GB/T 34918-2017 化妆品中七种性激素的测定 超高效液相色谱-串联质谱法

ICS71.100.70____

中华人民共和国国家标准

GB/T34918—2017

化妆品中七种性激素的测定

超高效液相色谱■串联质谱法

Determinationof7sexualhormonesincosmetics—

Ultrahighperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry

2017-11-01发布2018-05-01实施

发布

GB/T34918—2017

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本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由全国质量监管重点产品检验方法标准化技术委员会（SAC/TC374）提出并归口。

本标准起草单位:深圳市计量质量检测研究院、中检华纳（北京）质量技术中心有限公司、中检联盟

（北京）质检技术研究院有限公司、国家日用小商品质量监督检验中心、深圳市容大生物技术有限公司、

深圳市金因生物技术有限公司、浙江艳庄化妆品有限公司、无限极（中国）有限公司、完美（中国）有限公

司、上海相宜本草化妆品股份有限公司、广东丹姿集团有限公司、广州市巧美化妆品有限公司、广东芭薇

生物科技股份有限公司、纳爱斯集团有限公司、义乌市产品（商品）质量监督检验研究院。

本标准主要起草人:赵彦、林志惠、幸苑娜、冯岸红、陈茜、许鸿辉、杨平顺、葛峰、孙红梅、刘德海、

姚松君、李晓敏、袁利文、吕智、毛勇进、张健、刘瑞学、段建军、韦顺文。

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GB/T34918—2017

化妆品中七种性激素的测定

超高效液相色谱■串联质谱法

警示一使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准的使用可能涉及到某些有危

险的材料、设备和操作•本标准并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措

施.并保证符合国家有关法规规定的条件。

1范围

本标准规定了超高效液相色谱-串联质谱法测定水状、乳状、膏状、面膜、粉状等化妆品中七种性激

素（雌三醇、雌二醇、雌酮、己烯雌酚、睾酮、甲基睾酮、黄体酮）的原理、试剂、仪器设备、样品处理、测定、

试验数据处理和实验报告等。

本标准适用于水状、乳状、膏状、面膜、粉状等化妆品中七种性激素的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

用甲醇+乙月青（1+1,体积比）混合溶剂漩涡提取化妆品中的性激素，离心过滤后，加入氢氧化钠溶

液进行皂化反应，调节pH至6.5〜7.5,经固相萃取小柱净化，用反相超高效液相色谱-串联质谱法测定，

内标法定量。

4试剂或材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

4.1GB/T6682规定的一级水。

4.2甲醇；色谱纯。

4.3乙睛：色谱纯。

4.4乙酸钱。

4.5氢氧化钠。

4.6浓盐酸。

4.7甲醇+乙睛（1+1,体积比）：分别量取500mL甲醇（4.2）和500mL乙月青（4.3）充分混匀后制得。

4.8乙酸钱溶液（0.5mmol/L）：称取38.5m乙酸钱（4.4）,用水（4.1）溶解定容至1L。

4.9氢氧化钠溶液（20g/L）：称取20.0氢氧化钠（4.5）,用水（4.1）溶解定容至1L。

4.10盐酸溶液（10mol/L）:量取833mL的浓盐酸（4.6）,用水（4.1）溶解定容至1L。

4.11盐酸溶液（1mol/L）取100mL的10mol/L盐酸溶液（4.10）,用水（4.1）溶解定容至1L。

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GB/T34918—2017

4.12盐酸溶液(0.1mol/L):量取100mL的1mol/L盐酸溶液(4.11),用水(4.1)溶解定容至1L。

4.1310%乙睛水溶液(体积比)：量取100mL乙月青(4.3)和900mL水(4.1)充分混匀后制得。

4.14纤维素滤纸。

4.15pH试纸：范围5.5〜9.0。

4.16HLB固相萃取小柱或相当者：150mo

4.17样品过滤器：有机膜，孔径0.22pm。

4.18标准品和同位素内标:雌三醇、雌二醇、雌酮、己烯雌酚、睾酮、甲塵睾酮、黄体酮为标准品，雌三醇

D2、甲基睾酮D3为同位素内标，纯度不小于99.0%。7种标准品和2种同位素内标的英文名称、CAS

登录号、分子式、化学结构图参见附录A。

4.19内标储备液(100“g/rnL)：准确称取同位素内标(4.18)各10.0mg,用甲醇(4.2)分别溶解定容至

100.0mL,于(一4±1)°C下密封保存，可在一年内稳定。

4.20标准储备液(1mg/mL):准确称取标准品(4.18)各10.0mg,用甲醇(4.2)分别溶解定容至

10.0mL,于(一4±1)°C下密封保存，可在一年内稳定。

4.21混合内标使用液(1Mg/mL)：准确量取内标储备液(4.19)各1.00mL,用甲醇(4.2)定容于

100.0mL,于(一4+1)°C下密封保存。

4.22标准混合工作溶液：根据需要，用甲醇稀释，将各标准储备液(4.20)配制成0.025Mg/mL,

0.050pg/mL、0.20yg/mL、0.40yg/mL、0.80yg/mL系列浓度的标准曲线溶液后，各取1.00mL置于

进样瓶中，并加入50卩L混合内标使用液(4.21),制得标准混合T作溶液，标准混合工作溶液中各浓度

梯度含各同位素内标0.05Mgo

5仪器设备

5.1超高效液相色谱-串联质谱联用仪(配ESI源)。

5.2分析天平：精度0.1mo

5.3涡旋混合器。

5.4离心机：转速10000r/min；容量10mL,50mL0

5.5固相萃取装置。

6样品准备

6.1提取

称取0.2样品(精确至0.001g)于15mL具塞离心管中，准确加入2mL甲醇+乙月青(1+1,体积

比)(4.7),涡旋震荡使样品溶液达到均质状态，10000r/min离心10min,吸取上层清液至另一50mL

具塞离心管中，下层样品用2mL甲醇丨乙月青(1|1,体积比)(4.7)重复提取一次，合并两次提取液后，

加入35mL氢氧化钠溶液(20g/L)(4.9),混匀，10000r/min离心10min后，经纤维素滤纸(4.14)过滤

后，分别加入10mol/L盐酸溶液(4.10)Jmol/L盐酸溶液(4.11)和0.1mol/L盐酸溶液(4.12),调节清

液pH值至6.5-7.5之间，待固相萃取小柱净化。

6.2净化

HLB固相萃取小柱(4.16)接上固相萃取装置(5.5),小柱分别用5mL甲醇(4.2)40mL水(4.1)进

行活化。将待净化的样品溶液倒入小柱中，待样品溶液完全流出后，加入10mL10%乙月青水溶液

(4.13)清洗小柱，弃去全部淋出液。在负压下，减压抽干1min,最后用5mL甲醇(4.2)洗脱，收集样品

洗脱液于15mL离心管中，转移样