YC/T 383-2010 烟草及烟草制品 烟碱、降烟碱、新烟碱、麦斯明和假木贼碱的测定 气相色谱-质谱联用法

ICS65.160

X87

备案号:—

304402011

中华人民共和国烟草行业标准

/—

YCT3832010

、、、

烟草及烟草制品烟碱降烟碱新烟碱

麦斯明和假木贼碱的测定

ㅤㅤㅤㅤ

气相色谱质谱联用法

-

—,,

TobaccoandtobaccoroductsDeterminationofnicotinenornicotine

p

,—

anatabinemosmineandanabasineGC-MSDmethod

y

2010-12-27发布2011-01-15实施

国家烟草专卖局发布

/—

YCT3832010

、、、

烟草及烟草制品烟碱降烟碱新烟碱

麦斯明和假木贼碱的测定

气相色谱质谱联用法

-

1范围

,[()、()、

本标准规定了烟草及烟草制品中种生物碱包括烟碱降烟碱麦斯明

5NicotineNornicotine

()、()、()]。

假木贼碱新烟碱的气相色谱质谱联用测定方法

MosmineAnabasineAnatabine-

y

(、、、、)。

本标准适用于烟草及烟草制品中种生物碱烟碱降烟碱麦斯明假木贼碱新烟碱的测定

5

、、、、/、

本方法测定烟草及烟草制品中烟碱降烟碱麦斯明假木贼碱新烟碱的定量限分别为46.8μgg

/、/、/、/,/、/、/、/、

7.6μgg0.5μgg5.1μgg7.9μgg检出限分别为14.1μgg2.3μgg0.2μgg1.5μgg

2.4/。

μgg

2规范性引用文件

。,

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅所注日期的版本适用于本

。,()。

文件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

/(ㅤㅤㅤㅤ):

GBT6379.2测量方法与结果的准确度正确度与精密度第部分确定标准测量方法重复

2

性与再现性的基本方法

/分析实验室用水规格和试验方法

GBT6682

/烟草及烟草制品试样的制备和水分制定烘箱法

YCT31

3原理

,,

在碱性溶液条件下采用三乙胺三氯甲烷溶液萃取试样中的生物碱使用气相色谱质谱联

0.01%--

,,。

用选择离子监测法进行测定采用内标法进行定量

4试剂与材料

,,/。

除特别要求以外均应使用分析纯级试剂水应符合GBT6682中一级水的规定

,()。

4.1三氯甲烷色谱纯或分析纯经重蒸

(,),,。

4.2氢氧化钠溶液5%质量分数称量5g氢氧化钠用95g蒸馏水溶解

,。

4.3无水硫酸钠使用前应在550℃条件下干燥至少5h

,。

4.4三乙胺纯度应不低于98%

,。

4.52-甲基喹啉纯度应不低于98%

,’,。

二联吡啶纯度应不低于

4.624-98%

,。

4.7烟碱纯度应不低于99%

,。

4.8降烟碱纯度应不低于98%

,。

4.9麦斯明纯度应不低于98%

1

/—

YCT3832010

,。

4.10假木贼碱纯度应不低于98%

,。

4.11新烟碱纯度应不低于98%

三乙胺三氯甲烷溶液

4.120.01%-

(),,()

