投蛾→注液磨碎→过滤校正→离心沉淀→振荡取样→制片镜检→复检确认→结果

记载。

4.2.7.1抽样编号

根据制种批、段的蚕种数量，按附录D的规定，将送检母蛾盒分成第1样本（含苗蛾、末蛾）与第2

样本，先取第1样本进行编号并进入检疫流程。

4.2.7.2拆盒投蛾

蛾盒编号随磨蛾液传递。

4.2.7.3注液磨碎

4

DB42/T140—2017

在磨蛾杯中加注0.5%碳酸钠或碳酸钾溶液80mL-90mL，转速8000±400r/min磨蛾15s以上。

4.2.7.4过滤校正

将蛾液过滤至离心管内，加水校正离心管液量。

4.2.7.5离心沉淀

转速3000±150r/min离心3min，倒出上清液，在沉淀物中加入1%2%KOH溶液约1mL。

4.2.7.6振荡取样

手握离心管，在振荡器上振荡。

4.2.7.7制片镜检

在每个管中取4滴样液，点于两块载玻片上制成临时标本。

4.2.7.8复检确认

用光学显微镜在高于600倍下由两名检验员分别检验，每人检验两滴样液，每滴样液观察不少于5

个视野。若两人检验结果不一致，或有微粒子孢子，则应重新取样，复检确认。

4.2.7.9结果记载

将显微镜观察结果准确填入《桑蚕一代杂交种母蛾微粒子病检疫单》见附录C，有微粒子孢子者用

“+”，无微粒子孢子者