T/CI 307-2024 用于疾病治疗的间充质干细胞质量要求

ICS07.080

CCSC10

团体标准

T/CI307—2024

用于疾病治疗的间充质干细胞质量要求

Qualityrequirementsofmesenchymalstemcellsfortherapy

2024-03-21发布2024-03-21实施

中国国际科技促进会发布

T/CI307—2024

目次

前言.................................................................................II

引言................................................................................III

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4缩略语.............................................................................3

5DT-MSCs的关键质量属性..............................................................4

6DT-MSCs的标志性生物效力............................................................5

7DT-MSCs的微生学和生物学安全性......................................................8

8标签、包装、储存和运输.............................................................8

9放行检测报告.......................................................................8

参考文献.............................................................................10

I

T/CI307—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由北京大学肿瘤医院和殷氏细胞有限公司提出。

本文件由中国国际科技促进会归口。

本文件起草单位：北京大学肿瘤医院、中国科学院生物物理研究所、华研(深圳)再生医学集团有限

公司、北京协和医院、山西医科大学第二医院、中国中医科学院广安门医院、成都华西海圻医药科技有

限公司、中国人民解放军总医院总医院第六医学中心、哈药集团生物工程有限公司、海南一龄医疗产业

发展有限公司、北京亚新海生物医学研究有限公司、北京世研麦森细胞生物科技有限公司、海南经济特

区梅赛尔医院有限公司、深圳悦荣生命科学研究有限公司、江苏多源健康生物技术有限公司、源生生物

科技（青岛）有限责任公司、山西菩瑞德生物科技有限公司、浙江亚博凯康生物科技有限公司、中关村

（黑龙江）未来医学研究院（有限合伙）、北京智能宝生物科技有限公司、北京科美奥康生物医学研究

院有限公司、山东省医药生物技术研究中心、赛尔斯（山东）生物工程有限公司、山东殷氏干细胞有限

公司、山东华奥生物工程有限公司、西安国际医学中心医院、海南玖诺生物科技有限公司。

本文件主要起草人：殷勤伟、武兆刚、朱军、姬广聚、王珊珊、韩冰、王宏伟、李光熙、王莉、沈

建良、马真艳、王春亮、魏寒涛、秦瑞习、吴坚美、张雪亭、赵立明、周洁琼、苏学明、李志刚、韩博

名、黄浩、丁伟、黄兵、柏雪峰、贾战生、周滨。

II

T/CI307—2024

引言

由于间充质干细胞(MesenchymalStem/StromalCell,MSC)广泛分布在人体的不同器官和组织中，

它们具有异质性和属性安全、免疫原性较低、不会自成肿瘤等优点；通过规范的体外培养和严格检测，

可回输人体用来修复、改善和解决多种健康问题。随着干细胞技术的不断发展，间充质干细胞由于其强

大的旁分泌调节功能和多向分化潜能已被作为一种细胞疗法，正在逐步用于多种疾病的干预和治疗，所

以如何驯化赋能出具有针对不同适应症的高效异质的MSCs是治疗不同疾病的关键。

间充质干细胞具有发育程序性衰老的特点，随着年龄的增长，间充质干细胞(MSC)的数量和增殖分

化能力出现明显的下降。因此，很容易理解为何新生儿组织（包括脐带、羊膜、胎盘等组织）来源的MSCs

更为年轻或新生儿组织含有更多的年轻活力的MSCs。与成人组织（包括成年人骨髓、脂肪、宫内膜、牙

髓等）来源的BM-MSCs、AD-MSCs、EM-MSCs和DP-MSCs相比，这些年轻的MSCs具有更强的增殖和分化能力。

再者，MSC易受微环境的影响，来自患者如自身免疫性疾病和糖尿病的MSCs常表现出较弱的增殖和分化

能力。此外，体外培养的MSCs也出现复制性衰老，当回输入人体后还会出现对体内环境的不适应：易被

体内的免疫细胞清除，不易出血管、易凋亡等问题。

本文件是为了避免上述MSCs的种种不利因素，更好地发挥其独特的异质性，将其更有效地用于人体

健康养护、抗衰和不同疾病的治疗而制定的。

III

T/CI307—2024

用于疾病治疗的间充质干细胞质量要求

1范围

本文件规定了用于疾病治疗的人体间充质干细胞（MSCs）的关键生物学性质、生物效力、安全性、

标签、包装、储存、运输、检测报告的要求，界定了是否是优质MSCs的指标，给出了鉴定MSCs有无复制

性衰老的基本参数，提供了用于特定适应症MSCs的基本质量要求。

本文件适用于疾病治疗的人体间充质干细胞及其制品的研发、生产和临床应用。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

