DB42/T 2252-2024 牛无绿藻PCR-RFLP检测技术

ICS65.020.30

CCSB41

DB42

湖北省地方标准

DB42/T2252—2024

牛无绿藻PCR-RFLP检测技术

PCR-RFLPdetectiontechniqueforProtothecabovis

2024-07-29发布2024-09-29实施

湖北省市场监督管理局发布

DB42/T2252—2024

目次

前言................................................................................III

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4缩略语.............................................................................1

5实验原理...........................................................................2

6仪器设备...........................................................................2

7试剂和材料.........................................................................2

8样品的制备.........................................................................3

9检测步骤...........................................................................4

10结果判定..........................................................................5

11实验室生物安全要求................................................................6

12标准实施及评价....................................................................6

附录A（资料性）湖北省地方标准实施信息及意见反馈表...................................8

I

DB42/T2252—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由武汉市农业科学院提出。

本文件由湖北省农业农村厅归口。

本文件起草单位：武汉市农业科学院、华中农业大学。

本文件主要起草人：陈夏冰、陈洁、胡长敏、丁一、邵志勇、吴利军、丁明星、万平民、何斌、金

尔光、杨文海、童伟文、王肆玖、周源。

本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅，电话：027-87665821，邮箱：hbsnab@126.com；

或者牵头起草单位武汉市农业科学院，联系电话：027-81776359，邮箱：chenxiabing@。

对本文件的有关修改意见建议请反馈至武汉市农业科学院，联系电话：027-81776359，邮箱：

chenxiabing@。

III

DB42/T2252—2024

牛无绿藻PCR-RFLP检测技术

1范围

本文件规定了牛无绿藻PCR-RFLP检测技术所涉及的实验原理、仪器设备、试剂和材料、样品的制备、

检测步骤、结果判定等技术标准。

本文件适用于生鲜乳中牛无绿藻的定性检测、实验室诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

SN/T3902检验检疫二级生物安全实验室通用要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

牛无绿藻Protothecabovis

一种真核生物，绿藻纲，绿藻门，共球藻纲，小球藻目，小球藻科，无绿藻属，能够引起奶牛乳腺

炎。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

P.bovis：牛无绿藻（Protothecabovis）

DNA：脱氧核糖核酸（DeoxyriboNucleicAcid）

PIM：无绿藻分离培养基（ProtothecaIsolationMedium）

TSB：胰蛋白胨大豆肉汤培养基（TryptoneSoybeanBrothMedium）

PCR：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）

PCR-RFLP：限制性片段长度多态性聚合酶链反应（RestrictionFragmentLengthPolymorphism

PCR）

PBS：磷酸盐缓冲液（PhosphateBufferSaline）

TAE：三乙醇胺四乙酸缓冲液（Tris-acatate-ethyleneDiamineTetraaceticAcidBuffer）