GB/T 23815-2009 猪肉制品中植物成分定性PCR检测方法

ICS67.050

X04

中华人民共和国国家标准

GB/T23815—2009

猪肉制品中植物成分定性PCR检测方法

Protocolofthepolymerasechainreactionfordetectingplantcomponentsinmeat

2009-05-27发布2009-09-01实施

发布

GB/T23815—2009

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本标准的附录A为资料性附录。

本标准由中国标准化研究院提出并归口。

本标准负责起草单位：国家加工食品质量监督检验中心（广州）、广州市质量监督检测研究院、中华

人民共和国深圳出入境检验检疫局。

本标准主要起草人:郭新东、邓鸿铃、覃芳芳、罗海英、袁洁、吴玉銮、谢文缄。

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GB/T23815—2009

猪肉制品中植物成分定性PCR检测方法

1范围

本标准规定了猪肉制品中植物成分的定性PCR检测方法。

本标准适用于由猪肉制成的半成品和成品中植物成分的定性检测。

本标准的检出限为0.5ng植物DNA。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682—2008,ISO3696-1987,MOD)

GB/T19495.1转基因产品检测通用要求和定义

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求

GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法

3术语和定义

GB/T19495.1确立的术语和定义适用于本标准。

4防污染措施

检测过程中防止交叉污染的措施按照GB/T19495.2中的规定执行。

5抽样和制样

按照GB/T19495.7规定的方法执行。

6测定方法

6.1原理

样品经过提取DNA后，针对植物特异基因的序列设计引物，通过PCR技术，特异性扩增植物基因

的DNA片段，根据PCR扩增结果，判断该样品中是否含有植物成分。

6.2试剂和材料

除另有规定外，所用试剂为分析纯或生化试剂，水为按照GB/T6682规定的一级水。

6.2.1引物：检测猪肉制品内源和外源基因的引物及其信息见表1。

表1猪肉制品内、外源基因所需的引物信息

PCR产物大小/

检测基因引物序列基因性质适用范围

1>P

正:5'-CGAAATCGGTAGACGCTACG3'

tRNALeu193植物叶绿体猪肉制品

反:5儿TTCCATTGAGTCTCTGCACCT-3'

5-AAGTTAGAGATCGGGAGCCTAA-3'

mitochondrion264猪内源线粒体基因猪肉制品

5AAGGTGACAATAGGTAGTCC-3，

1

GB/T23815—2009

6.2.2琼脂糖：电泳纯。

6.2.3Tris饱和酚。

6.2.4三氯甲烷。

6.2.5冰乙酸。

6.2.6无水乙醇。

6.2.7异戊醇。

6.2.8异丙醇。

6.2.9氢氧化钠(Na()H)0

6.2.10盐酸(HC1)。

6.2.11三径甲基氨基甲烷(Tris)。

6.2.12乙二胺四乙酸钠盐(Na2EDTA)