DB22/T 1848-2013 人参及其制品中嘧菌酯等11种农药残留量的检测方法

ICS67.060

X11

备案号：38348-2013DB22

吉林省地方标准

DB22/T1848—2013

人参及其制品中嘧菌酯等11种农药残留量

的检测方法

TheMethodofDeterminingAzoxystrobinand11othersPesticideResiduesin

GinsengsanditsProductions

2013-07-22发布2013-09-01实施

吉林省质量技术监督局发布

DB22/T1848—2013

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。

本标准由吉林省农业委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国吉林出入境检验检疫局技术中心、中华人民共和国通化出入境检

验检疫局。

本标准主要起草人：王明泰、牟峻、李爱军、赵庆松、牛茜、史晓丽、赵巍巍、胡婷婷。

I

DB22/T1848—2013

人参及其制品中嘧菌酯等11种农药残留量检测方法

1范围

本标准规定了人参及其制品中嘧菌酯、嘧菌环胺、氟硅唑、苯醚甲环唑、氟菌唑、醚菌酯、烯酰吗

啉、甲霜灵、嘧霉胺、咯菌腈和噁霉灵残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。

本标准规定了人参及其制品中嘧菌环胺、氟硅唑、氟菌唑、烯酰吗啉、甲霜灵、咯菌腈残留量的高

效液相色谱测定方法。

本标准适用于鲜人参、生晒参、红参、活性参、人参蜜片、人参丁香茶、人参提取物中嘧菌酯、嘧

菌环胺、氟硅唑、苯醚甲环唑、氟菌唑、醚菌酯、烯酰吗啉、甲霜灵、嘧霉胺、咯菌腈和噁霉灵残留量

的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法。

第一法液相色谱-质谱/质谱法

3原理

液相色谱-质谱/质谱法：试样（除噁霉灵外）用丙酮提取，高速离心机离心，经复合固相萃取小柱

净化，供液相色谱-质谱/质谱仪测定和确证，外标法定量。噁霉灵用乙腈提取、高速离心机离心，经C18

固相萃取小柱净化，供液相色谱-质谱/质谱仪测定和确证，外标法定量。

4试剂与材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1乙腈（CH3CN）：残留级。

4.2正己烷（CH3(CH2)4CH3）：残留级。

4.3乙酸乙酯（C4H8O2）：残留级。

4.4甲苯（C7H8）：色谱纯。

4.5丙酮（C3H6O）：色谱纯。

4.6甲酸（HCOOH）：色谱纯。

4.7乙酸乙酯-正己烷（1+1）：量取50mL乙酸乙酯和50mL正己烷，混匀。

4.8乙腈-甲苯（3+1）：量取150mL乙腈和50mL甲苯，混匀。

4.9农药标准品：嘧菌环胺（Cyprodinil，CASNO.121552-61-2）（CAS号108-78-1，纯度大于等于

98.0%）、氟硅唑（Flusilazole，CASNO.85509-19-9，纯度大于等于98.0%）、苯醚甲环唑

1

DB22/T1848—2013

（difenoconazole，CASNO.119446-68-3，纯度大于等于98.0%）、嘧菌酯（Azoxystrobin，CASNO.

