GB/T 15440-1995 环境中有机污染物遗传毒性检测的样品前处理规范

中华人民共和国国家标准

环境中有机污染物遗传毒性检测的

样品前处理规范GB/T15440一1995

Guidelinesforpreparingsamplesfor

genetoxicitytestingoforganic

pollutantsinenvironment

本规范规定了环境中有机污染物遗传毒性检测时样品前处理的技术要求。

本规范分五篇:

第一篇大气可吸人颗粒物样品前处理

第二篇地面水及废水样品前处理

第三篇非水液态废弃物样品前处理

第四篇土壤及沉积物样品前处理

第五篇固体废弃物样品前处理

规范所给定义仅限定在本规范内使用，不具普遍性。

本规范不对样品前处理的质量控制及操作安全性作全面阐述，仅对特定问题给以说明，其他间题应

遵从合格实验室准则的有关原则。

本规范的质量控制原则皆以遗传毒性检测系统本身正常为前提。

本规范不另提供记录表格，样品前处理过程的记录应遵从常规分析测试原则。

第一篇大气可吸人颗粒物样品前处理

1适用范围

本规范适用于大气可吸人颗粒物中非挥发性有机物，不适用于大气可吸入颗粒物的气态及半气态

有机物。

2引用标准

GB6921大气飘尘浓度测定方法

GB6682实验室用水规格和实验方法

定义

可吸入颗粒物:能长期悬浮在空气中，空气动力学当量直径<10Jim的、能进入人体呼吸道的颗粒

物。

4仪器、设备

J

q1采样系统:符合GB6921的要求。

月

叼2超细玻璃纤维滤膜:过滤效率不低于99.99%.

国家环境保护局1995一03一25批准1995一08一01实施

GB/T15440一1995

4.3索氏提取器:500mL容量。

4.4超声波清洗器:250w功率。

4.5分液漏斗。

46旋转蒸发器。

4.7KD浓缩器。

4.8钢瓶。

4.9减压阀。

4.10高纯氮气。

4.11一般实验室器具及玻璃器皿。为避免其他有机物质的干扰，所有玻璃器皿及直接接触样品的器具

均需洗净，并经纯水及纯有机溶剂冲洗。

5试剂

5.1纯水:符合GB6682实验室用水规格中一级水标准的水，即电导率(0.01,.S/cm(25C)，吸光度

(0.001(254nm,1cm光程)二氧化硅含量(0.01mg/L。可用去离子水(加少量KMnO,)经全玻璃器

皿重蒸馏制得。

5.2溶剂:等级不得低于分析纯，且皆应在玻璃容器中重蒸馏后方能使用。

5.2.1二抓甲烷。

5.2.2二FF基亚矾(DMSO),

5.3氢氧化钠:c(NaOH)=1mol/L,

5.4盐酸:c(HCD=1mol/L,

5.5无水硫酸钠。

6样品采集

按GB6921的方法采集一定量的大气可吸入颗粒物，记录流量及采样时间。采样前，将滤膜于

500℃灼烧半小时后称重。采样后，将对折的滤膜用硫酸纸包好，装入黑色纸袋，于4℃条件下运输并于

采样前的称重条件下平衡至少24h后称重。称重后的滤膜装入塑料袋，于一20℃以下避光保存。采样后

应尽快进行样品制备。

采样时间不应超过24h，在此期间如不能采集到足量的尘，可在同一采样地同时设置两个或更多

的采样器，将所得尘样合并为一个样品。

7样品制备

7.1有机物分离提取

可采用索氏提取法、超声提取法，必要时进行不同有机组分的提取。

7.1.飞索氏提取

将样品滤膜对折成卷状，放入提取器。分别用100mL二抓甲烷在溶剂沸点条件下(400C)提取2

次，每次16h(每小时回流5-10次)，将两次的提取液冷却至室温后合并。用孔径(0.5mm的微孔全

玻璃砂芯漏斗将提取液滤至一圆底烧瓶中。

7.1.2超声提取

将滤膜剪成1cm小片，放入瓶塞配有聚四氟乙烯衬垫的玻璃试管中，在超声波清洗器中用二抓甲

烷提取2次，每次10min。用孔径(0.5mm的微孔全玻璃砂芯漏斗将提取液滤至一国底烧瓶中。

713不同有机组分的提取

7.13.1将索氏提取或超声提取得到的提取滤液放入分液漏斗，用1mol/L盐酸提取3次，每次用量

约50一75mL(提取液pH为1-2),

Gs/T15440一1995

7.1.3.2碱性组分:将7.1.3.1中3次提取所得的水相合并，用1mol/L氢氧化钠将pH调至11^12,

用二抓甲烷提取3次，每次用量约50-100mL，将3次提取的有机相合并，并使其通过无水硫酸钠除去

水分。此为碱性组分。

7.1-3.3中性组分:将7.1.3.1中3次提取所得的有机相合并，用1mol/L氢氧化钠提取3次，每次用

量约50^75mL(提取液pH为11一12)。将3次提取的有机相合并，并使其通过无水硫酸钠除去水分。

此为中性组分。

7.1-3.4酸性组分:将7.1.3.3中3次提取所得的水相合并.用1mol/L盐酸将pH调至1一2。用二抓

甲烷提取3次，每次用量约100mL。合并3次提取的有机相，使其通过无水硫酸钠除去水分。此为酸性

组分。

注意在提取过程中如水相、有机相间的乳化层超过有机相的1/3，应使用离心等物理学方法进行分

离。

了2提取液浓缩

7.1.1,7.1.2所得提取液及7.1.3所得各有机组分提取液体积在1L以下时，可用K-D浓缩器浓

缩，如提取液体积大于1L，使用旋转蒸发器，将提取液蒸发至近100mL，用K-D浓缩器浓缩。留出

50%浓缩后的提取液以备重量分析及化学分析，另外50%继续用K-D浓缩器浓缩至1mL,

7.3溶剂置换

于40℃水浴条件下用平稳氮气流将浓缩过的提取液吹干。加入适量(1mL左右)DMSO或遗传毒

性检测所需的其他溶剂使萃取物溶解，并稀释至适当浓度以备进行遗传毒理学检测。

提取液应于一20`c避光保，并应在提取之日起的3周内进行检测。

8样品t计算结果的表示

8.1采气总量用m3表示。

8.2可吸人颗粒物采集总量用mg表示。