GB/T 23410-2009 蜂蜜中硝基咪唑类药物及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法

ICS67.050

B47OB

中华人民共和国国家标准

GB/T23410—2009

蜂蜜中硝基咪哩类药物及其

代谢物残留量的测定

液相色谱-质谱/质谱法

Determinationofresiduesofnitroimidazolesand

theirmetabolitesinhoney—

LC-MS/MSmethod

2009-03-28发布2009-07-01实施

发布

GB/T23410—2009

本标准的附录A、附录E、附录C和附录D为资料性附录。

本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：赵增运、沈崇饪、丁涛、林宏、杨雯筌、陈小卫、蒋原、陶宏锦。

I

GB/T23410—2009

蜂蜜中硝基咪B坐类药物及其

代谢物残留量的测定

液相色谱■质谱/质谱法

1范围

本标准规定了蜂蜜中甲硝哩（简称MN乙下同）及其代谢物1-（2-轻乙基）-2-轻甲基-5-硝基咪卩坐（简

称MNZOH,下同），二甲硝咪哩（简称DMZ,下同）及其代谢物2-轻甲基-1-甲基-5-硝基咪睦（简称

HMMNI,下同），异丙硝哩（简称IPZ,下同）及其代谢物2-（2-轻异丙基）-1-甲基-5-硝基咪哩（简称

IPZOH）,洛硝哒哩（简称RN乙下同）残留量的液相色谱-串联质谱的测定方法。上述硝基咪瞠类药物

中英文名称、结构式、CA号和相对分子质量参见附录Ao

本标准适用于蜂蜜中硝基咪醴类药物及其代谢物残留量的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682—2008,ISO3696：1987,M（）D）

3方法提要

试样加入相应内标后用乙酸乙酯提取硝基咪卩坐类药物及其代谢物，蒸干提取溶液，利用液相色谱-

串联质谱仪测定，梯度洗脱，内标法定量。

4试剂和材料

除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1甲醇：HPLC级。

4.2乙酸乙酯。

4.3乙酸钱：HPLC级。

4.4同位素内标：DMZ-D,JPZ（）H-D3>HMMNI-D:j，纯度$98%。

4.5MNZ、MNZ（）H、DMZ、HMMNI、IPZ、IPZ（）H和RNZ标准品：纯度三98%。

4.6MNZ、MNZ（）H、DMZ、HMMNI、IPZ、IPZ（）H和RNZ标准储备溶液：1mg/mLo准确称取适量

的MNZ、MNZ（）H、DMZ、HMMNI、IPZ、IPZ（）H和RNZ标准品（4.5）,用甲醇（4.1）配成1.0mg/mL

的标准储备液，储备液贮存在4C冰箱中，可保存6个月。

4.7DMZ-U、IPZ（）H-D和HMMNI-D,内标储备溶液：100Mg/mLo称取适量的DMZ-D,JPZOH-D,和

HMMNI-D,内标物（4.4）,用甲醇（4.1）配成100卩g/niL储备液，储备液贮存在4C冰箱中。

4.8DMZ-D,JPZOH-D,和HMMNI-D：<内标工作溶液：1Mg/mLo取适量内标储备液用甲醇（4.1）稀

释成1卩g/mL工作溶液，内标工作溶液在4C保存。

4.9MNZ、MNZ（）H、DMZ、HMMNI、IPZ、IPZ（）H和RNZ标准工作溶液：用甲醇（4.1）分别配成浓度

范围为1ng/mL~100ng/mL标准工作溶液，其中内标溶液浓度为50ng/mL,现配。

4.10甲醇-水（2+8,体积比）：量取20mL甲醇（4.1）于80mL水中，混合均匀。

1

GB/T23410—2009

5仪器

5.1液相色谱-质谱/质谱仪（串联四极杆）：配有电喷雾离子源。

5.2分析天平：感量0.01g和0.1mg各一台。

5.3旋转蒸发仪或相当者。

5.4涡旋混匀器。

5.5真空泵：真空度不低于80kPao

5.6离心机：转速不低于2500r/mino

5.7移液器：5mL,200ptL0

5.8滤膜：有机,0.45Mmo

6试样的制备与保存

6.1试样的制备

将实验室样品搅拌均匀，分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品袋中，密封，并做上标记。

在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留含量变化。

6.2试样的保存

将试样于冷藏状态下保存（4C）。

7测定步骤

7.1提取

准确称取10g（精确到0.01g）试样，置于50mL具塞离心管中，准确加入50卩L3种内标混合溶液

（4.8）,3mL〜5mL水，于涡旋混匀器上快速混合至蜂蜜完全溶解。加入10mL乙酸乙酯（4.2）,混合

30s,2500r/min离心3min,取上层乙酸乙酯到50mL玻璃试管中，再加入10mL乙酸乙酯（4.2）,重

复上述提取步骤，合并提取液,40°C水浴旋转蒸发干。用甲醇-水（4.10）1.0mL定容，过滤到进样瓶

中，供液相色谱-串联质谱仪测定。

7.2测定

7.2.1参考液相色谱条件

a）色谱柱：封端Cis,3011,150mmX2.0mm（内径）或相当者；

b）流动：甲醇+5mmol/L乙酸钱溶液；

c）流速：0.20mL/min；

d）梯度洗脱程序:参见附录B；

e）柱温：室温；

f）进样量:25（uLo

7.2.2串联质谱条件

参见附录C。

7.3液相色谱-串联质谱测定

7.3.1定性测定

进行样品测定时，如果检出的质量色谱咚保留时间与标准样品一致，并且在扣除背景后的样品谱图

中，各定性离子的相对丰度与浓度接近的同样条件下得到的标准溶液谱图相比，最大允许相对偏差不超

过表1中规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。