131860-33-8，纯度大于等于98.0%）、氟菌唑（Triflumizole，CASNO.68694-11-1，纯度大于等于98.0%）、

醚菌酯（propiconazole，CASNO.60207-90-1，纯度大于等于98.0%）、烯酰吗啉（Dimethomorph，CAS

NO.110488-70-5，纯度大于等于98.0%）、甲霜灵（metalaxyl，CASNO.57837-19-1，纯度大于等于

98.0%）、嘧霉胺（Pyrimethanil，CASNO.53112-28-0，纯度大于等于98.0%）、咯菌腈（Fludioxonil，

CASNO.53112-28-0，纯度大于等于98.0%）噁霉灵（hymexazol，CASNO.10004-44-1，纯度大于等

于98.0%）。参见附录A。

4.10标准溶液

4.10.1标准储备液：分别准确称取上述11种农药标准品10mg(精确至0.1mg)，分别置于100.0mL

容量瓶中，用丙酮溶解，并定容配制成浓度100μg/mL的标准储备液。该溶液分别储备于棕色容量瓶

中，在0～4℃保存12个月，咯菌腈0～4℃保存6个月。

4.10.2标准混合工作溶液：用移液管准确移取标准贮备溶液，根据需要用乙腈稀释、定容，配制工作

标准溶液，现用现配。

4.10.3噁霉灵标准工作溶液：用移液管准确移取标准贮备溶液，根据需要用空白人参提取液稀释、定

容，配制工作标准溶液，现用现配。

5仪器设备

5.1液相色谱-质谱/质谱仪：API4000色谱，质谱联用仪，配有电喷雾离子源（ESI）。

5.2涡旋混合器。

5.3高速离心机：10000r/min。

5.4旋转蒸发仪。

5.5天平：感量为0.01g和0.0001g。

5.6浓缩瓶：50mL，250mL。

5.7氮吹仪。

5.8固相萃取柱：（ENVI-Carb，PSA，C18），1500mg，12mL或相当者，使用前，用10mL乙腈-

甲苯（3+1）活化。

5.9C18柱，10mL或相当者，使用前，用10mL乙腈:甲苯（3:1）活化。

5.10有机相微孔滤膜：0.22µm。

6试样的制备

6.1生晒参、红参、活性参：取适量样品，用粉碎机粉碎，过0.25mm筛，混匀，装入洁净容器，密封，

于-20℃保存。

6.2鲜参：取不少于200g样品，置于组织捣碎机中捣碎、混匀，装入洁净容器，密封，于-20℃保存。

6.3人参蜜片、人参丁香茶、人参提取物：取适量样品、用粉碎机粉碎，过0.25mm筛，混匀，装入洁

净容器，密封，于-20℃保存。

注：在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

分析步骤

7分析步骤

2

DB22/T1848—2013

7.1试料的称量

称取鲜参样品10g（精确至0.01g）于100mL离心管中，其它样品1g（精确至0.001g）于50mL离心

管中。

7.2试料的测定

7.2.1提取

7.2.1.1嘧菌酯、嘧菌环胺、氟硅唑、苯醚甲环唑、氟菌唑、醚菌酯、烯酰吗啉、甲霜灵、嘧霉胺、

咯菌腈：取称量好的试料，加入丙酮20mL，高速匀浆1min后,以8000rpm离心5min，取上清液，

移至浓缩瓶中，再向残渣中加入20mL丙酮，重复提取一次，合并上清液，于35℃下旋转浓缩至近干，

加入乙腈-甲苯（3+1）5mL溶解残渣，待净化。

7.2.1.2噁霉灵：取称量好的试料，加入乙腈20mL，高速匀浆1min后,以8000rpm离心5min，取

