T/CI 026-2022 甘蔗白叶病病原检测与抗病性鉴定技术规程

ICS65.020

CCSB15

Technicalspecificationsforpathogendetectionanddiseaseresistance

identificationofsugarcanewhiteleaf

2022-4-202022-4-20

前⾔..............................................................................................................................I

1适⽤范围......................................................................................................................1

2引⽤标准......................................................................................................................1

3术语和定义...................................................................................................................1

4缩略语..........................................................................................................................1

5症状及流⾏特点...........................................................................................................2

6病原检测......................................................................................................................2

7抗病性鉴定...................................................................................................................3

附录A（资料性附录）⽢蔗⽩叶病症状及流⾏特点.............................................6

A.1⽢蔗⽩叶病症状....................................................................................................6

A.2⽢蔗⽩叶病流⾏特点.............................................................................................6

A....................................................................................................................................7

A....................................................................................................................................7

附录B（规范性附录）试剂配制和DNA提取......................................................7

B.1DNA提取试剂配制...............................................................................................7

B.2DNA提取..............................................................................................................7

B....................................................................................................................................8

B....................................................................................................................................8

附录C（规范性附录）巢式PCR检测操作⽅法...................................................8

C.1扩增试剂配制........................................................................................................8

C.2对照.......................................................................................................................8

C.3引物.......................................................................................................................8

C.4巢式PCR扩增......................................................................................................9

C.5琼脂糖电泳检测与凝胶成像分析...........................................................................9

C.6⽢蔗⽩叶病植原体巢式PCR扩增电泳图..............................................................9

I

本标准按照GB/T1.1-2020《标准化⼯作导则第1部分：标准化⽂件的结构和起草规

则》起草。

本标准由中国国际科技促进会提出并归⼝。

某些内容可能涉及专利，本标准的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由云南省农业科学院⽢蔗研究所、临沧南华糖业有限公司、保⼭市农业技术

推⼴中⼼、云南省农业科学院⽣物技术与种质资源研究所、耿⻢南华糖业有限公司、临

沧市⽢蔗技术推⼴站、澜沧县⽢蔗技术推⼴站、⻄盟县经济作物⼯作站负责起草。

本标准主要起草⼈：⻩应昆、李⽂凤、李婕、卢⽂洁、王晓燕、代光伟、段兆祜、

张荣跃、单红丽、董有波、⻩丕忠、李银煳、罗志坚、林⽂根、南云刚、李茅苗、岩⽂、

⽯红军、唐吉昌、鲁宾、段明雄、⽩升伟、董显华、周中、施永祥、者林成、李⽂富。

本标准是⾸次发布。

II

本标准规定了⽢蔗⽩叶病病原检测与抗病性鉴定的术语定义、缩略语、症状及流⾏

特点、病原检测与抗病性鉴定的技术⽅法和标准。

本标准适⽤于⽢蔗⽩叶病的分⼦检测和⽢蔗种质资源对⽢蔗⽩叶病抗病性的⼈⼯

接种鉴定与评价。

下列⽂件中的条款，通过本标准的引⽤⽽成为本标准的条款。凡是注⽇期的引⽤⽂

件，仅注⽇期的版本适⽤于本⽂件。凡是不注⽇期的引⽤⽂件，其最新版本（包括所有

的修改单）适⽤于本⽂件。

GB/T28067⽢蔗⻩叶病毒实时荧光RT-PCR检测⽅法

3.1巢式PCR：巢式PCR是⼀种使⽤两对PCR引物扩增完整的⽚段，第⼀对PCR

引物扩增⽚段和普通PCR相似，第⼆对引物结合在第⼀次PCR产物内部，使得⼆次PCR

扩增灵敏度⾼于⼀次PCR扩增的变异聚合酶链式反应。

3.2⽢蔗⽩叶病（Sugarcanewhiteleaf,SCWL）：由⽢蔗⽩叶病植原体（Sugarcane

whiteleafphytoplasma）系统性侵染⽢蔗使蔗叶上出现单条或数条⽩⾊条纹，甚⾄全叶

变成⽩⾊，叶质柔软，病株分蘖增多并矮缩的⼀种种传植原体病害。

3.3感病对照：受⽢蔗⽩叶病植原体（Sugarcanewhiteleafphytoplasma）侵染发病

株率达20.1%以上的⽢蔗品种。

3.4抗病对照：受⽢蔗⽩叶病植原体（Sugarcanewhiteleafphytoplasma）侵染发病

株率在