GB/T 24830-2009 拟毛刺线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法

ICS65.020.01

B16

中华人民共和国国家标准

GB/T24830—2009

拟毛刺线虫属（传毒种类）检疫

鉴定方法

IdentificationofParatrichodorusspeciesasvirus-vectorsfor

importandexportquarantine

2009-12-15发布2010-06-01实施

发布

GB/T24830—2009

目次

前言in

i范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4鉴定依据1

5仪器和用具2

6试剂和药品2

7现场检疫2

8实验室检验2

9形态学鉴定2

10结果判定5

11样品保存5

附录A（资料性附录）拟毛刺线虫属传毒种类、地理分布、寄主和所传病毒6

附录B（资料性附录）拟毛刺线虫属与其近似属鉴别特征检索表8

附录C（资料性附录）拟毛刺线虫属9种传毒线虫形态特征图9

附录D（资料性附录）拟毛刺线虫属9种传毒线虫测计值列表18

附录E（资料性附录）拟毛刺线虫属部分种类形态特征检索表19

参考文献28

T

GB/T24830—2009

前言

本标准的附录A、附录B、附录C、附录D和附录E均为资料性附录

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国云南出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。

本标准主要起草人：杜宇、蒋小龙、葛建军、李生贵、段禄华、周剑、梅华全、曹云华、寸东义。

m

GB/T24830—2009

拟毛刺线虫属(传毒种类)检疫

鉴定方法

1范围

本标准规定了拟毛刺线虫属传毒种类的的检疫鉴定方法。

本标准适用于植物、介质土和土壤中拟毛刺线虫属传毒种类的检疫和鉴定。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T24829毛刺线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

内齿针inneronchium

形成于食道内壁上，可以向前推进，与取食有关的食道齿针。

3.2

乳突papilla

突出于虫体角质层上乳头状的结构，具有感觉功能的器官。

3.3

体孔pores

虫体体内腺体在体表孔状的开口。

3.4

附着器supplements

从雄虫虫体角质层分离出来，具有附着功能,特别是在雄虫交配吋，起到粘着作用的一种分泌器官。

4鉴定依据

4.1分类地位

中文名：拟毛刺属传毒种类

英文名:Virus-vectorspeciesofStubby-rootnematodes

学名:ParatrichodorusCobb,1913

拟毛刺线虫传毒种类隶属线虫门(Nematoda)，无侧尾腺纲(Adcnophorea)，三矛目(Triplonchida

Cobb,1920),毛刺总科［(Trichodoroidea(Thorne,1935)Siddiqi,1974)］,毛刺科［(Trichodoridae

(Thorne,1935)Siddiqi,1974)］，拟毛刺线虫属(ParatrichodorusCobb,1913)。

4.2原理

拟毛刺线虫属传毒种类食性杂，为多年生植物的根部外寄生线虫。不但直接取食为害寄主植物，而

且，因其具有传毒能力，造成更大危害。在已知的49种拟毛刺线虫中，有9种包括葱拟毛刺线虫P.al-

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历"S、银莲花拟毛刺线虫P.anemonesy多变拟毛刺线虫P.diver^ensy西班牙拟毛刺线虫P.hispaniis、较

