GB/T 47334-2026 蛋白检测 CRISPR Cas12a蛋白反式切割活性检测方法

ICS07080

CCSA.40

中华人民共和国国家标准

GB/T47334—2026

蛋白检测CRISPRCas12a蛋白反式切割

活性检测方法

Proteindetection—MethodformeasuringCRISPRCas12atrans-cleavageactivity

2026-03-31发布2026-07-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T47334—2026

目次

前言

…………………………Ⅲ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

缩略语

4……………………2

原理

5………………………2

试剂

6………………………2

仪器设备

7…………………3

试验步骤

8…………………3

试验数据处理

9……………4

质量控制

10…………………5

试验报告

11…………………5

附录资料性试剂中相关组分的序列信息

A()…………6

附录资料性试验步骤中反应组分体系配制信息

B()…………………7

附录资料性试验数据处理中的结果示例

C()…………8

参考文献

………………………9

Ⅰ

GB/T47334—2026

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由全国生化检测标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC387)。

本文件起草单位深圳市第二人民医院无锡吐露港生物医药科技有限公司深圳大学清华大学

:、、、、

深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司江南大学成都医学院第一附属医院中国计量测试学会上海市

、、、、

计量测试技术研究院有限公司国健药业深圳集团有限公司四川振兴检测科技股份有限公司

、()、。

本文件主要起草人顾大勇王金庄松宽刘翼振李捷王怡祁欢谢倩张译文李卫峰崔文璟

:、、、、、、、、、、、

许颖李兰英戴继海杨扬仲夫宋乔刘川杨杰

、、、、、、。

Ⅲ

GB/T47334—2026

蛋白检测CRISPRCas12a蛋白反式切割

活性检测方法

1范围

本文件描述了蛋白反式切割活性检测方法的原理试剂仪器设备试验步骤试

CRISPRCas12a、、、、

验数据处理

。

本文件适用于蛋白反式切割活性的检测

CRISPRCas12a。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

簇状规律间隔短回文重复序列clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeatsCRISPR

;

原核生物基因组中由短重复序列与间隔序列相间排列组成的一种遗传结构

,。

注1该结构通常源于整合到基因组中的外源片段是原核生物适应性免疫系统的组成部分

:DNA,。

注2其上游的前导序列通常包含启动子用于启动该结构的转录短重复序列长度通常为个个碱基对

:,。28~37,

间隔序列长度通常为个个碱基对用于识别同源外源

32~38,DNA。

32

.

Cas12a蛋白Cas12aprotein

系统中第类第型的一种引导的核酸酶切割靶标双链并反式切割非

CRISPR-Cas2ⅤRNA,DNA

靶标单链

DNA。

注其功能由核酸酶结构域介导

:RuvC。

33

.

CRISPR来源RNACRISPR-derivedRNAcrRNA

;

一段和目的片段序列互补引导蛋白剪切目的片段的序列

,Cas12aRNA。

34

.

Cas12a蛋白反式切割活性Cas12aproteintrans-cleavageactivity

蛋白与靶标形成三元复合体时切碎体系中任意序列的单链酶切活性

Cas12a、crRNADNA,DNA。

35

.

Cas12a蛋白反式切割活性单位trans-cleavageactivityunitofCas12aprotein

在反应体系下每分钟催化切割单链荧光报告探针所需的蛋白量

37℃、20μL,1pmolDNACas12a。

注简写为6

:transU,1IU=10transU。

1