GB/T 47329-2026 胶原蛋白酶活性及纯度检测方法

ICS07080

CCSC.27

中华人民共和国国家标准

GB/T47329—2026

胶原蛋白酶活性及纯度检测方法

Assaymethodofcollagenaseactivityandpurity

2026-03-31发布2026-07-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T47329—2026

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

原理

4………………………1

试剂和材料

5………………2

实验步骤

6…………………2

质量控制

7…………………5

Ⅰ

GB/T47329—2026

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由全国工具酶标准化工作组提出并归口

(SAC/SWG11)。

本文件起草单位深极美泰山东生物科技有限公司华灿厦门生物医药有限公司安徽盛美诺

:()、()、

生物技术有限公司惠州安博臣科技有限公司深圳杉海创新技术有限公司广东丸美生物技术股份有

、、、

限公司深圳市红瑞生物科技有限公司夏禾广州光电生物科技有限公司纽斯葆广赛广东生物科

、、()、()

技股份有限公司武汉新华扬生物股份有限公司华慧海洋多糖生物技术深圳有限公司武汉宏韧生

、、()、

物医药股份有限公司北京健平金星生物医药有限公司河南赛诺特生物技术有限公司海南华研胶原

、、、

科技股份有限公司江苏创健医疗科技股份有限公司深圳粒影生物科技有限公司杭州纽龙生物科技

、、、

有限公司杭州纽龙日尚生物制品有限公司福建赛福安全技术服务有限公司山东大学夏禾杭州生

、、、、()

物技术有限公司福建南生科技有限公司夏禾深圳生物技术有限公司北京索莱宝科技有限公司

、、()、、

南生厦门分析检测有限公司大田华灿生物科技有限公司复旦大学苏州大学福建农林大学上海

()、、、、、

交通大学浙江工商大学厦门大学

、、。

本文件主要起草人陈秀兰王琰黄发灿刘晶琦巫伟真张嘉恒冷军江运秋徐丽孙云起

:、、、、、、、、、、

赖利先张杨邹检平李三华赵子方翟源心葛建敬钱永常来灿钢黄秀娟张伟潘威王振元

、、、、、、、、、、、、、

徐菲王永明李长得郑登忠郭延巍赵超钟江朱力冯雁姚鹃邢志刚杨忠华傅玲琳刘斌

、、、、、、、、、、、、、、

郑恬烨黄恩铭丁重辉张永有李超

、、、、。

Ⅲ

GB/T47329—2026

引言

胶原蛋白酶是指在生理条件下能水解胶原蛋白三螺旋区域肽键的蛋白

(collagenase,EC3.4.24.3)

酶包括动物源胶原蛋白酶和微生物源胶原蛋白酶微生物源胶原蛋白酶来源于梭菌和弧菌属家

,。,M9

族的金属蛋白酶其结构催化机制和底物特异性类似微生物源胶原蛋白酶已被广泛应用于生命科学

,、。

研究中如动物组织细胞解离胶原蛋白降解临床伤口清创疤痕消除及食品工业胶原蛋白肽制备等

,、、、。

制定胶原蛋白酶活性及纯度检测方法的国家标准用以促进生产和使用对推动该类工具酶的产业化具

,,

有重要意义

。

Ⅳ

GB/T47329—2026

胶原蛋白酶活性及纯度检测方法

1范围

本文件描述了微生物来源胶原蛋白酶活性及纯度的检测方法

。

本文件适用于微生物来源胶原蛋白酶活性及纯度的检测

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

胶原蛋白酶collagenase

在生理条件下水解胶原蛋白三螺旋区域肽键的蛋白酶

(37℃,pH7.0)。

32

.

胶原蛋白酶活性单位activityunitofcollagenase

以N呋喃基丙烯酰基亮氨酸甘氨酸脯氨酸丙氨酸为底物在

-[3-(2-)]----(FALGPA),pH7.5、

以及钙离子存在的条件下胶原蛋白酶每分钟降解底物的酶量为一个活性

25℃10mmol/L,1μmol

单位

。

4原理

41酶活性检测原理

.

是一种类似于胶原蛋白一级结构的合成多肽所有家族胶原蛋白酶能特异性水解

FALGPA。M9

序列中的亮氨酸和甘氨酸之间的肽键引起该底物在处的吸光值下降因

FALGPA,345nm(OD345)。

此通过检测单位时间内反应体系的的降低值即可根据标准曲线计算出胶原蛋白酶每分钟降解

,OD345,

该底物的摩尔数

。

42酶纯度检测原理

.

凝胶过滤层析法是根据蛋白质分子大小不同分离蛋白混合物的有效方法由于凝胶过滤层析过程

。

中不同大小的蛋白质在层析柱中的出峰位置不同因此可通过积分峰面积确定目的蛋白的占比

,。

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