上清液，移至浓缩瓶中，再向残渣中加入20mL丙酮，重复提取一次，合并上清液，于35℃下旋转浓

缩至近干，加入乙腈-甲苯（3+1）5mL溶解残渣，待净化。

7.2.2净化

7.2.2.1嘧菌酯、嘧菌环胺、氟硅唑、苯醚甲环唑、氟菌唑、醚菌酯、烯酰吗啉、甲霜灵、嘧霉胺、

咯菌腈:用10mL乙腈-甲苯（3+1）预淋洗固相萃取柱(5.8)，流出液弃去。将5mL提取液（7.2.1.1）

倾入固相萃取柱中，用20mL乙腈-甲苯（3+1）进行洗脱。收集全部洗脱液于250mL浓缩瓶中，于35℃

水浴中旋转浓缩至近干。用乙腈溶解，并定容至1mL，经0.22μm滤膜过滤后供液相色谱-质谱/质谱

测定。

7.2.2.2噁霉灵：用10mL乙腈-甲苯（3+1）预淋洗C18固相萃取柱（5.9），弃去流出液。将5mL

提取液（7.2.1.2）倾入C18柱固相萃取柱中，用20mL乙腈-甲苯（3+1）进行洗脱。收集全部洗脱液

于浓缩瓶中，于35℃水浴中旋转浓缩至近干。用乙腈溶解，并定容至1mL，经0.22μm滤膜过滤后

供液相色谱-质谱/质谱测定。

7.2.3测定

7.2.3.1色谱参考条件

a)色谱柱：KromasilEternity-5-C18，2.1mm×150mm或相当者；

b)流动相及流速见表1

c)色谱柱柱温度：40℃；

表1流动相及流速选择

步骤总时间/min流速/（µl/min）0.1%甲酸水/（%）乙腈/（%）

102505050

282501090

3122501090

412.12505050

5182505050

7.2.3.2质谱参考条件

参见附录B

3

DB22/T1848—2013

注：由于测试结果取决于所使用仪器，因此不可能给出液相色谱-质谱/质谱分析的通用参数。设定的参数应保证色

谱测定时被测组分与其它组分能够得到有效的分离，表1和附录B给出的参数证明是可行的。

7.2.3.3定性测定

按照液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液，样品的质量色谱峰保留时间与标准品中对

应的保留时间偏差在±2.5%之内；且样品中各组分定性离子的相对丰度与接近浓度的标准工作溶液中相

应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判定样品中存在对应的被测物。

对混合标准溶液及样液按上述规定的条件进行测定时，如果样液与混合标准溶液的选择离子图中，

在相同保留时间有峰出现，则根据定性选择离子的种类及其丰度比对其进行阳性确证。

表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度＞50％＞20％至50％＞10％至20％≤10％

允许的相对偏差±20％±25％±30％±50％

7.2.3.4定量测定

根据试样中被测样液中目标物的含量情况，选取响应值相近的标准工作液进行分析，对于高浓度样

品须适当进行系列稀释。标准工作液和样液中待测物的响应值均应在仪器线性响应范围内，外标法定量。

标准溶液的多反应监测色谱图参见附录E中图E.1。

7.3空白试验

除不称取试料外，按上述步骤同步进行。

8结果计算和表述

用色谱数据处理机或按式（1）计算试样中每种农药残留含量：

Ai´ci´V

Xi=.....................................(1)