小拟毛刺线虫P.minor.短小拟毛刺线虫P.nanus.厚皮拟毛刺线虫P.pachydermus.光滑拟毛刺线虫

P.teres和突尼斯拟毛刺线虫P.tunisiensis为烟草脆裂病毒组Tobavirus烟草脆裂病毒(TRV)、豌豆

早褐病毒(PEBV)和辣椒环斑病毒(PRV)的传播媒介。

拟毛刺线虫属传毒线虫主要通过带根苗木、土壤及介质土传播，其形态学特征、传播途径、寄主范

围、地理分布和所传病毒的特性(参见附录A中的表A.1)是制定该检疫鉴定方法的依据。

5仪器和用具

按照GB/T24829的仪器和用具。

6试剂和药品

按照GB/T24829试剂和药品。

7现场检疫

按照GB/T24829进行现场检疫。

8实验室检验

&1线虫分离

按照GB/T24829进行线虫分离。

&2标本制作

按照GB/T24829制作标本。

&3显微摄影

若发现拟毛刺线虫，如果雌雄虫都存在吋，对雌、雄虫进行显微摄影。如果只有雌虫存在时，对雌虫

进行显微摄影。拍摄的重点包括整体形态；雌虫齿针、排泄孔、阴道、阴门、体孔、生殖系统；雄虫交合刺、

齿针、体孔、乳突和生殖系统等。并在图片上加注显微标尺。

&4测量

重点测量齿针针长、体长、a、b、V、T、交合刺长、引带长等。

9形态学鉴定

9.1拟毛刺线虫属形态鉴定特征

9.1.1拟毛刺线虫属形态特征描述

虫体角质层经热杀死或遇酸性固定液后强烈膨大。食道通常从背侧覆盖肠，极少不覆盖肠。

生殖系统双生殖腺，对生，受精囊有或无；无受精囊时，精子充满子宫，在生殖腺端部极少有精子。

有50%的种类存在侧体孔，极少发生在阴门前区。阴道短，明显小于阴门处二分之一体宽；阴道收缩肌

不明显；阴道骨化结果小或不明显；阴门孔状或呈纵裂或横裂状。

雄虫少见，仅有26%的种类有雄虫。雄虫腹中颈乳突无，如果有，通常只有1对颈乳突位于排泄孔

附近,极少有2对颈乳突存在。侧颈乳突无，如有，通常有1对乳突位于齿针基部或排泄孔附近。尾直，

有交合伞，或模糊，或明显。精子大，亚圆柱形的具腊肠形的细胞核；小的具卵圆形或圆形的细胞核；长

形的具长形的细胞核；中等大小的具圆形或梭形的细胞核，或细胞核不明显。交合刺悬肌不明显；交合

刺直。具1个或3个腹中前泄殖腔附着器，有吋有4个，在交合伞区，通常有2对附着器，第3个发育不

良，位于交合伞前区，有些种类，只有1个附着器存在。通常具1对亚腹泄殖腔后乳突。有1对泄殖腔

孔存在，极少无。

2

GB/T24830—2009

9.1.2拟毛刺线虫属与近似属的鉴定特征

拟毛刺线虫属与其近似属的鉴定特征比较参见附录B。

9.2传毒种类线虫形态鉴别特征

9.2.1葱拟毛刺线虫Paratrichodorusallius

该线虫区别于其他线虫的特征是两性生殖成虫的排泄孔位于神经环和后食道球前缘之间。食道腺

通常从肠腹侧覆盖肠（参见附录C中的图C.1）。

雌虫阴门纵裂，约2“m长；侧面观阴道圆形到椭圆形；骨化片小，约呈椭圆形，倾斜，相距远，相距

大于2.5“n,；侧体孔无;精子小，分布在子宫或生殖腺两端。

雄虫交合刺几乎直,杆区有横纹；1对腹中侧前泄殖腔附着器，位于交合刺收缩区；腹中颈乳突无；

精子小，细胞核球形。

9.2.2银莲花拟毛刺线虫Paratrichodorusanemones

两性生殖成虫的排泄孔位于后食道球前缘之前。食道腺通常从肠腹侧覆盖肠（参见附录C中的

图C.2）。

雌虫阴门孔状；阴道中部紧缩，是因阴道收缩肌收缩所致；阴道骨化片小、呈狭长的三角形，倾斜，两

骨化片两端相距1.5卩m〜2pm；受精囊1对;侧体孔2对,分别位于阴门前后。

