GB/T 21786-2025 化学品 细菌回复突变试验方法

ICS13300

CCSA.80

中华人民共和国国家标准

GB/T21786—2025

代替GB/T21786—2008

化学品细菌回复突变试验方法

Chemicals—Testmethodofbacterialreversemutation

2025-08-29发布2025-12-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T21786—2025

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件代替化学品细菌回复突变试验方法与相

GB/T21786—2008《》,GB/T21786—2008

比除结构调整和编辑性改动外主要技术变化如下

,,:

更改了细菌的内容见年版的

a)“”(5.1.1.4,20084.1.1.4);

更改了染毒剂量的内容见年版的

b)“”(5.2.2.1,20084.2.2.1);

更改了对照的内容见年版的

c)“”(5.2.3.3,20084.2.3.3);

更改了试验步骤的内容见年版的

d)“”(5.3.1、5.3.2,20084.3.1.1、4.3.1.2)。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由全国危险化学品管理标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC251)。

本文件起草单位中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所中国疾病预防控制中心环境与健

:、

康相关产品安全所平顶山市慧鑫源生物科技有限公司

、。

本文件主要起草人沈美丽戴宇飞段化伟陈圆圆邓富昌石莹张少平刘帅石东东

:、、、、、、、、。

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为

:

年首次发布为

———2008GB/T21786—2008;

本次为第一次修订

———。

Ⅰ

GB/T21786—2025

引言

细菌回复突变试验是利用营养缺陷型的鼠伤寒沙门氏菌Salmonellatyphimurium和大肠杆菌

()

Escherichiacoli菌株来检测基因突变突变涉及的一个或多个碱基对的置换插入或缺失本

(),DNA、。

试验的原理是检测受试物导致试验菌株因回复突变进而恢复合成必需氨基酸的能力发生回复突变的

。

细菌能在缺乏特定必需氨基酸的条件下生长而亲代菌株则不能生长故可根据菌落形成数量判断受

,,,

试物是否为致突变物

。

基因突变是导致众多遗传性疾病的关键因素且有充分证据表明体细胞癌基因和抑癌基因的突变

,,

与人类和实验动物的肿瘤形成有关细菌回复突变试验具有快速经济和操作相对简便等优点试验

。、。

菌株还具有某些特征使其对突变检测更加敏感例如回复突变位点存在响应性序列细菌对大

,,DNA,

分子物质的通透性增强以及修复系统缺陷或易错修复过程增强试验菌株的特异性可为

,DNADNA。

遗传毒物诱发的突变类型提供有价值的研究信息现已构建了包含多种化学结构物质的细菌回复突变

。

试验结果的数据库可从中获取相关资料同时还为不同理化性质的化学品建立了完善的测试方

,。,

法包括挥发性化合物

,。

细菌回复突变试验采用的是原核细胞其在吸收代谢染色体结构和修复过程等方面与哺

,、、DNA

乳动物细胞存在显著差异本试验属于体外试验可加入外源性代谢活化系统但外源性代谢活化系统

。,,

不能完全模拟体内代谢条件因此本试验结果不能为受试物对哺乳动物的致突变和致癌能力提供直

。,

接证据

。

细菌回复突变试验可用于遗传毒性的初步筛选尤其适用于检测受试物诱发的点突变大量研究

,。

数据表明许多在本试验中呈阳性的化学品在其他试验中也显示出致突变性但也有一些致突变剂在本

,,

试验中未能检出这种局限性可能与检测终点的特殊性质代谢活化的差异或生物利用度的差异有关

。、。

另外提高本试验灵敏度的因素可能会高估受试物的致突变活性

,。

细菌回复突变试验不适用于评估某些类别的化学品例如具有较强杀菌作用的化合物如某些抗生

,(

素和特异性干扰哺乳动物细胞复制系统的化合物如某些拓扑异构酶抑制剂和某些核苷类似物对

)()。

这些受试物哺乳动物细胞致突变试验可能更适用

,。

虽然许多在本试验中呈阳性的化合物都是哺乳动物的致癌物但其相关性并不是绝对的而是与化

,,

学品的类别有关有一些致癌物通过非遗传毒性机制或试验菌株缺乏的机制诱发癌症所以不能在本

。,

试验中检出

。

Ⅱ

GB/T21786—2025

化学品细菌回复突变试验方法

1范围

本文件给出了细菌回复突变试验方法的试验基本原则规定了试验方法试验数据和报告

,、。

本文件适用于检测化学品有杀菌作用的除外的致突变性

()。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件

。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

回复突变试验reversemutationtest

以营养缺陷型的突变体菌株为指示生物进行基因突变检测的体外试验

,。

注常用的菌株有组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌Salmonellatyphimurium和色氨酸营养缺陷型大肠杆菌

:()

Escherichiacoli

()。

4试验基本原则

41细菌悬液分别在加入和不加入外源性代谢活化系统的条件下与受试物混匀在平板掺入法

.,。

中将上述混合物与顶层琼脂充分混匀再迅速倾入底层琼脂平板上在预培养法中先将细菌悬液与

,,。,

受试物混合进行预培养然后与顶层琼脂充分混匀再迅速倾入底层琼脂平板上上述平板培养

,,。2d~3d

后计数回变菌落数并与溶剂对照组的自发回变菌落数进行比较

,,。

42细菌回复突变试验有多种操作方法其中最常用的是平板掺入法预培养法波动法和悬浮培养

.,、、

法此外还有用于检测气体或蒸气的改良方法

。,。

43本文件所描述的主要是平板掺入法和预培养法这两种方法在加入和不加入代谢活化系统的条

.。

件下都能进行有些化学品宜使用预培养法包括短链脂肪族亚硝胺二价金属醛类偶氮染料和重氮

。,、、、

化合物吡咯里西啶生物碱烯丙基化合物以及硝基化合物某些类别的化学品用标准方法例如平板

、、。(

掺入法和预培养法有时不能检出阳性结果对这些特殊样品应采用替代方法进行检测对偶氮染料

)。。

和重氮化合物气体和挥发性化学品以及糖苷类等特殊样品的检测已有文献报道过替代方法对标准

、,。

方法的偏离应有科学依据

。

5试验方法

51试验准备

.

511细菌

..

5111新鲜菌悬液应培养至对数生长期晚期或稳定期早期浓度约为每毫升9个不应使用稳定

...(10),

1