DB53/T 1064.2-2021 绿孔雀检疫技术 第2部分：禽流感病毒实验室检测技术规范

ICS11.220

CCSB41

53

云南省地方标准

DB53/T1064.2—2021

绿孔雀检疫技术第2部分：禽流感病毒

实验室检测技术规范

QuarantinetechniqueforPavomuticus

—Part2:Technicalspecificationsforlaboratoryexaminationof

AvianInfluenzaVirus

2021-09-30发布2021-10-14实施

云南省市场监督管理局发布

DB53/T1064.2—2021

目  次

前言.....................................................................................................................................................................III

引言.....................................................................................................................................................................Ⅴ

1范围.................................................................................................................................................................1

2规范性引用文件.............................................................................................................................................1

3术语和定义.....................................................................................................................................................1

4缩略语.............................................................................................................................................................2

5总则.................................................................................................................................................................2

6禽流感病毒毒株的毒力划分和血清亚型....................................................................................................2

7仪器设备和试剂.............................................................................................................................................3

7.1实验室器材..............................................................................................................................................3

7.2试剂..........................................................................................................................................................3

8样品.................................................................................................................................................................3

8.1采样要求与原则......................................................................................................................................3

8.2采样类型和采样方法..............................................................................................................................3

8.3样品储运..................................................................................................................................................4

9试验步骤.........................................................................................................................................................4

9.1样品制备..................................................................................................................................................4

9.2鸡胚接种..................................................................................................................................................4

9.3MDCK细胞培养.....................................................................................................................................4

9.4病毒血凝（HA）试验和血凝抑制（HI）试验...................................................................................5

9.5逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）扩增检测...................................................................................5

9.6H蛋白序列分析......................................................................................................................................7

10试验数据处理...............................................................................................................................................7

10.1HA试验结果判定.................................................................................................................................7

10.2HI试验结果判定...................................................................................................................................7

10.3核酸检测结果判定................................................................................................................................8

附录A（规范性）缓冲溶液和1%鸡红细胞悬液........................................................................................9

附录B（资料性）采样记录表.....................................................................................................................10

I

DB53/T1064.2—2021

前  言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起

草。

本文件是DB53/T1064《绿孔雀检疫技术》的第2部分。DB53/T1064已经发布了以下部分：

——第1部分：禽副黏病毒实验室检测技术规范；

——第2部分：禽流感病毒实验室检测技术规范；

——第3部分：羽虱实验室检测技术规范；

——第4部分：消化道线虫实验室检测技术规范。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由云南省林业与草原局、云南省市场监督管理局共同提出。

本文件由云南省林业标准化技术委员会（YNTC02）归口。

本文件主要起草单位：云南农业大学、云南省标准化研究院。

本文件主要起草人：陈培富、黄艳梅、卓娜、李建春、胡世享、杨俊、钱丽敏、何依蓉、邹丰才、

杨建发。

III

DB53/T1064.2—2021

引言

绿孔雀（Pavomuticus）在我国仅分布于云南，是国家Ⅰ级重点保护野生动物，也是全球濒危物种，

并已列入《濒危野生动植物种国际贸易公约》(CITES)和《世界自然保护联盟濒危物种红色名录》。为

切实贯彻《中华人民共和国野生动物保护法》和《中华人民共和国动物防疫法》，编制并发布DB53/T1064

《绿孔雀检疫技术》地方标准，可让从事绿孔雀保护的相关人员按标准化和规范化程序开展绿孔雀病原

学诊断，从而采取必要的防治措施，以提高染疫绿孔雀的成活率，维护绿孔雀种群健康和地区生态平衡，

提升生物多样性保护成效。

本文件已发布4个部分：

——第1部分：禽副黏病毒实验室检测技术规范。本部分从禽副黏病毒实验室检测技术的总则、仪

器设备和试剂、样品、试验步骤、试验数据处理等方面制定了规范；

——第2部分：禽流感病毒实验室检测技术规范。本部分从禽流感病毒实验室检测技术的总则、禽

流感病毒毒株的毒力划分和血清亚型、仪器设备和试剂、样品、试验步骤、试验数据处理等方

面制定了规范；

——第3部分：羽虱实验室检测技术规范。本部分从羽虱实验室检测的原理、试验条件、仪器设备