雄虫交合刺细长、微腹弯，从头端到中间区域两侧缘不规则弯曲；杆区有横纹；具狭窄的交合伞；

3个腹中前泄殖腔附着器，其中，后2个位于交合刺收缩区后半部分；1个腹中颈乳突位于排泄孔之前；

1对侧颈孔，位于腹中颈乳突之前，通常1对侧体孔位于虫体前半部;精子大，细胞核大腊肠形的。

9.2.3多变拟毛刺线虫Paratrichodorusdivergens

两性生殖成虫的排泄孔位于食道峡部末端。食道腺从肠腹侧覆盖肠（参见附录C中的图C.3）。

雌虫阴门孔状，或横向短裂；阴道约成四边形，或不规则形；阴道骨化片大，水滴状三角形，或椭圆三

角形，倾斜，两骨化片相距4；zrn〜5.5,uni；受精囊无；多数雌虫生殖腺中有精子，精子大，亚圆柱形，细胞

核大，长腊肠形；侧体孔1对，位于亚尾端。

雄虫交合刺近直，端三分之一微腹弯，头端微加宽；杆区开始处外缘不规则，除了渐细的端部外，具

浅横纹；引带端半部加厚;交合伞弱；3个腹中前泄殖腔附着器，其中，第1个弱，后2个位于交合刺收缩

区后三分之一部分，有吋第2个位于交合刺收缩区中间，有些雄虫具4个腹中前泄殖腔附着器；1对亚

腹泄殖腔后乳突，1对亚尾端体孔；1个腹中颈乳突位于齿针之后，排泄孔之前；1对侧颈孔，位于腹中颈

乳突之前、或与之水平、或位于颈乳突于排泄孔之间、或位于排泄孔之后，精子大，亚圆柱形，细胞核大，

长腊肠形。

9.2.4西班牙拟毛刺线虫Paratrichodorushispanus

两性生殖成虫的排泄孔位于后食道球开始处。食道腺从肠腹侧覆盖肠（参见附录C中的图C.4）。

雌虫阴门孔状；阴道约成四边形，边缘锯齿有或无；阴道骨化片小，圆三角形，倾斜，两骨化片相互靠

近；受精囊1对,精子大，亚圆柱形，细胞核大，腊肠形；侧体孔1对,位于阴门前。

雄虫交合刺近直，端三分之一微腹弯，头端微加宽；杆区开始处外缘不规则，除了渐细的端部外，具

浅横纹；交合伞起始于第2个腹中前泄殖腔之前，终止于泄殖腔后乳突；3个腹中前泄殖腔附着器，其

中，后2个位于交合刺收缩区后半部分；1个腹中颈乳突位于排泄孔之前；1对侧颈孔，与腹中颈乳突水

平，精子大，亚圆柱形，细胞核大，腊肠形。

9.2.5较小拟毛刺线虫Paratrichodorusminor

两性生殖成虫的齿针长度在不同的种群之间或同一种群不同的个体之间的变化较大，具内齿针；排

泄孔位于后食道球近低部，或食道腺与肠连接处之后。食道腺通常从肠腹侧或亚腹侧短覆盖肠（参见附

录C中的图C.5）。

雌虫无侧体孔。阴门横裂，短，2卩m〜2.5pm；阴道呈四边形；侧面观阴道骨化片棒状，与虫体纵轴

平行，相距近；受精囊无；如果有精子存在，则分布于子宫中，精子非常小，圆形或线形。

3

GB/T24830—2009

雄虫极少;腹中颈乳突和侧颈孔无；交合刺杆区横纹分布与除两个端部以外的区域；引带具小的背

部突起；1个腹中前泄殖腔附着器，位于泄殖腔口前；交合伞起始于前泄殖腔附着器前，终止于泄殖腔后

乳突之后。

9.2.6短小拟毛刺线虫Paratrichodorusnanus

两性生殖成虫的齿针短（21“m〜26.5pm）,具内齿针；排泄孔位于食道腺与肠连接处之后，食道腺

不覆盖肠（参见附录C中的图C.6）。

雌虫阴门横裂；阴道近矩形；侧面观阴道骨化片圆三角形，相距近；侧体孔1对；受精囊无;精子分布

于子宫中或生殖腺两端,精子小，圆形或椭圆形；

雄虫交合刺细长，近直，约为肛门处体宽的2.5倍,杆区细，有横纹；1个腹中前泄殖腔附着器，靠近

泄殖腔口；颈乳突无；交合伞发达。

9.2.7厚皮拟毛刺线虫Pciratrichodoruspackydermus

两性生殖成虫排泄孔位于后食道球开始处；食道腺从肠的腹侧或亚腹侧覆盖肠，有吋不覆盖（参见

