GA/T 1612-2019 法庭科学 生物检材中乐果等八种有机磷类农药检验 气相色谱和气相色谱-质谱法

ICS13.310

A92GA

中华人民共和国公共安全行业标准

GA/T××××－××××

法庭科学生物检材中乐果等八种有机磷

类农药检验气相色谱和气相色谱-质谱法

Forensicsciences—Examinationmethodsforeightorganophosphorus

pesticidesincludingdimethoateinbiologicalsamples—GCandGC-MS

××××-××-××发布××××-××-××实施

中华人民共和国公安部发布

GA/T××××—××××

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。

本标准起草单位：公安部物证鉴定中心、山东省公安厅。

本标准主要起草人：栾玉静、杜鸿雁、王瑞花、董颖、魏春明、王爱华、任昕昕、王芳琳、常靖、

于忠山、高宏、宋丽娟。

I

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法庭科学生物检材中乐果等八种有机磷类农药检验

气相色谱和气相色谱-质谱法

1范围

本标准规定了法庭科学生物检材（血、尿、肝、肾、胃及胃内容等）中乐果、氧乐果、马拉硫磷、

对硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、倍硫磷和乙拌磷的气相色谱（GC）定量检验方法和气相色谱-质谱（GC-MS）

定性定量检验方法。

本标准适用于法庭科学生物检材中乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、倍硫

磷和乙拌磷的定性分析和定量分析。其他可疑样品中乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、

甲拌磷、倍硫磷和乙拌磷的定性分析和定量分析可参照使用。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GA/T122毒物分析名词术语

3术语和定义

GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。

4原理

以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对生物样品进行提、净化及浓缩，采用气相色

谱法进行定量、气相色谱-质谱法进行定性定量，以保留时间、质谱特征离子碎片峰和相对丰度比作为

定性判断依据；以峰面积为依据，用外标法进行定量分析。

5试剂和材料

5.1试剂

实验用水应符合GB/T6682中规定的三级水。除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯，

试剂包括：

a)乙酸乙酯（色谱纯）；

b)环己烷（色谱纯）；

c)甲醇；

d)标准溶液：

1)1.0mg/mL标准物质溶液：根据标准物质的纯度，各称取适量，分别用甲醇配制1.0mg/mL

乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、倍硫磷和乙拌磷标准物质溶液，

置于冰箱中冷藏保存。有效期6个月。或采用市售标准溶液；

2)0.1mg/mL单一标准工作溶液：移取1.0mg/mL的乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲

1

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基对硫磷、甲拌磷、倍硫磷和乙拌磷标准物质溶液各1mL，分别用甲醇稀释并定容至10mL，

混匀，配制成浓度为0.1mg/mL的单一标准工作溶液，密封，置于冰箱中冷藏保存。有效

期3个月。实验中所用其他浓度的单一标准工作溶液均由0.1mg/mL标准物质溶液用甲醇

稀释得到。

注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液。

5.2材料

材料包括：

a)具盖离心管；

b)玻璃试管。

6仪器和设备

仪器和设备包括：

a)气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI）；

b)气相色谱仪：配有火焰光度检测器（FPD）；

c)凝胶渗透色谱净化浓缩联用仪；

d)电子天平；

e)振荡器；

f)离心机；

g)移液器；

h)浓缩器；

i)匀浆机。

7操作方法

7.1定性分析

7.1.1样品提取

7.1.1.1液液萃取

移取血液等液体检材样品1.0mL～2.0mL，或称取铰碎（或匀浆）的肝脏等固体检材样品1.0g～2.0g

于具盖离心管中，加入乙酸乙酯或二氯甲烷3.0mL~6.0mL，振荡5min，8000r/min离心10min，分离有

机相；重复提取一次，合并两次提取的有机相，置于浓缩器上45℃浓缩至干，残留物用甲醇100L溶

解，作为检材样品提取液供仪器分析。如需净化，按7.1.1.2操作。

7.1.1.2样品净化

取7.1.1.1中两次提取后合并的有机相，用凝胶渗透色谱仪净化按7.1.2.1.1操作，浓缩至1mL，再

置于浓缩器上45℃浓缩至干，残留物用甲醇100L溶解，作为检材样品提取液供仪器分析。

7.1.1.3质控样品制备

取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用血液替代）两份于具盖离心管中，一份作

为空白样品，一份添加乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对硫磷、甲拌磷、倍硫磷和乙拌磷标准

物质，作为添加样品（添加样品的浓度为1.0μg/mL（g）），与检材样品平行操作，得到空白样品提取

液和添加样品提取液供仪器分析。

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7.1.2仪器检测

7.1.2.1仪器条件

7.1.2.1.1凝胶色谱净化浓缩联用仪条件

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整:

