DB13/T 5110-2019 植物组织培养室组建 及操作技术规程

ICS65.020.40

B61

DB13

河北省地方标准

DB13/T5110—2019

植物组织培养室组建及操作技术规程

2019-11-28发布2019-12-28实施

河北省市场监督管理局发布

DB13/T5110—2019

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由河北农业大学提出。

本标准起草单位：河北农业大学。

本标准主要起草人：师校欣、杜国强、高仪、王莉、杨丽丽、王燕霞、刘婉君、李宝鑫。

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DB13/T5110—2019

植物组织培养室组建及操作技术规程

1范围

本标准规定了植物组织培养室组建及操作技术的选址、设施设备与试剂，室内环境，培养基制备，

基本操作，消毒灭菌与日常管理等要求。

本标准适用于植物组织培养研究实验室及组培快繁育苗工厂组建及常规操作。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB28232臭氧发生器安全与卫生标准

LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程

DB13/T2596苹果组培苗繁育技术规程

3选址、设施设备与试剂

3.1选址及组成

植物组织培养室（或组培工厂）选址应环境清洁，远离微粒和烟雾等污染源，水电供应充足，交

通运输便利。

植物组织培养室（或组培工厂）应包括培养基制备室、洗涤室、灭菌室、接种室、培养室、储藏

室、研究室以及温室或大棚等8部分。其空间大小和装备程度可根据培养目的、规模、工作人数、经费

和资源状况确定。应配置合理，工作方便，使用安全，节省能源。各部分比例大小和设备规模可参考

附录A。

3.2设施设备

3.2.1培养基制备室

应有适宜的空间和配套的工作台，便于多人同时操作。配备冰箱、电子分析天平、电子秤、酸度

计、磁力搅拌器、净水器或蒸馏水器、电磁炉、培养基灌装机等仪器设备；配置不锈钢锅、培养瓶（三

角瓶、试管、罐头瓶、耐高温塑料组培专用瓶）、培养皿、透明及棕色试剂瓶、烧杯、容量瓶、量筒、

移液管、移液管架、微量移液器、玻璃棒、记号笔、封口材料（棉塞、牛皮纸、组培专用透气封口膜

或组培专用透气瓶盖）、棉线绳、pH试纸、周转筐、蒸馏水桶、小推车等用品和用具；配备器械柜、

药品柜、危险品柜，分别存放接种工具和分类存放化学试剂。

3.2.2洗涤室

应地面和水槽处的墙面防水耐湿、平整光滑易清洁。配置大型水槽、工作台、超声波仪、烘箱、

塑料盆、塑料周转筐、毛刷、洗衣粉和洗洁精等。

3.2.3灭菌室

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应配备合理专用输电线路，施工规范；配置空调、换气扇等通风设备；高压蒸汽灭菌器、干热消

毒柜或恒温干燥箱（烘箱）、周转筐及小推车等设备或工具。

工作规模较小、空间紧张时，洗涤室可与灭菌室合并。

3.2.4接种室

接种室外侧设置缓冲间，或将一个房间隔断成两部分，外部小空间作缓冲间，内部大空间做接种

室。外界与缓冲间的门、缓冲间与接种室的门应错开，建议采用滑动门。缓冲间配备紫外线杀菌灯、

洗手池、鞋架、衣帽钩、工作服、工作帽、口罩等，用于无菌操作前洗手、更衣、换鞋。有条件的单

位可在接种室门口设置风淋室。接种室要求门窗密封防尘性能好，地面和墙壁平整光滑，便于清洁和

消毒。配套的电源插座布局合理。配置紫外线杀菌灯、臭氧发生器、超净工作台、空调、接种器具灭

菌器、广口瓶（盛放70%乙醇，用于浸泡接种工具）、酒精灯、打火机、接种工具（枪状镊、手术刀、

手术剪等）、小推车、解剖镜、纱布、手持喷雾器等。

3.2.5培养室

培养室门窗、地面和墙面的要求同3.2.4接种室，另外要求保温性能好。配备光照培养架、光照

培养箱、暗培养橱、震荡培养器（摇床）、光照控制系统、空调、暖气、除湿机、空气消毒器、紫外

线杀菌灯、臭氧发生器、温湿度记录仪等。光照培养架设5～6层，最低层距地面20cm，层间距30cm

左右，架长依40W日光灯管的长度决定，一般130cm，架宽60cm左右，每层架面安装2～3支日光灯或

组培专用LED特定光谱灯，用自动定时器控制光照周期。

培养材料固体培养时摆放在培养架上，也可置于光照培养箱中方便设定不同的培养条件。需要黑

暗培养的材料，放置在暗培养橱中培养。培养材料液体培养时，用震荡培养器。

3.2.6储藏室

应干燥、通风、防火。配置橱柜、储物架，便于物品存放整齐有序。

3.2.7观察室

配置计算机及软件、图像拍摄设备等。

3.2.8驯化移栽场地

选用有防虫网或防虫设施的温室或大棚，用于组培材料的瓶外扦插生根和已生根试管苗的驯化移

栽。

棚室配置苗床、弥雾增湿装置、遮阳网、塑料薄膜、小拱棚架；营养钵或穴盘等移栽容器；营养

土、草炭、蛭石等移栽基质；多菌灵等杀菌药剂。

3.3试剂

3.3.1消毒灭菌剂

乙醇、次氯酸钠、84消毒液、氯化汞、新洁尔灭、抗生素、甲醛、高锰酸钾等。

3.3.2无机盐和有机营养成分

不同植物种类组织培养时适宜的基本培养基种类及配方不同，常用的基本培养基配方中无机盐和

有机营养成分见附录B。糖类多用蔗糖，为降低成本可用食用白砂糖代替。其它还有葡萄糖、果糖、麦

芽糖、山梨醇、半乳糖、乳糖、甘露糖等。

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3.3.3植物生长调节物质

细胞分裂素：6-苄基腺嘌呤（6-BA）、激动素（KT）、玉米素（ZT）、2-异戊烯腺嘌呤（2ip）、

苯基噻二唑基脲（TDZ）等。

生长素：吲哚丁酸（IBA）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）

等。

赤霉素：GA3等。

生长延缓剂：矮壮素（CCC）、丁酰肼（B9）、多效唑（PP333）等。

3.3.4固化剂

常用琼脂，其它还可