T/NXSLX 0904-2024 黄芩茎叶中黄芩苷含量测定标准

范围:本文件规定了宁夏地区黄芩茎叶中黄芩苷测定术语、定义、原理、试剂、材料、仪器、设备、样本采集与制备、测定步骤、结果计算等。 本文件适用于宁夏地区黄芩茎叶中黄芩苷含量测定。检出限为7.8125～250μg/ mL; 主要技术内容:高效液相色谱法以经典的液相色谱为基础，以液体为流动相，将不同极性的溶剂泵入装有颗粒极细的高效固定相色谱柱中，在色谱柱中被分离并进入检测器进行检测，从而实现对样本的快速、高灵敏的检测。通过此方法对黄芩茎叶中黄芩苷进行检测和确证。7测定步骤7.1试样的制备取黄芩茎叶样品于多功能粉碎机粉碎，过20目筛网备用。7.2液相溶液的制备7.2.1 标准品溶液制备精密称取黄芩苷5 mg，置于10 mL容量瓶，甲醇定容至刻度，即得0.5 mg/mL黄芩苷标准品溶液。7.2.2 试样品溶液制备精密称取过筛黄芩茎叶粉0.3 g， 70%乙醇40 mL置于150 mL圆底烧瓶60℃加热回流3 h，待冷却后，滤液置100 mL量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，最终70％乙醇至刻度，摇匀。吸取1 mL, 甲醇定容至10 mL容量瓶中，0.22 um滤膜过滤，即得试样品溶液。7.3 试样的测定吸取供试品溶液20μL ，在流动相为甲醇：0.2%磷酸水（47：53），柱温30℃，波长280 nm，流速1mL/min条件下进样，重复测定3次。7.4 标曲建立取0.5 mg/mL准品溶液适量，分别配制浓度为250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 μg/mL的黄芩苷标准溶液，吸取标准品溶液20μL，流动相为甲醇-0.2%磷酸水（47：53），柱温30℃，波长280 nm，流速1mL/min条件下进样，以峰面积对应的质量浓度建立黄芩苷标准曲线。8  结果计算以峰面积值(Y)为纵坐标, 对照品进样量(X)为横坐标绘制标准曲线,，黄芩苷回归方程为：Y=35031.8013X-11.628521，r2=0.99985，测得黄芩茎叶提取物中黄芩苷含量占比为2.27%