Ais´m

式中：Xi——试样中农药i残留量，单位为微克每克（µg/g）；

Ai——样液中农药i的峰面积（或峰高）；

Ais——标准工作液中农药i的峰面积（或峰高）；

ci——标准工作液中农药i的浓度，单位为微克每毫升（µg/mL）；

V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；

m——试料的质量，单位为克（g）。

注：计算结果表示到小数点后2位，计算结果应扣除空白值

4

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第二法高效液相色谱法

9原理

高效液相色谱法：试样用正己烷饱和的乙腈提取，正己烷液液分配，乙腈收集液浓缩到合适体积，

用串联的GPR和氟罗里硅土固相萃取小柱净化，洗脱液浓缩定容后，供高效液相色谱仪检测，外标法定

量。

10试剂与材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

10.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。

10.2正己烷（CH3(CH2)4CH3）：色谱纯。

10.3乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯。

10.4乙酸乙酯-正己烷（1+1）：量取50mL乙酸乙酯和50mL正己烷，混匀。

10.5正己烷饱和的乙腈溶液：量取适量乙腈（10.1）和正己烷（10.2）混合，剧烈振荡混匀，取下层。

10.6乙腈的饱和正己烷溶液：量取适量乙腈（10.1）和正己烷（10.2）混合，剧烈振荡混匀，取上层。

10.7农药标准品：嘧菌环胺（Cyprodinil，CASNO.121552-61-2）（CAS号108-78-1，纯度大于等于

98.0%）、氟硅唑（Flusilazole，CASNO.85509-19-9，纯度大于等于98.0%）、氟菌唑（Triflumizole，

CASNO.68694-11-1，纯度大于等于98.0%）、烯酰吗啉（Dimethomorph，CASNO.110488-70-5，纯

度大于等于98.0%）、甲霜灵（metalaxyl，CASNO.57837-19-1，纯度大于等于98.0%）、咯菌腈

（Fludioxonil，CASNO.53112-28-0，纯度大于等于98.0%）。

10.8标准溶液

10.8.1嘧菌环胺等6种农药标准储备液：分别准确称取上述6种农药标准品10mg(精确至0.1mg)，

分别置于100.0mL容量瓶中，用丙酮溶解，并定容配制成浓度100μg/mL的标准储备液。该溶液分别

储备于棕色容量瓶中，在0℃～4℃保存12个月，咯菌腈0～4℃保存6个月。

10.8.2嘧菌环胺等6种农药混合标准中间液：分别准确吸取适量的嘧菌环胺、氟硅唑、氟菌唑、烯酰

吗啉、甲霜灵、咯菌腈农药标准储备溶液（10.8.1），用甲醇配制成浓度为10μg/mL的混合标准中间溶

液。该溶液于0℃～4℃保存。

10.8.3嘧菌环胺等6种农药混合标准工作溶液的配制：根据需要使用前吸取适量的混合标准中间溶

液，用甲醇配制成适当浓度的混合标准工作溶液，该溶液现配现用。

11仪器设备

11.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器（DAD）。

11.2涡旋混合器。

11.3高速离心机：10000r/min。

11.4旋转蒸发仪。

11.5天平：感量为0.01g和0.0001g。

11.6浓缩瓶：50mL，250mL。

11.7氮吹仪。

5

DB22/T1848—2013

11.8固相萃取柱：（ENVI-Carb，PSA，C18），1500mg，12mL或相当者，使用前，用10mL乙酸

乙酯-正己烷（1+1）活化。

11.9氟罗里硅土固相萃取柱：Florisil，1000mg，6mL，使用前，用10mL乙酸乙酯-正己烷（1+1）

活化。

11.10有机相微孔滤膜：0.22µm。

12试样的制备

见6.1、6.2、6.3。

13分析步骤

13.1试料的称量

称取鲜参样品10g（精确至0.01g）于100mL离心管中，其它样品2g（精确至0.001g）于50mL离心

管中。

13.2试料的测定

13.2.1提取

加入30mL正己烷饱和的乙腈溶液（10.5），5mL乙腈的饱和正己烷（10.6）溶液于离心管中，漩

涡震荡2min，4℃10000r/min离心5min，弃去上层的正己烷，再加5mL正己烷，重复提取1次，

漩涡震荡2min，离心5min，弃去最上层的正己烷，收集乙腈层。

13.2.2净化

将固相萃取柱与氟罗里硅土固相萃取柱串联，使用前用10mL乙酸乙酯-正己烷（？）混合溶液预淋

洗，弃去滤出液。将5mL溶解液倾入固相萃取柱中，用30mL乙酸乙酯-正己烷（1+1）混合溶液分3次进

行洗脱，收集洗脱液于浓缩瓶中，在35℃水浴中浓缩至近干。用乙腈溶解并定容至1.0mL，经0.22μm

滤膜过滤后供测定。

13.3测定

13.3.1色谱参考条件

a)色谱柱：C18column(4.6×250mm,5µm)；

b)色谱柱温度：室温；

c)检测波长：220nm；

d)流动相：乙腈-水（60+40）

e)流速：0.8mL/min

f)进样量：20µL；

13.3.2色谱测定

根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，标准工作溶液和待测农药的响应值均

在仪器检测的线性范围内。标准工作溶液与样液等体积参差进样测定。

6

DB22/T1848—2013

标准溶液及样液均按13.3.1规定的条件进行测定，如果样液中与标准溶液相同的保留时间有峰出

现，则对其进行确证。甲霜灵等6种农药标准物质的高效液相色谱谱图见附录E中图E.2。

13.4空白试验

除不称取试料外，按上述步骤同步进行。

13.5结果的计算和表述

用色谱数据处理机或按（2）式计算试样中嘧菌环胺等6种农药残留量：

Ai´ci´V1000

Xi=´..................................(2)

