GB/T 14927.2-2008 实验动物 近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法

ICS

65．020．30

B44

@雪

中华人民共和国国家标准

14927．2—2008

GB／T

14927．2—2001

代替GB／T

实验动物

近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法

animal——

Laboratory

markerofinbredmiceandrats

Immunological

2009-03-0

2008-12-10发布1实施

宰瞀髁鬻瓣訾糍瞥霎发布中国国家标准化管理委员会仪19

14927．2—2008

GB／T

刖菁

GB／T

14927共分2个部分：

——第1部分为《实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测法》；

——第2部分为《实验动物近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法》。

本部分为GB／T14927的第2部分。

14927．2

本部分自实施之日起，代替GB／T2001《实验动物近交系小鼠、大鼠皮肤移植检测

法》。

本部分与GB／T14927．2--2001相比主要技术差异如下：

a)修订实验动物近交系小鼠、大鼠皮肤移植法部分内容；

b)增加小鼠H2单倍型微量细胞毒检测法；

c)本部分名称修改为“实验动物近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法”。

本部分附录A为资料性附录。

本部分由全国实验动物标准化技术委员会提出并归口。

本部分由全国实验动物标准化技术委员会负责起草。

本部分主要起草人：邢瑞昌、刘双环、马丽颖、岳秉飞、鲍世民。

本部分所代替标准的历次版本发布情况为：

——GB／T14927．21994，GB／T14927．2—2001。

14927．2—2008

GB／T

实验动物

近交系小鼠、大鼠免疫标记检测法

1范围

GB／T

type)检测方法。

本部分近交系小鼠、大鼠皮肤移植术法适用于近交系小鼠和大鼠在培育过程中遗传纯度的检查以

用于近交系小鼠培育和繁殖饲养过程中的遗传监测，主要检测H2复合体D区和K区的抗原分型。

2近交系小鼠和大鼠皮肤移植术法

2．1技术原理

移植物在同一近交系中可以被互相接受，即同系移植(isograft)是成功的。

移植物在不同近交系中互相排斥，亦即同种移植(allograft)是不成功的。

F1代动物可以接受任何一个双亲的组织移植物，双亲则不能接受F1代的移植物。

Fl代动物可以接受F2代以后各代动物的移植物。

亲本品系可以接受某些F2代以后各代动物的移植物。但是绝大部分被排斥。

本部分采用背部皮肤移植法和尾部皮肤移植法。两种方法原理相同，并具有同等标准效力。

2．2背部皮肤移植法

2．2．t设备和材料

cm×12

2．2．1．1固定板(18cm)。

2．2．1．2戊巴比妥钠(医用)。

2．2．1．3医用橡皮膏。

2．2．1．4医用凡士林。

2．2．1．5粉剂青霉素G钠(80万u，人或兽用)。

2．2．1．63％碘酒棉球。

2．2．1．775％酒精棉球。

2．2．1．8眼科剪刀。

2．2．1．9眼科镊子。

2．2．1．10一次性注射器(1mL)。

mm长，25

2．2．1．11纱布(剪成40mm宽若干条；厚2层～3层若干块，其上涂医用凡士林及粉剂青

霉素G钠)。

2．2．1．12脱脂棉做成的棉球。

2．2．1．13将手术器材置于高压锅内121℃、40min高压灭菌。

2．2．2操作步骤

2．2．2．1随机取同性别4周龄～8周龄的动物10只，动物可来自基础群或血缘扩大群。

2．2．2．2每只动物分别编号并称取体重，详细记录品系名称、性别、出生年月日、谱系及其他特征。

2．2．2．3用无菌生理盐水配制0．7％戊巴比妥钠溶液。

2．2．2．4采用腹腔注射0．7％戊巴比妥钠溶液麻醉动物。小鼠每10g体重注射0．1mL，大鼠每20g

1

GB／T14927．2—2008

体重注射0．1mL。因不同品系动物对麻醉剂敏感性不同，注射量可适当增减(手术时室温应控制在

25℃～28℃之间)。

2．2．2．5待动物麻醉失去知觉后，将其背部朝上放在固定板上，固定动物，剪去被毛，并用3％碘酒棉

球和75％酒精棉球消毒。

mm～10

2．2．2．6在背部剪下直径5mm的皮肤左右各一块(其中一块用做自体移植，另一块用做异

体移植)。

2．2．2．7将剪好的皮片翻转