a)净化柱：20mm×300mm，填料为50.0g中性多孔的交联苯乙烯二乙烯基苯聚合物或类似物；

b)流动相：环己烷/乙酸乙酯（体积比1:1）混合溶剂；

c)流速：4.7mL/min；

d)收集时间：收集540s～900s的洗脱液；

e)在线浓缩温度和真空度：1区：40℃30.0kPa；2区：50℃25.0kPa；3区：50℃22.0kPa。

7.1.2.1.2气相色谱-质谱条件

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

a)色谱柱：DB-5MS柱（30m×0.25mm×0.25µm）或等效色谱柱；

注：DB-5MS柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品

的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

b)色谱柱温程：100℃保持2min，以30℃/min速率升温至280℃，保持17min；

c)进样口温度：280℃；

d)传输线温度：260℃；

e)载气：氦气；

f)进样方式：分流进样，分流比10∶1；

g)电子轰击能量：70eV；

h)离子源温度：250℃；

i)倍增器电压：自动调谐值；

j)柱流量：1mL/min；

k)质量扫描范围：40amu~450amu；

l)扫描方式：全扫描（Scan）；

m)目标物质谱特征离子碎片峰：见表1。

表1检测目标物质谱特征离子碎片峰

名称质谱特征离子碎片峰（EI源）

甲拌磷m/z75*、m/z121、m/z231、m/z260

乙拌磷m/z88*、m/z97、m/z186、m/z274

马拉硫磷m/z125*、m/z93、m/z158、m/z173

乙基对硫磷m/z97*、m/z109、m/z139、m/z291

乐果m/z87*、m/z93、m/z125、m/z229

氧乐果m/z156*、m/z110、m/z213

甲基对硫磷m/z109*、m/z125、m/z263

倍硫磷m/z278*、m/z109、m/z125、m/z169

注：*为定量离子。

7.1.2.2进样

分别吸取检材、空白和添加样品提取液及标准工作溶液，按7.1.2.1的分析条件进样分析。

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7.2定量分析

7.2.1样品提取

移取血液等液体检材样品1.0mL～2.0mL，或称取铰碎（或匀浆）的肝脏等固体检材样品1.0g～2.0g

两份，按7.1.1进行操作。

另取等量相似基质的空白样品三份，其中两份分别添加乐果、氧乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲基对

硫磷、甲拌磷、倍硫磷和乙拌磷（添加样品中目标物含量应为检材样品中目标物含量的(100±50)%），

另一份作为空白样品，与检材样品平行操作，得到空白样品提取液和添加样品提取液供仪器分析。

7.2.2仪器检测

7.2.2.1仪器条件

7.2.2.1.1气相色谱-质谱条件

按7.1.2.1.2规定的条件分析。

7.2.2.1.2气相色谱条件

以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：

a)检测器：FPD；

b)色谱柱：DB-5柱（30m×0.25mm×0.25µm）或等效色谱柱；

注：DB-5柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认

可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。

c)色谱柱温程：120℃保持1min，以8℃/min速率升温至260℃，再以30℃/min速率升温至280℃，

保持3min；

d)进样口温度：260℃；

e)检测器温度：300℃；

f)载气：氮气；

g)进样方式：分流进样；

h)分流比：10∶1；

i)柱流量：1.0mL/min。

7.2.2.2进样

分别吸取检材、空白和添加样品提取液及标准工作溶液，按7.2.2.1的分析条件每个样品进样分析2～

3次。若要报告测量不确定度，每个样品分析次数应不少于6次。

7.2.3计算

7.2.3.1计算含量

记录各样品提取液平行进样2～3次的目标物保留时间和峰面积值（用定量离子的峰面积进行计

算），按公式（1）计算含量：

AMV

W样添样(1)

AMV

添样添

式中：

W－检材样品中目标物的含量，单位为微克每克（µg/g）或微克每毫升（µg/mL）；

A样－检材样品提取液中目标物峰面积平均值；

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M添－添加样品中目标物添加量，单位为微克（µg）；

V样－检材样品的定容体积，单位为毫升（mL）；

A添－添加样品提取液中目标物峰面积平均值；

M样－检材样品的取样量，单位为克（g）或毫升（mL）；

V添－添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）。

7.2.3.2计算相对相差

记录两份平行操作的检材样品中目标物的含量，按公式（2）计算相对相差：

X−X

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RD=100%(2)

X

式中：

RD－相对相差，用百分比（%）表示；

X1、X2－两个检材样品平行定量测定的含量数值；

X－两个检材样品平行定量测定含量的平均值。

8结果评价

8.1定性结果评价

8.1.1阳性结果评价

在相同条件下进行样品测定时，检材样品中目标物的色谱峰保留时间与标准溶液一致（相对误差在

±1%之内），且在扣除背景后的检材样品质谱图中，目标物的质谱特征离子（不少于3个）与标准溶液

一致，特征离子丰度比与浓度接近的标准溶液相比，相对偏差不超过表1规定的范围，空白样品无干扰，

则可判断检材样品中检出目标物。相关谱图参见附录A中图A.1~图A.8。

表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度＞50%20%～50%10%～20%≤10%

允许的相对偏差±20%±25%±30%±50%

8.1.2阴性结果评价

检材样品未出现与目标物标准溶液一致的色谱峰，且添加样品中出现与目标物标准溶液一致的色谱

峰，空白样品无干扰，则可判断检材样品中未检出目标物。GC-MS分析，八种有机磷类农药检出限参

见附录A中表A.1。

8.2定量结果评价

如果目标物含量的RD≤20%，定量数据可靠，其含量按两份检材的平均值计算。如果检材样品中

目标物含量的RD＞20%，定量数据不可靠，应按7.2重新提取检验。

有机磷类农药中毒诊断参考资料参见附录B。