附录C中的图C.7）。

雌虫阴门孔状;侧面观阴道骨化片小，圆三角形到椭圆形，微分离；阴道近圆形、葫芦形或蝶形等；体

侧区各具1体孔；受精囊无;精子分布于子宫中，少数分布于输卵管中；2个〜5个侧体孔位于阴门后体

两侧；1或2对尾孔，如果有1对存在，则位于亚尾端；如果2对存在，则分别位于尾端侧面和亚尾端。

雄虫交合刺细长，末端微腹弯，杆区有横纹；引带与交合刺平行，末端加厚；交合伞狭窄；精子椭圆

形，精子细胞核腊肠形，长&5“m〜9.5pm。腹中颈乳突1个，位于排泄孔之前；1对侧颈孔位于颈乳

突之前，或与之平行；3个腹中前泄殖腔附着器，第1个与第2个相距2个体宽的距离，第2个和第3个

分布于交合刺收缩区，相距远；亚腹中后泄殖腔乳突2对，第1对，颗粒状，位于肛门后，不明显；第2对

位于尾孔前,较大;尾长与肛门处体宽等长。

9.2.8光滑拟毛刺线虫Paratrichodorusteres

两性生循成虫排泄孔位于后食道球开始处；食道腺从肠的腹侧或亚腹侧长覆盖肠（参见附录C中

的图C.8）。

雌虫阴门纵裂；侧面观阴道骨化片颗粒形到椭圆形，相距远；阴道近棱形或不规则形等；通常无精

子，如有，则分布于子宫中；通常有1个侧体孔位于阴门后，但是侧体孔的数量在个体间有变异。

雄虫少见；交合刺头状，杆区微膨大，有横纹；引带末端加宽，分二叉；交合伞狭窄；精子和其核小，通

常呈纤维状;腹中颈乳突和侧颈孔无;腹中前泄殖腔附着器3个，第1个与第2个相距2.5个体宽的距

离，第1个发育不完善;第2个位于交合刺中部区域;第3个位于泄殖腔口前；亚腹后泄殖腔乳突1对,

大；泄殖腔口具小的唇状突起前伸。

9.2.9突尼斯拟毛刺线虫Paratrichodorustunisiensis

两性生殖成虫排泄孔位于后食道球开始处；食道腺从肠的腹侧覆盖肠（参见附录C中的图C.9）。

雌虫阴门纵裂；阴道近棱形或不规则形等；侧面观阴道骨化片小，棒状或椭圆形，相距远，与阴道平

行或倾斜;侧体孔1对,位于阴门后体两侧；精子小，椭圆形，分布于子宫，集中在近输卵管处。

雄虫交合刺头状，杆区圆柱型直末端微膨大，有横纹；引带末端微加宽，并微分二叉；交合伞起始于

交合刺中部，终止于肛门后；精子和其核小，通常呈纤维状；腹中颈乳突1个，位于排泄孔之前，与神经环

水平或之后；腹中前泄殖腔附着器3个，第2个位于交合刺收缩区域中部或稍微靠前;第3个位于泄殖

腔口前；1对亚腹后泄殖腔乳突；腹中颈乳突和侧颈孔无。

9.39种传毒线虫测计值列表

9种传毒线虫测计值参见附录Do

9.4拟毛刺线虫属传毒种类和其他部分种类形态特征比较

拟毛刺线虫属线虫有效种类共有49种，其中，上述9种为传毒线虫种类，与其他部分种类的形态特

征比较可通过二岐检索表和多岐检索表来区别（参见附录E）。

4

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10结果判定

符合第9章形态鉴定对应特征的，结合其寄主、地理分布和传播方式等信息，判定为其对应的线虫

种类。

11样品保存

按照GB/T24829保存样品。

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洋葱、甜菜小麦、、浓香茉莉(.Jasmitiium

葱拟毛刺线虫TrichodorusaliiusJensen,1963；P・

Paratrichoclorusallius(P.)a/lius(Jensen,1963)Siddiqi,odoratissitnum)y杨柳(Sa/ixsp・)、栋树烟草脆裂病毒(Tobao