加入三氯甲烷于量筒中定容至刻度然后准确加入三乙胺于该量筒

4.11000mL100L4.4

μ

,。

中超声振荡混合均匀

4.13内标溶液

4.13.1内标储备液的配制

(),,’(),,

分别准确称取甲基喹啉二联吡啶精确至置于

450m2-4.525m24-4.60.1m250mL

ggg

,()。

棕色容量瓶中加入三乙胺三氯甲烷溶液稀释定容至刻度该储备液在条件下

0.01%-4.12-20℃

,。

避光保存有效期为个月

6

4.13.2一级内标溶液的配制

(),

准确移取内标储备液于棕色容量瓶中加入三乙胺三氯甲烷溶液

50mL4.13.1500mL0.01%-

()。,。

定容至刻度该溶液在条件下避光保存有效期为个月

4.12-20℃6

4.14生物碱标准溶液

4.14.1生物碱储备液的配制

4.1烟碱储备液

4.1.1

(),,,

准确称取烟碱精确至置于棕色容量瓶中用三乙胺三氯

400mg4.70.1mg100mL0.01%-

甲烷溶液()稀释定容至刻度。

4.12

4.14.1.2降烟碱储备液

(),,,

准确称取降烟碱精确至置于棕色容量瓶中用三乙胺三氯

15mg4.80.1mg100mL0.01%-

甲烷溶液()稀释定容至刻度。

4.12

4.14.1.3麦斯明储备液ㅤㅤㅤㅤ

(),,,

准确称取麦斯明精确至置于棕色容量瓶中用三乙胺三氯

10mg4.90.1mg100mL0.01%-

甲烷溶液()稀释定容至刻度。

4.12

、

4.14.1.4麦斯明假木贼碱和新烟碱混标储备液

()、(),,

准确称取15mg假木贼碱4.1010mg新烟碱4.11精确至0.1mg置于100mL棕色容量瓶

,(),,

中加入约三乙胺三氯甲烷溶液待标样完全溶解后再准确加入麦斯明

20mL0.01%-4.124.0mL

(),()。

储备液4.14.1.3用0三乙胺三氯甲烷溶液稀释定容至刻度

.01%-4.12

4.14.2生物碱标准溶液的配制

4.14.2.1烟碱工作标准溶液

分别移取、、、、的烟碱储备液()于不同的棕色容量

400L1mL2mL4mL10mL4.14.1.150mL

μ

,(),(),

瓶中再准确加入内标储备液用三乙胺三氯甲烷溶液稀释定容至刻度

5mL4.13.10.01%-4.12

得到五个不同浓度的烟碱系列标准溶液。

4.14.2.2降烟碱工作标准溶液

分别移取、、、、、降烟碱储备液()于不同的棕

400L1mL2mL4mL10mL20mL4.14.1.250mL

μ

,(),()

色容量瓶中再准确加入内标储备液用三乙胺三氯甲烷溶液稀释定容

5mL4.13.10.01%-4.12

,。

至刻度得到六个不同浓度的降烟碱系列标准溶液

、

4.14.2.3麦斯明假木贼碱和新烟碱的混和标样工作标准溶液

、、、、、、

分别移取400L1mL2mL4mL10mL20mL的麦斯明假木贼碱和新烟碱混标储备液

μ

(),(),

4.14.1.4于不同的50mL棕色容量瓶中再准确加入5mL内标储备液4.13.1用0.01%三乙胺-

(),、

三氯甲烷溶液4.12稀释定容至刻度得到六个不同浓度的麦斯明假木贼碱和新烟碱的混和标样系列

标准溶液。

4.14.3生物碱标准溶液的存放

,。

生物碱标准溶液在条件下避光保存有效期为个月

-20℃6

2

/—

YCT3832010

5仪器设备

常用试验仪器以及下述各项。

,。

5.1分析天平感量0.1mg

气相色谱质谱联用仪。

5.2-

5.3超声波发生器。

5.4离心机。

离心试管,。

5.550mL

一次性使用无菌注射器,。

5.65mL

6分析步骤

6.1试样制备

按/进行试样的制备并测定水分含量。

YCT31

6.2测定次数

每个样品应平行测定两次。

6.3样品处理

ㅤㅤㅤㅤ

,,,

称取0.3g试样精确至0.0001g置于50mL三角锥形瓶内加入2mL5%的氢氧化钠溶液

(),,,。(),

4.2于锥形瓶中轻摇锥形瓶湿润试样静置15min加入20mL一级内标溶液4.13.2加盖密封

(),,(),

后置于超声波发生器内5.3室温下超声萃取15min然后将萃取液全部转移到离心试管5.5中在

()/,。()

离心机5.4上以5000rmin转速离心5min使试样和萃取剂分离称取4g无水硫酸钠4.3加到

(),,,

一次性使用无菌注射器5.6中轻轻敲打注射器外壁使无水硫酸钠装实然后取2mL下层溶液加入

,。

到注射器中收集过滤液于2mL色谱分析瓶中待进样分析

:,,。

注超声波发生器工作频率为40kHz如最大功率为700W采用其超声功率的40%即可达到萃取完全

气相色谱质谱联用仪条件

6.4-

。,

按制造商操作手册运行气相色谱质谱联用仪以下分析条件可供参考采用其他条件应验证其适

-

用性。

:,,()

色谱柱推荐使用熔融石英毛细管柱固定相为苯基甲基聚硅

30m×0.25mm×0.25m35%--

μ

氧烷。

:;;/,;

采用程序升温方式初始温度初始时间以速率升至保持

100℃3min8℃min260℃10min

总运行时间33min。

:;/:。

载气氦气载气流速1.0mLmin进样口温度250℃

烟碱与其他生物碱的检测分两次进样来完成。

:,,。

烟碱的检测进样量1L分流进样分流比40∶1

μ

、、:,,。

降烟碱麦斯明假木贼碱和新烟碱的检测进样量2L分流进样分流比10∶1

μ

:;:;:;:;:;

检测器质谱检测器溶剂延迟8min电离电压70ev离子源温度230℃传输线温度280℃

:(),。

质谱扫描方式选择离子监测SIM各化合物定量及定性离子参见附录A

典型烟草样品的气相色谱质谱图参见附录。

-B

3

/—

YCT3832010

6.5标准曲线的制作

、、、

采用气相色谱质谱联用仪测定烟碱降烟碱麦斯明假木贼碱和新烟碱的标准系列溶液

-

(),,

得到种化合物和内标的积分峰面积分别用种化合物的积分面积与内标峰面积的比值作

4.14.255

2

,,,

为纵坐标各化合物的浓度与内标浓度比值作为横坐标建立种化合物的标准曲线应不小于

5R

。,;,’

