GB/T 19539-2004 饲料中赭曲霉毒素A的测定

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中华人民共和国国家标准

GB/T19539-2004

饲料中储曲霉毒素A的测定

DeterminationofochratoxinAinfeeds

2004-06-10发布2004-10-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T19539-2004

月明吕

本标准中的薄层色谱方法和酶联免疫吸附测定方法主要依据GB/T5009.96-2003谷《物和大豆

中赌曲霉毒素A的测定》中薄层色谱方法和卫生部食品卫生监督检验所建立的酶联免疫吸附法。本标

准规定以薄层色谱法为仲裁方法，酶联免疫吸附测定法为快速筛选法。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。

本标准由江苏省微生物研究所负责起草。

本标准主要起草人:毖晓黎、袁建兴、李利东、丁贵平、成恒篙。

GB/T19539-2004

饲料中猪曲霉毒素A的测定

范围

本标准规定了褚曲霉毒素A(OchratoxinA，以下简称OA)的薄层色谱测定方法和酶联免疫吸附测

定方法。

本标准适用于配合饲料、饲用谷物原料中OA的测定。

薄层色谱测定方法的最低检测量为2ng,酶联免疫吸附测定方法的最低检测量为0.05ng.

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/丁6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样方法

薄层色谱法(仲裁法)

3.1原理

试样中的OA经提取、液一液分配萃取、浓缩，然后进行薄层分离，限量定量，或用薄层扫描仪测定荧

光斑点的荧光强度，外标法定量

3.2试荆与材料

所用试剂除另有规定，均使用分析纯试剂.水符合GB/T6682中一级水的规定。

3.2.1石油醚。

3.2.2甲醇溶液(55+45)。

3.2.3三氯甲烷。

3.2.4苯一冰乙酸(99+1),

3.2.540g/L氯化钠溶液。

3.2.6无水硫酸钠:650℃灼烧4h，冷却后贮于干燥器中备用。

3.2.7展开剂(用时选择一种):

a)甲苯一乙酸乙醋一甲酸一水((6十3+1.2+0.06);

b)甲苯一乙酸乙酷一甲酸(6十3十1.4);

c)苯一冰乙酸((9+L).

3.2.8显色剂:碳酸氢钠乙醇溶液(在100ml水中溶解6.0g碳酸氢钠，加20mL乙醇)。

3.2.9薄层板:称取4g硅胶G，加约10ml.0.5%拨甲基纤维素钠水溶液于乳钵中研磨至糊状。立即

倒人涂布器内制成10cmX20cm,厚度0.3mm的薄层板，在空气中干燥后，用甲醇预展薄层板，除去

杂质，吹干，在105℃一110℃活化1h,置于干燥器内保存备用。

3.2.10OA标准储备溶液:

奋告:

1凡接触OA的容器，需漫入4%次抓酸钠(NaOCI)溶液，半夭后清洗备用。

2为了安全，分析人员操作时要带上医用乳胶手套。

称取适量的OA标准品，用苯一冰乙酸((3.2.4)配制成约10pR/mLOA贮备液。贮备液置于4`C冰

GB/T19539-2004

箱中避光保存。

标定贮备液的浓度，用1cm石英比色杯，以苯一冰乙酸((3.2.4)为参比，在OA的最大吸收峰波长

333nm处，测定吸光度值A。储备液中OA的含量(X,)以微克每毫升(pg/mL)表示，按式(1)计算。

AXMX100…，，..·..。一“..…。.…，，(1)

￡XS

式中:

A-测定的吸光度值;

M-OA的摩尔质量(M=403g/mol);

c-OA在苯一冰乙酸中的分子吸收系数(e=555m'/moll;

S一~比色杯的光径长度，单位为厘