GB/T 26625-2011 粮油检验 大豆异黄酮含量测定 高效液相色谱法

ICS67.060

B20

中华人民共和国国彖标准

GB/T26625—2011

粮油检验大豆异黄酮含量测定

高效液相色谱法

Inspectionofgrainandoils—Determinationofsoybeanisoflavone—

Highperformanceliquidchromatography

2011-06-16发布2011-11-01实施

GB/T26625—2011

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刖吞

本标准的附录A、附录B为资料性附录。

本标准由国家粮食局提出。

本标准由全国粮油标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、九三粮油T业集团有限公司。

本标准主要起草人:高勇、杨长志、李铁柱、张洪祥、邓立育、王乐、丁丽莎。

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GB/T26625—2011

粮油检验大豆异黄酮含量测定

高效液相色谱法

1范围

本标准规定了高效液相色谱法测定大豆异黄酮(大豆貳、黄豆黄素、染料木貳、大豆黄素、黄豆黄素

貳元、染料木素)含量的原理、试剂与材料、仪器与设备、试剂制备与保存、操作步骤、结果计算与表示、精

密度的要求。

本标准适用于大豆、豆奶粉、豆豉中大豆异黄酮含量的测定。

本标准测试方法的最低检测限为2.5mg/kg0

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试样用甲醇-水溶液超声波振荡提取，提取液经离心、浓缩、定容、过滤，用高效液相色谱仪测定，外

标法定量。

4试剂与材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水应符合GB/T6682中一级水的规定。

4.1乙月青：色谱纯。

4.2甲醇。

4.3乙酸。

4.490%甲醇溶液：取900mL甲醇，加入100mL水，混匀。

4.560%甲醇溶液:取600mL甲醇，加入400mL水，混匀。

4.610%甲醇溶液：取100mL甲醇，加入900mL水，混匀。

4.70.1%乙酸溶液:取1mL乙酸，置于1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。

4.80.1%乙酸乙月青溶液:取1mL乙酸，置于1000mL容量瓶中，用乙月青溶解并定容至刻度。

4.9大豆貳(daidzin)：纯度不低于98%。

4.10染料木貳(genistin)：纯度不低于99%0

4.11大豆黄素(daidzein)：纯度不低于98%。

4.12染料木素(genistein)：纯度不低于98%。

4.13黄豆黄素(glycitin)：纯度不低于98%,

4.14黄豆黄素貳元(glycitein)：纯度不低于98%。

4.15标准储备溶液配制：

4.15.1大豆异黄酮标准储备溶液：分别准确称取适量的大豆貳、染料木貳、大豆黄素、染料木素、黄豆

黄素、黄豆黄素貳元标准品，分别用60%甲醇(4.5)配成浓度为1mg/mL的标准储备溶液。一18匸避

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GB/T26625—2011

光保存，有效期6个月。

4.15.2大豆异黄酮混合标准中间溶液：分别移取上述各组分大豆异黄酮标准储备溶液（4.15.1）

0.5mL于同一10mL容量瓶中，用60%甲醇（4.5）定容至刻度，配制成各组分浓度为50（ug/mL的大

豆异黄酮混合标准中间溶液,0°C〜4°C冷藏避光保存，有效期3个月。

4.15.3大豆异黄酮混合标准工作溶液：分別吸取50.0ML,100.0»L、200.0yL、300.0卩L、1000.0ML

上述大豆异黄酮混合标准中间溶液（4.15.2）于10mL容量瓶中，用10%甲醇（4.6）溶液配成各组分浓

度0.25卩g/mL、0.50卩g/mL、l.00pg/mL、l.50“g/mL、5.00ptg/mL系列的大豆异黄酮混合标准