GB/T 21498-2008 大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定

犐犆犛６７．２００．２０

犡１４

中华人民共和国国家标准

／—／：

犌犅犜２１４９８２００８犐犛犗１４９０２２００１

大豆制品中胰蛋白酶抑制剂

活性的测定

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（：，）

ＩＳＯ１４９０２２００１ＩＤＴ

２００８０３０６发布２００８０８０１实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

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犌犅犜２１４９８２００８犐犛犗１４９０２２００１

前言

本标准等同采用ＩＳＯ１４９０２２００１：《动物饲料大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定》（英文版）。

为了便于使用，本标准对ＩＳＯ１４９０２２００１：进行了下列编辑性修改：

———将“本国际标准”改为“本标准”；

———用小数点“”代替原文中小数点“，”；

．

———删去原标准名称中“动物饲料”一词，直接采用“大豆制品”；

———将规范性引用文件中的“ＩＳＯ３６９６１９８７：分析实验室用水规格和试验方法”修改为

“／分析实验室用水规格和试验方法”；

ＧＢＴ６６８２

———对有关表格增加了表头；

———对有关公式进行了编号。

本标准的附录是规范性附录，附录是资料性附录。

ＡＢ

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Ⅰ

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大豆制品中胰蛋白酶抑制剂

活性的测定

１范围

本标准规定了大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定方法。胰蛋白酶抑制剂活性可以用来表示大

豆制品的烘烤程度。

本标准适用于大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定。

本方法的检出限为０．５ｍ／。

ｇｇ

２规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

／分析实验室用水规格和试验方法（／—，：）

ＧＢＴ６６８２ＧＢＴ６６８２１９９２ｎｅＩＳＯ３６９６１９８７

ｑ

３术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。国家标准ㅤ可打印ㅤ可复制ㅤ无水印ㅤ高清原版ㅤ去除空白页

３．１

胰蛋白酶抑制剂活性，

狋狉狊犻狀犻狀犺犻犫犻狋狅狉犪犮狋犻狏犻狋犜犐犃

狔狆狔

按照本标准所规定的程序测出的胰蛋白酶抑制剂质量除以试样质量所得的值。

注：胰蛋白酶抑制剂活性以／表示。

ｍｇｇ

４原理

在条件下，从样品中提取胰蛋白酶抑制剂。通过加入底物苯甲酰精氨酸对硝基苯胺

ｐＨ９．５Ｌ

（）测量残余的胰蛋白酶活性。用分光光度法测定释放的对硝基苯胺的量。

ＬＢＡＰＡ

５试剂和材料

仅使用分析纯试剂。

水：最低级，符合／要求。

５．１３ＧＢＴ６６８２

氢氧化钠溶液：（）／。

５．２犮ＮａＯＨ＝０．０１ｍｏｌＬ

５．３盐酸溶液：犮（）／。

ＨＣｌ＝６ｍｏｌＬ

盐酸溶液：（）／。

５．４犮ＨＣｌ＝１ｍｏｌＬ

盐酸溶液：犮（）／。

５．５ＨＣｌ＝０．１ｍｏｌＬ

盐酸溶液：（）／。

５．６犮ＨＣｌ＝０．００１ｍｏｌＬ

乙酸溶液：（）／。

５．７犮ＣＨＣＯＯＨ＝５．３ｍｏｌＬ

３

氯化钙（·）。

５．８ＣａＣｌ２ＨＯ

２２

氯化钙盐酸溶液：称取氯化钙（）溶解于／盐酸溶液（）中，调节

５．９０．７３５５．８１Ｌ０．００１ｍｏｌＬ５．６Ｈ

ｇｐ

至３．０±０．１。

１

／—／：

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１）

５．１０牛胰蛋白酶：Ｍｅｒｃｋ№２４５７９或等效物。

按测定活性。储藏于冰箱（）中。

９．４６．３

胰蛋白酶储备液：将胰蛋白酶（）放置至室温，称取胰蛋白酶置于容量瓶

５．１１５．１０２７．０ｍ１００ｍＬ

ｇ

（）中，以氯化钙盐酸溶液（）溶解，并定容至刻度。该溶液保存于冰箱中最多可使用。

６．１５．９５ｄ

胰蛋白酶使用液：吸取胰蛋白储备液（）加入容量瓶（）中，用氯化钙盐酸溶

５．１２５．１１５ｍＬ１００ｍＬ６．１

液（）稀释至刻度。

５．９

苯甲酰精氨酸对硝基苯胺（）。

５．１３ＬＬＢＡＰＡ

三羟甲基氨基甲烷（）。

５．１４Ｔｒｉｓ

二甲亚砜（）。

５．１５ＤＭＳＯ

氯化钙缓冲溶液：称取（）和氯化钙（）溶于预先加入水

５．１６Ｔｒｉｓ６．０５Ｔｒｉｓ５．１４０．７３５５．８９００ｍＬ

ｇｇ

的刻度量筒中，用／盐酸溶液（）调节值至，加水稀释至。

１０００ｍＬ６ｍｏｌＬ５．３ｐＨ８．２±０．１１０００ｍＬ

试剂：于使用当日制备。称取（）置于容量瓶中，用

５．１７ＬＢＡＰＡＳ６０ｍＬＢＡＰＡ５．１３１００ｍＬ１ｍＬ

ｇ

（）溶解，以氯化钙缓冲溶液（）稀释至刻度。

ＤＭＳＯ５．１５Ｔｒｉｓ５．１６

６仪器

实验室常规仪器，特别是下列仪器设备：

６．１容量瓶：１００ｍＬ。

６．２比色皿：光程１０ｍｍ。

６．３冰箱：控制温度于４℃±３℃。

６．４Ｈ计：分度值０．０５。

ｐ

６．５涡旋混合器。

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６．６分光光度计：适于在４１０ｎｍ波长下进行测量。

６．７秒表。

６．８水浴：具循环泵，可保持温度于３７℃±０．２５℃。

６．９粉碎设备：具０．５ｍｍ筛网。

６．１０离心机：径向加速度约为１５００（为标准自由落体加速度，／２）。

＝９．８０６６５ｍｓ

ｎｎｎ

犵犵犵

６．１１离心管。

７采样

实验室接收的样品应具有真实的代表性，且在运输和储藏过程中未损坏或变质。

采样不是本标准所规定的方法中的内容，推荐采用ＩＳＯ６４９７规定的取样方法。

８试样制备

用粉碎机粉碎部分代表性的样品，避免样品受热。充分混匀粉碎样品。

９分析步骤

９．１测定次数

如果需要检查重复性是否合适（），按照和重复性条件进行两份单试样的测定。

１１．２９．２９．５