Ais´m1000

式中：Xi——试样中嘧菌环胺等6种农药i残留量，单位为毫克每千克(mg/kg)；

Ai——样液中嘧菌环胺等6种农药的峰面积（或峰高）；

Ais——标准工作液中嘧菌环胺等6种农药i的峰面积（或峰高）；

ci——标准工作液中嘧菌环胺等6种农药i的浓度，单位为微克每毫升（µg/mL）；

V——样液最终定容体积，单位为毫升(mL)；

m——试料的质量，单位为克(g)。

注：计算结果表示到小数点后2位，计算结果扣除空白值计算结果表示到小数点后2位，计算结果扣除空白值

14液相色谱-质谱/质谱法线性范围、方法定量限和回收率

14.1线性范围

见附录C中表C.1。

14.2方法定量限、回收率

见附录D中表D.1。

15高效液相色谱法方法定量限、回收率和精密度

15.1线性范围

见附录C中表C.2。

15.2方法定量限、回收率

见附录D中表D.2。

7

DB22/T1848—2013

AA

附录A

（资料性附录）

嘧菌环胺等11种农药种类

表A.1嘧菌环胺等11种农药种类表

序号农药名称英文名称CASNo.化学分子式

1甲霜灵Metalaxyl57837-19-1C15H21NO4

2烯酰吗啉Dimethomorph110488-70-5C21H22ClNO4

3咯菌腈Fludioxonil131341-86-1C12H6F2N2O2

4嘧霉胺Pyrimethanil53112-28-0C12H13N3

5亚胺菌Kresoxim-methyl143390-89-0C18H19NO4

6嘧菌环胺Cyprodinil121552-61-2C14H15N3

7氟菌唑Triflumizole99387-89-0C15H15ClF3N3O

8氟硅唑Flusilazole85509-19-9C16H15F2N3S

9嘧菌酯Azoxystrobinv131860-33-8C22H17N3O5

10苯醚甲环唑Difenoconazole119446-68-3C19H17Cl2N3O3

11恶霉灵Hymexazol10004-44-1C4H5NO2

8

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BB

附录B

（资料性附录）

嘧菌环胺等11种农药检测质谱参考条件

B.1质谱条件

B.1.1扫描方式：正离子扫描，多反应监测MRM；

B.1.2离子源温度（TEM）：725℃

B.1.3电离方式：电喷雾ESI；

B.1.4电喷雾电压：5500V；

B.1.5雾化气压力：0.483MPa；

B.1.6气帘气压力：0.138MPa；

B.1.7辅助加热气压力：0.379MPa；

B.1.8定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量、碰撞室出口电压见表B.1；

表B.1选择监测离子(m/z)、碰撞气能量及去簇电压参数

序号农药中文名农药英文名保留时间定量离子定性离子去簇电压DP碰撞气能量CE

280.3/220.1

1甲霜灵Metalaxyl4.12280.3/220.15019;24

280.3/248.1

200.2/107.1

2嘧霉胺Pyrimethanil4.58200.2/107.19035;35

200.2/82.1

226.2/93.2

3嘧菌环胺Cyprodinil6.38226.2/93.29549;36

226.2/108

346.1/278.2

4氟菌唑Triflumizole8.37346.1/278.24413;24

346.1/73.3

316.2/247.1

5氟硅唑Flusilazole7.26316.2/247.18526;37

316.2/165.0

Kresoximmethy314.3/222.2

6亚胺菌9.21314.3/222.26120;19

l314.3/235.3

Difenoconazol406.2/251.2

7苯醚甲环唑9.26406.2/251.210536;23

e406.2/337.2

404.3/372

8嘧菌酯Azoxystrobin6.91404.3/3728020;36

404.3/344.2

4.90,5.2388.3/165

9烯酰吗啉Dimethomorph388.3/301.110344;29

9388.3/301.1

266.1/185.1

10咯菌腈Fludioxonil6.61266.1/158.21033;47

266.1/158.2

100.1/54.1

11噁霉灵Hymexazol2.26100.1/54.15017;28

100.1/44.0

9

DB22/T1848—2013

CC

附录C

（资料性附录）

线性方程、相关系数

表C.1液相色谱-质谱/质谱法11种农药线性方程、相关系数

农药名称定量离子（m/z）线性方程相关系数（r）

甲霜灵280.3/220.1Y=4.259e+007X+2.38e+0060.9926

噁霉灵100.1/54.1y=4.93e+005x+3.71e+0040.9992

嘧霉胺200.2/107.13.50e+004x+4.81e+0050.9985

嘧菌环胺226.2/93.2Y=2.94e+004X+4.76e+0050.9982

氟菌唑346.1/73.3Y=1.51e+004X+1.21e+0050.9996

氟硅唑316.2/247.1y=2.44e+004x+4.68e+0040.9999

苯醚甲环唑406.2/251.2y=2.11e+004x+1.83e+0040.9999

醚菌酯266.1/158.2Y=2.49e+003X+5.09e+0040.9976

咯菌腈266.1/158.2