YY/T 1939-2024 医疗器械细菌内毒素试验方法 重组C因子法

ICS1104001

CCSC.30.

中华人民共和国医药行业标准

YY/T1939—2024

医疗器械细菌内毒素试验方法

重组C因子法

Testforbacterialendotoxinsofmedicaldevices—RecombinantfactorCmethod

2024-07-08发布2025-07-20实施

国家药品监督管理局发布

YY/T1939—2024

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由国家药品监督管理局提出

。

本文件由全国医疗器械生物学评价标准化技术委员会归口

(SAC/TC248)。

本文件起草单位山东省医疗器械和药品包装检验研究院中国食品药品检定研究院辽宁省医疗

:、、

器械检验检测院

。

本文件主要起草人孙令骁邵安良余洋秦越王小蕾王诗琪

:、、、、、。

Ⅰ

YY/T1939—2024

引言

细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁的重要成分通常由多糖型抗原核心低聚糖和类脂组

,O、A

成其中类脂是内毒素的生物活性中心从临床角度看内毒素引起的脓毒症脓毒性休克和多器官

,A。,、

衰竭是死亡率较高的全身性疾病在自然界中革兰氏阴性菌广泛分布于水江河和海洋空气土壤

。,()、、

和人体中医疗器械制造过程中的高压蒸汽灭菌辐照和气体灭菌能够杀灭细菌但不能灭活内毒素

,、,。

由于细菌内毒素广泛存在于自然界中性质稳定并且可以穿透常规的除菌滤膜因此很难预防细菌内毒

,,

素污染

。

目前凝胶法和光度测定法是医疗器械细菌内毒素试验最主要的试验方法之一该方法具有较高的

,

灵敏性特异性准确性和经济性但该方法需要使用大量的鲎血来生产鲎试剂而东方鲎已成为我国的

、、,,

二级保护动物因此继续推广使用凝胶法和光度测定法不利于鲎资源的保护和发展重组因子法是

,。C

细菌内毒素检查法的一种补充方法该方法的推广使用可保护生态环境减缓鲎资源枯竭速度且本法

,,、,

不存在因子旁路干扰具有较高的专属性

G,。

Ⅱ

YY/T1939—2024

医疗器械细菌内毒素试验方法

重组C因子法

1范围

本文件描述了利用重组因子法检测医疗器械中细菌内毒素含量的试验方法

。

C

本文件适用于对医疗器械进行细菌内毒素的检测

。

规范性引用文件

2

本文件没有规范性引用文件

。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

C因子factorC

鲎试剂中一种对细菌内毒素敏感且能选择性识别内毒素的蛋白

,。

32

.

重组C因子recombinantfactorC

鲎试剂中的因子通过基因重组技术在真核细胞中表达的重组蛋白

C(3.1)。

试验原理

4

重组因子法是利用重组因子试剂与内毒素反应过程中的荧光信号变化而测定内毒素含量的

CC

方法重组因子与细菌内毒素结合后被激活由无活性的蛋白酶原转变成具有生物活性的蛋白酶识

,,,

C

别并催化下游荧光底物产生荧光信号荧光信号的强度和内毒素浓度成比例分别测量重组因子试

,。C

剂和供试品溶液孵育前后的荧光值并校正通过标准曲线计算出供试品中细菌内毒素的含量

,。

5主要设备

荧光酶标仪或多功能酶标仪电热干燥箱旋涡混合器等

、、。

6试剂和材料

细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品以下简称内毒素标准品重组因子试剂

(“”)、C

盒细菌内毒素检查用水移液器吸头微孔板

、、、、。

注1重组因子试剂盒中一般包括重组因子酶溶液荧光底物缓冲液等试剂

:CC、、。

注2试验所用耐热器具常用干热灭菌法用电热干燥箱至少去除可能存在的外源性内毒素塑料

:,(250℃、30min);

器具如微孔板