GB/T 18651-2026 牛无浆体病诊断技术

ICS11220

CCSB.41

中华人民共和国国家标准

GB/T18651—2026

代替GB/T18651—2002

牛无浆体病诊断技术

Diagnostictechniquesforbovineanaplasmosis

2026-03-31发布2026-10-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T18651—2026

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………1

临床诊断

5…………………2

样本的采集保存及运送

6、…………………2

血涂片显微镜检查

7………………………3

竞争法

8ELISA……………4

乳胶凝集检测法

9…………………………5

检测方法

10PCR…………………………6

综合判定

11…………………7

附录规范性试剂配制方法

A()…………9

附录资料性牛血液中的无浆体

B()……………………11

附录资料性重组边缘无浆体抗原制备

C()MSP5……………………12

附录资料性重组边缘无浆体蛋白多克隆抗体制备方法

D()MSP5…………………13

附录资料性重组边缘无浆体蛋白单克隆抗体制备方法

E()MSP5…………………14

附录资料性简易过碘酸钠法制备重组边缘无浆体蛋白抗体和辣根过氧化物酶结合物

F()MSP5…

…………………………15

附录资料性重组乳胶凝集颗粒抗原制备

G()MSP5…………………16

附录资料性边缘无浆体扩增产物电泳图

H()PCR…………………17

附录资料性边缘无浆体Msp基因位点产物序列

I()4PCR…………18

Ⅰ

GB/T18651—2026

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替牛无浆体病快速凝集检测方法与相比除

GB/T18651—2002《》,GB/T18651—2002,

结构调整和编辑性改动外主要技术变化如下

,:

增加了临床诊断见第章

———(5);

增加了样本的采集保存及运送见第章

———、(6);

增加了血涂片显微镜检查方法见第章

———(7);

增加了竞争检查方法见第章

———ELISA(8);

增加了边缘无浆体乳胶凝集检测法替代牛无浆体病快速凝集检测方法见第章

———,(9);

增加了检测方法见第章

———PCR(10);

增加了试剂配制方法见附录

———(A)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出

。

本文件由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本文件起草单位河南农业大学塔里木大学河南省动物检疫总站

:、、。

本文件主要起草人张龙现李俊强齐萌宁长申陈少渠毋亚运赵金凤廖培淇朱子奇

:、、、、、、、、、

余复昌菅复春王荣军李晓迎张素梅许会艳

、、、、、。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布为

———2002GB/T18651—2002;

本次为第一次修订

———。

Ⅲ

GB/T18651—2026

引言

牛无浆体病是由硬蜱传播的边缘无浆体AnaplasmamarginaleA.mar-

(Bovineanaplasmosis)(,

ginale专性寄生于牛红细胞内引起的一类传染性疾病大约有种硬蜱是边缘无浆体的传播媒介包

),20,

括革蜱属扇头蜱属和血蜱属的一些硬蜱牛无浆体病主要流行于全球热带和亚热带有硬蜱分布的地

、。

区我国各养牛地区均有发现在我国的广东贵州湖南湖北四川河南河北吉林新疆等省自治

,,、、、、、、、、(

区均有牛无浆体病的报道世界范围内牛无浆体病临床暴发均是由边缘无浆体引起虽然我国牛也

)。,,

检测出其他种类无浆体感染但这些无浆体种类感染常引起自限性疾病或呈隐性感染状态牛无浆体

,。

病最明显的临床症状为贫血和黄疸流行地区的牛常呈隐性感染新引进到流行区无免疫力的牛易

。,

感成年牛感染死亡率可高达

,50%。

Ⅳ

GB/T18651—2026

牛无浆体病诊断技术

1范围

本文件规定了牛边缘无浆体感染的检测及其所引起牛无浆体病的样品采集保存及运送临床诊断

、、

血涂片显微镜检查抗体竞争检测乳胶凝集检测检测及综合判定等诊断技术要求

、ELISA、、PCR。

本文件适用于牛无浆体病的诊断和流行病学调查及检疫

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

法双缩脲法

BCA:(BicinchoninicAcidAssay)

牛血清白蛋白

BSA:(BovineSerumAlbumin)

酶联免疫吸附试验

ELISA:(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay)

次黄嘌呤氨基蝶呤和胸腺嘧啶脱氧核苷

HAT:、(HypoxanthineAminopterinandThymidineDe-

oxyribonucleoside)

辣根过氧化物酶

HRP:(HorseRadishPeroxidase)

Msp主要表面蛋白编码基因

:(MajorSurfaceProteincodinggene)

主要表面蛋白

MSP:(MajorSurfaceProtein)

光密度

OD:(OpticalDensity)

磷酸盐缓冲液

PBS:(PhosphateBufferedSaline)

聚合酶链式反应

PCR:(PolymeraseChainReaction)

阳性对照抑制率

PI:(PositiveInhibitionValue)

十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳

SDS:(SodiumDodecylSulfatePolyacrylamideGelE-

lectrophoresis)

三羟甲基氨基甲烷乙酸乙二胺四乙酸缓冲液

TAETris:--(TrisAectate-EDTABuffer)

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