DB51/T 1299-2011 山羊胚胎移植技术操作规程

ICS

B40

备案号：30902-2011DB51

四川省地方标准

DB51/T1299—2011

山羊胚胎移植技术操作规程

WorkRegulationsofGoat’sEmbryoTransfer

2011-06-27发布2011-07-01实施

四川省质量技术监督局发布

DB51/T1299—2011

目次

前言...............................................................................II

1范围..............................................................................1

2术语和定义........................................................................1

3技术操作规程......................................................................1

附录A（资料性附录）胚胎移植技术所需器械、物品、仪器................................6

附录B（资料性附录）推荐药物剂量及生产厂家、溶液配方及配制..........................8

I

DB51/T1299—2011

前言

本标准附录A、附录B为资料性附录。

本标准由四川省畜牧食品局提出并归口。

本标准由四川省质量技术监督局批准发布。

本标准起草单位：西南民族大学四川省畜禽繁育改良总站。

本标准起草人：李键王永字向东徐亚欧傅昌秀。

II

DB51/T1299—2011

山羊胚胎移植技术操作规程

1范围

本规程规定了四川丘区主要山羊品种胚胎移植技术的术语和定义及技术操作规程。

本规程适用于四川主要山羊品种的胚胎生产及舍饲型受体羊的胚胎移植。其他品种山羊可参照执

行。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

2.1

供体Donor

本规程供体指提供胚胎的良种山羊。

2.2

受体Receptor

接受胚胎的本地普通山羊。

3技术操作规程

3.1准备工作

3.1.1工作场地的准备

要有15m2左右的工作室、15m2左右的无菌手术间和6m2～8m2的无菌操作间,保证水和电源，工作

室和无菌间应配备加温设备，使室温保持在22℃～25℃。供体和受体羊应相对集中，便于观察、实施超

数排卵和同期发情。

3.1.2物品准备

见附录A。

3.2供体选择及饲养管理

3.2.1供体选择：必须具备以下条件。

3.2.1.1生产性能优良、无遗传缺陷。

3.2.1.2遗传性能稳定、谱系清楚。

3.2.1.3有健全的传染病、寄生虫病防治措施。

3.2.1.4体质健康、无生殖器官疾病的经产母羊，年龄最好控制在2～4周岁，本繁殖周期内正常产羔。

3.2.1.5处理前应观察到2个以上正常发情周期，或断奶1月～2月，并观察到至少1次自然发情。

3.2.2供体的饲养管理

1

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3.2.2.1保持饲养环境卫生、干燥、温度适宜。

3.2.2.2制定合理的日粮配方，短期优饲，尤其应加强蛋白质营养，并注意青绿饲料、矿物质和维生

素的供应。保持良好的营养状况，体况中上等。

3.2.2.3满足清洁饮水需要。

3.2.2.4舍饲羊应保证适当的运动。

3.2.2.5保持饲养环境相对稳定，避免应激反应。

3.3配种公羊要求

必须达到供体山羊本品种特、一级要求。

3.4受体选择与饲养管理：

3.4.1受体选择：必须具备以下条件。

3.4.1.1体质健康、无生殖器官疾病，有健全的传染病、寄生虫病防治措施。

3.4.1.2经产母羊应为本繁殖周期正常产羔，断奶1个月以上，同期发情处理前观察到1个以上正常

发情周期，体重40kg以上；青年母羊，年龄应达到1周岁以上，体重40kg以上，发情周期正常。

3.4.1.3按照供、受体比例1:12的原则，准备侯选受体，经适应性饲养和观察，最终按照1:10的比

例选定同期发情受体羊。

3.4.2受体羊饲养管理

3.4.2.1受体母羊选定后，畜群的饲养管理应和供体畜群同样对待（见3.2.2.1～3.2.2.5）。

3.4.2.2单独组群饲养，胚胎移植前后避免应激。

3.5超数排卵及胚胎回收

3.5.1供体超数排卵

3.5.1.1季节选择

春秋两季，即在4月～5月和9月～11月。

3.5.1.2超数排卵激素药物

FSH（垂体促卵泡素）

PG（氯前列烯醇）

羊实用型炔诺酮阴道栓

推荐以上药物生产厂见附录Ｂ。

3.5.1.3超数排卵激素剂量

推荐使用剂量见附录Ｂ。

3.5.1.4超数排卵方法

将初选合格的波尔山羊母羊,用孕激素阴道栓进行预处理。预处理6d～9d后开始采用FSH＋PG进行超

数排卵。具体方法：生理盐水溶解FSH,，每天早(7:00～8:00)和晚(19:00～20:00)注射两次，连续4d，

按递减法注射。其中在第2d晚,第3d早同时注射氯前列烯醇（0.1mg/只）,并在第3d早撤除阴道栓。

3.5.1.5供体羊发情鉴定及配种

2

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在供体母羊撤除阴道栓后，每隔8h用试情公羊观察发情情况，发情后每隔8h～12h配种至发情结束

（自然交配或人工授精）。发情配种当天计为0d,在第5d用腹腔镜检查卵巢反应，适宜手术回收胚胎者

在第6d用手术法回收子宫胚胎。

3.5.1.6人工授精操作要求

母羊外阴部必须经过清洗消毒，输精器必须保持无菌，选择合适的输精部位，每次输精有效精子数

不少于７５×106个。

3.5.2胚胎回收与质量鉴定

3.5.2.1用腹腔镜观察卵巢反应及生殖器官状况，对超排有反应的供体进行手术法从子宫角回收胚胎。

3.5.2.2手术前将手术羊空腹24h,用2%普鲁卡因在荐椎与第一尾椎结合处实行尾椎硬膜外腔麻醉（或

用其他有效方法），将羊保定在手术床上,术部剃毛、消毒。

3.5.2.3手术部位在乳房外侧的鼠蹊部，切口8cm,按常规操作切开,牵引出子宫及卵巢,观察卵巢状

况并记录黄体数和卵泡数。经子宫角利用专用胚胎回收针回收胚胎。

胚胎回收液配方和配制说明见附录Ｂ。

3.5.2.4将装胚胎回收液的集卵杯静置2min～5min后，置于体视显微镜下(15～20×)检卵,并用新鲜

的操作液体净化胚胎2次～3次，在60倍下对胚胎进行形态质量分级。

胚胎保存液配方见附录Ｂ。

3.5.2.5依据胚胎质量分级

适宜胚胎移植的胚龄为5.5d～6.5d，正常发育阶段为桑葚胚和囊胚。依据胚胎形态和发育阶段与日

龄是否相符，将胚胎分为A、B、C、D四级，其中前三级为可移胚，D级胚为不可移胚胎。

A级：优质胚胎，胚胎发育阶段与胚龄一致。细胞分裂为大小、颜色、结构一致的均匀球形体，细

胞界限明显，透明带圆而平滑；

B级：胚胎发育阶段与胚龄基本一致。有少数几个细胞分裂球被挤出细胞团，其余大部分分裂球为

大小、颜色、结构一致的均匀球形体，细胞界限明显，透明