干细胞stemcell

具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下可分化成多种功能细胞。

间充质干细胞mesenchymalstemcell（MSC）

一类存在于多种组织（如骨髓、脐带血、脐带组织、胎盘组织和脂肪组织等），具有一定的自我复

制更新和多向分化潜能的干细胞，可以为邻近的组织器官提供组织修复和营养支持，并具有免疫调节作

用。

分化能力differentiationpotential

在体外特定诱导分化培养条件下，细胞向多种预设目标细胞分化的功能。

细胞表面标志物cellsurfacemarker

细胞膜表面上特异性表达的标志性蛋白和分子。

细胞存活率cellsurvivalrate

在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞，总细胞中活细胞所占的百分比。

MSC的异质性MSCheterogeneity

体外培养的MSCs在细胞形态、表面标志、分化潜能和分泌物等方面表现出不均一的特征。

复制性衰老replicativesenescence

细胞遗传物质复制和细胞分裂能力有限，在经过有限次数的复制和分裂后，细胞发生形态和结构的

显著变化并逐渐失去复制和分裂的能力。

免疫抑制immunosuppression

对于免疫应答的抑制作用，通过抑制与免疫反应有关细胞（T细胞、B细胞、NK细胞、巨噬细胞等）

的增殖、分化和成熟等功能，来降低免疫反应。

细胞群体倍增时间populationdoublingtime（PDT）

细胞在培养条件下生长时其数目倍增所需的时间。

1

T/CI307—2024

抗炎作用anti-inflammatoryeffect

通过特异地抑制或拮抗一种或几种炎症介质和相关的活性物质，达到减轻炎症反应和其对组织细胞

损伤的效果。

组织修复tissuerepair

局部组织和细胞因致病因素导致损伤和死亡后，由邻近健康细胞迁移再生来修补顶替，以恢复组织

完整性的过程称为组织修复。

纤维化fibrosis

可发生于多种器官，主要病理改变为器官组织内纤维结缔组织增多，实质细胞减少，持续进展可致

器官结构破坏和功能减退。

核质比karyoplasmicratio

一个细胞的核与细胞质在量(容积)上的比例。

MSC归巢MSChoming

在多种因素的作用下，MSC能定向趋向性迁移，越过血管内皮细胞至靶向组织并定植存活的过程。

细胞凋亡apoptosis

为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。

活性氧reactiveoxygenspecies（ROS）

体内一类氧的单电子还原产物，是电子在未能传递到末端氧化酶之前漏出呼吸链并消耗大约2%的氧

生成的。

2-

注：包括氧的一电子还原产物超氧阴离子(O)、二电子还原产物过氧化氢(H2O2)、三电子还原产物羟基自由基(·OH)

以及一氧化氮等。

外泌体exosome

包含了多种RNA分子和蛋白质的双层质膜小囊泡，直径在30nm～150nm，具有其来源细胞的相似调

节功能。

核型karyotype

一个体细胞中的全部染色体在有丝分裂中期，按其大小、形态特征(着丝粒的位置）顺序排列所构

成的图型。

集落colony

将细胞以极低密度接种培养一段时间后，由单个细胞生长分裂形成由大于50个细胞聚集的细胞克隆。

成瘤性tumorigenicity

细胞接种到免疫缺陷动物体内后在注射部位和（或）转移部位由接种细胞所形成肿瘤的能力。

高表达highexpression

与用10%FBS培养的第一代MSCs比较，细胞因子和/或其它相关分子的表达量明显升高，p值<0.05。

低表达lowexpression

与用10%FBS培养的第一代MSCs比较，细胞因子和/或其它相关分子的表达量明显降低，p值<0.05。

无血清和无异种蛋白培养基serum-freeandxeno-freemedia

2

T/CI307—2024

一种无血清、不含异种蛋白、化学性质明确的培养基，富含多种促间充质干细胞增殖和分化的细胞

因子、化学因子和调节分子，具有更高的生物活性和安全性。

细胞因子cytokine（CK）

由免疫细胞和一些非免疫细胞经刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质，通

过结合相应受体可调控免疫应答、血细胞生成、细胞生长和损伤组织的修复等。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

AM-MSC：羊膜间充质干细胞（AmnioticMesenchymalStem/StromalCell）

Ang-1/II：血管生成素1/2（Angiopoietin-1/II）

APLL-37：抗菌肽LL-37（AntibacterialpeptideLL-37）

ASK1：凋亡信号调节激酶1（Apoptosissignal-regulatingkinase1）

BDNF：脑源神经营养因子（Brain-derivedneurotrophicfactor）

CD：细胞膜表面分化抗原簇（ClusterofDifferentiation）

C/EBPb：普通转录因子c/ebpb（CCAAT/enhancerbindingproteinb）

CMV：巨细胞病毒（cytomegalovirus）

CNTF：睫状神经营养因（Ciliaryneurotrophicfactor）

COX-2：环氧化酶-2（Cyclooxygenase-2）

CXCR4：CXC化学受体4（CXCchemokinereceptor4）

CXCR7：CXC化学受体7（CXCchemokinereceptor7）

DT-MSCs：用于疾病治疗的MSCs（Diseasetreatmentmesenchymalstemcells）

EBV：人类疱疹病毒4型（Epstein-Barrvirus）

EGF：表皮细胞生长因子（Epidermalgrowthfactor）

FBS：胎牛血清（Fetalbovineserum）

GDNF：胶质来源的神经营养因子（Glial-derivedneurotrophicfactor）

GSH：谷胱甘肽（antioxidantglutathione）

Gpx：谷胱甘肽过氧化酶（glutathioneperoxidase）

HGF：肝细胞生长因子（Hepatocytegrowthfactor）

HIF-1：低氧诱导因子-1（Hypoxia-induciblefactor-1）

HIV-I/II：I/II型人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus,HIV）

HLA-G5：人白细胞抗原G5（Humanleukocyteantigen-G5）

HMOX1：血红素加氧酶-1（Hemeoxygenase-1）

HO-1：血红素加氧酶-1（Hemeoxygenase-1）

HSP70：热休克蛋白70（heat-shockprotein70）

HTLV：人类嗜T细胞病毒（humanT-lymphotropicvirus）

IDO：吲哚胺-2,3-双加氧酶（Indoleamine-2,3-dioxygenase）

IFITM：干扰素诱导跨膜蛋白（Interferon-InducedTransmembraneProtein）

IG