T/FSSJ SYNY001-2020 黑木耳液体菌种生产技术规程

范围:本标准规定了黑木耳液体菌种生产的基本要求，主要包括生产场地、厂房和布局、设施设备、生产工艺流程、质量要求、技术要求、生产记录与存档、菌种贮藏。 本标准适用于黑木耳液体菌种的生产; 主要技术内容:生产工艺流程母种摇瓶液体种培养料配制投料灭菌冷却接种培养发酵罐液体种培养基母种培养基使用附录A中A.1规定的马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）或A.2规定的综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基（CPDA）。液体种培养基根据黑木耳品种及当地原料的要求使用适宜配方（见附录B），严格掌握初始pH。 8 母种母种继代培养后须按NY/T 1846 规定抽样，并进行感官检验和菌丝微观特征检验，合格菌种进入生产流程。母种质量要求符合GB 19169及NY/T 1742 关于母种质量的规定。摇瓶液体菌种生产1 培养基分装及灭菌摇瓶液体种培养基装量为容器体积的1/4至1/3，分装后立即灭菌。按常规高压蒸汽灭菌锅操作规程，0.1Mpa～0.12Mpa（121℃～126℃），维持25min。灭菌后的摇瓶液体种培养基于30℃±1℃ 培养箱恒温培养48小时后，观察确认无混浊、无异味，可用于接种培养。2 接种按无菌操作规程，将母种斜面菌丝体切割成2mm～4mm颗粒，移入摇瓶培养基中，每100 mL液体培养基接种菌丝体颗粒1颗～3颗。3 培养菌种培养温度26℃±1℃，空气相对湿度55%～65%，避光振荡培养。往复式摇床振荡频率60次～120次/分， 旋转式摇床振荡频率150转～180转/分。每日检查生长状态，及时检出浑浊、异味、泡沫异常的不合格菌种。摇瓶静置1分钟后，菌丝球体积占比液体培养基体积的4/5以上，可结束培养。发酵罐液体菌种生产1 空气过滤系统检查使用前要拆分检查滤芯，要求无油污、料污、无破损，外壳内外壁要求无污物、光亮洁净。滤芯在额定风量下，对粒径0.1～0.2μm粒子的过滤效率大于99.99%，空气阻力低于280pa。2 发酵罐检查与清洗检查罐上全部阀门、安全阀、压力表、要求完好，工作正常。对罐体内、外和全部阀门用流水进行冲洗，达到无死角、内壁无任何培养料残余物的洁净程度。3 空消灭菌发酵罐初次使用、出现染菌、长期放置及更换品种时，应进行空消灭菌。有内置电加热棒的培养器加水至容积的80%加热至121℃，维持40min。用外源蒸汽灭菌的培养器，蒸汽压力达到0.1Mpa～0.12Mp