CQuercussaber｝、鳄梨、柠檬、葡萄、苹果rattlevirus,TRV)

Siddiqi,19741974；P.tansanieiissiSiddiqi,1974

和橄榄

TrichoclorusanemonesLoof,1965;P・大麦(Hordeunivulgare)y小麦、银莲花

烟草脆裂病毒(TRV)、豌

(Atlantadorus)anemones(Loof,1965)(^Anemonesp.)、啤酒花(Humuluslu-

豆早褐病毒(Peaearly-

Siddiqi,1974；A.a?ie/nones(Loof,puLus)、黑麦(Secalecereale)、黑麦草

1965),Siddiqi,1974(Lolitunmultiflorum)browningVirus,PEBV)

多变拟毛刺线虫马蹄莲(Zantedeschiaaethiopica)、常春

P・divermeilsAlmeidael.藤(Heeleraca)iarie)isis)、葡萄、海岸松

al.,2005(Pihuspinaster｝、马铃薯(耕地)

西班牙拟毛刺线虫马蹄莲(Zantedeschiaaethiopica)、常春

P.hispatius,Roca&藤(Hecleracanariensis)、葡萄、海岸松

Arias,1986｛Pi)iuspinaster｝、马铃薯(耕地)

1richoclorusminorColbran,1956；P・

(Naidorus)minor(Colbran,1956)

Siddiqi,1974；N.minor(Colbran,

1956),Siddiqi,1974；T.christieiAllen,烟草脆裂病毒(TRV)、辣

蚤1957；P.(N.)christiei(Allen,1957)椒环斑病毒(Pepperring­

.

1

Siddiqi,1974；N.christiei(Allen,1957)spotvirus,PRSV)

Siddiqi,1974；T.obesusRazjivin&Pen­

ton,1975；P.(N.)obesus(Razjivin&

Penton,1975)Rodriguezm&Bell,1978

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附录B

(资料性附录)

拟毛刺线虫属与其近似属鉴别特征检索表

B.1雌虫检索表

1)生殖系统单生，向前延伸2

——生殖系统双生，向前后延伸3

2)——体侧阴门前体孔1对，角质层不膨大单毛刺线虫属Monotrichodm-us

-体侧阴门前体孔无，角质层不膨大，或强烈膨大…无孔单毛刺线虫属Allolrichodorus

3)一一角质层不膨大；阴道长通常到达一分之一体宽处；侧面观阴道骨化片发达，小到大型；食道

腺通常不覆盖肠毛刺线虫属Irichodorus

-角质层膨大；阴道长远不及二分之一体宽处；侧面观阴道骨化片小;食道腺通常覆盖肠

拟毛刺线虫属Paralrichodm-us

B.2雄虫检索表

1)一一交合伞有，角质层膨大，交配肌仅分布于交合刺收缩区2

——交合伞无，角质层不膨大，交配肌前伸略超过或明显超过交合刺收缩区3

2)——角质层明显膨大；交合刺短到长，多数直；交配肌和交配悬肌弱；精子通常小；食道腺通常

从肠腹侧覆盖肠拟毛刺线虫属Paralrichodorus

-角质层膨大变异大；交合刺细长；交配肌和交配悬肌中等强壮；精子大，发育完善；食道腺

通常从肠背侧覆盖肠无孔单毛刺线虫属Allolrichodorus

3)——交配肌前伸明显超过交合刺收缩区；侧颈乳突1个〜3个，通常在交合刺收缩区有1个泄

殖腔前附着器毛刺线虫属trichodorus

—交配肌前伸略超过交合刺收缩区；侧颈乳突1个，通常在交合刺收缩区有1个〜2个泄殖

腔前附着器单毛刺线虫属Monolrichodorus

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