烟碱的定量采用甲基喹啉作为内标标准曲线可不过原点其他生物碱的定量采用二联

0.992-24-

,。

吡啶作为内标标准曲线强制过原点

6.6样品分析

()(),

按气相色谱质谱联用仪条件测定样品样品中烟碱与其他生物碱的检测分两次进样来

-6.46.3

完成。

7结果的计算与表述

,()。

用每克试样中含有的生物碱的质量数来表示以干基计的试样中生物碱含量按式进行计算

X1

cV100

××

…………()

X=1

()

m100w

×-

式中:

———,(/),

X每克试样的生物碱含量烟碱的单位为毫克每克mgg其他生物碱的单位为微克每克

(/);

μgg

———,(/),

三乙胺三氯甲烷萃取液中生物碱的浓度烟碱的单位为毫克每毫升其他生物碱

c-mmL

g

的单位为微克每毫升(/);ㅤㅤㅤㅤ

μgmL

———,();

V萃取液的体积单位为毫升mL

———,();

m试样质量单位为克g

———,()。

w试样的水分含量%质量分数

,/,/。

结果以两次平行测定结果的平均值表示烟碱精确至0.1mgg其他生物碱精确至1μgg

8回收率

本方法的回收率试验研究结果参见附录中的表。

CC.1

9重复性和再现性

,,

由家实验室对个样品进行了分析方法的共同试验采用本方法测定生物碱含量时得到了下述

78

重复性值r和再现性值R。按/执行本标准方法的重现性标准差和再现性标准差的测定。

GBT6379.2

数据分析结果参见附录中的表。

CC.2

10检验报告

(//),

检验报告应说明采用的方法和生物碱的测试结果m或还应该包括本标准未规定的或

gggg

μ

,。

选择性的条件以及可能对结果产生影响的其他条件

4

/—

YCT3832010

附录

A

()

资料性附录

质谱检测器检测生物碱的保留时间及定量定性离子

质谱检测器检测生物碱的保留时间及定量定性离子见表A.1。

表A.1质谱检测器检测生物碱的保留时间及定量定性离子

保留时间定量离子定性离子

序号化合物名称

//

minmzmz

12-甲基喹啉10.48143128

2烟碱10.6684133

3降烟碱12.59119147

4麦斯明12.90146118

5假木贼碱13.4884105

6新烟碱14.3216054

,’二联吡啶

724-14.90156129

ㅤㅤㅤㅤ

5

/—

YCT3832010

附录

B

()

资料性附录

色谱图示例

,。

按本标准规定的方法对样品进行分析得到的气相色谱质谱图见图和图

-B.1B.2

说明:

———甲基喹啉();

12-IS

2———烟碱。

ㅤㅤㅤㅤ

图典型烟草样品烟碱的气相色谱质谱图

B.1-

说明:

———降烟碱;

1

2———麦斯明;

3———假木贼碱;

4———新烟碱;

———,’二联吡啶()。

524-IS

图典型烟草样品种生物碱的气相色谱质谱图

B.24-

6

/—

YCT3832010

附录

C

()

资料性附录

、

回收率重复性和再现性研究结果

,。

本方法的回收率试验研究结果见表C.1本方法的重复性和再现性试验研究结果见表C.2

表C.1本方法的回收率试验研究结果以表示

%

生物碱烟碱降烟碱麦斯明假木贼碱新烟碱

低浓度106.190.288.891.887.2

中浓度104.393.996.597.191.0

高浓度100.6101.699.5101.895.2

平均回收率103.695.294.996.991.1

表C.2本方法的重复性和再现性试验研究结果单位为微克每克

烤烟烤烟白肋烟白肋烟香料烟香料烟烤烟型混合型

生物碱指标

1#2#1#2#1#2#卷烟烟丝卷烟烟丝

平均值23.115.864.151.55.516.421.520.1

重复性标准差S0.70.51.5ㅤㅤㅤㅤ1.60.20.40.90.8

r

烟碱重复性值r2.01.44.24.50.61.12.52.3

再现性标准差S1.10.62.22.30.40.91.10.9

R

再现性值R3.11.76.26.51.12.53.12.5

平均值32671333

重复性标准差S583515913653662615108792070

r

降烟碱重复性值r332118013114183055

再现性标准差S9361509370395186156

R

再现性值R4738583380242948217

平均值134108164810756782137615

重复性准差S9917815110191748

r

麦斯明重复性值r117101113

再现性标准差S1219281337

R

再现性值R1119151224

平均值43544346411

重复性标准差S102863342651841131139

r

假木

重复性值r5311111276

贼碱

再现性标准差S1393231341816

R

再现性值R77272024139

/—0

YCT38320101

0

—

2